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Cryptosporidium Oocyst Detection in Water Samples: Floatation Technique Enhanced with Immunofluorescence Is as Effective as Immunomagnetic Separation Method

  • Koompapong, Khuanchai;Sutthikornchai, Chantira;Sukthana, Yowalark
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제47권4호
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    • pp.353-357
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    • 2009
  • Cryptosporidium can cause gastrointestinal diseases worldwide, consequently posing public health problems and economic burden. Effective techniques for detecting contaminated oocysts in water are important to prevent and control the contamination. Immunomagnetic separation (IMS) method has been widely employed recently due to its efficiency, but, it is costly. Sucrose floatation technique is generally used for separating organisms by using their different specific gravity. It is effective and cheap but time consuming as well as requiring highly skilled personnel. Water turbidity and parasite load in water sample are additional factors affecting to the recovery rate of those 2 methods. We compared the efficiency of IMS and sucrose floatation methods to recover the spiked Cryptosporidium oocysts in various turbidity water samples. Cryptosporidium oocysts concentration at 1, $10^1$, $10^2$, and $10^3$ per $10{\mu}l$ were spiked into 3 sets of 10 ml-water turbidity (5, 50, and 500 NTU). The recovery rate of the 2 methods was not different. Oocyst load at the concentration < $10^2$ per 10 ml yielded unreliable results. Water turbidity at 500 NTU decreased the recovery rate of both techniques. The combination of sucrose floatation and immunofluorescense assay techniques (SF-FA) showed higher recovery rate than IMS and immunofluorescense assay (IMS-FA). We used this SF-FA to detect Cryptosporidium and Giardia from the river water samples and found 9 and 19 out of 30 (30% and 63.3%) positive, respectively. Our results favored sucrose floatation technique enhanced with immunofluorescense assay for detecting contaminated protozoa in water samples in general laboratories and in the real practical setting.

Extracellular DNAs Released form the Genetically Engineered E. coli CU103 During Growth in Different Liquid Media

  • Kim, Chi-Kyung;Park, Sang-Ho;Lim, Jai-Yun;Kim, Young-Chang;Kim, Youngsoo;Min, Kyung-Hee;Lee, Ki-Sung
    • Journal of Microbiology
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    • 제34권2호
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    • pp.144-150
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    • 1996
  • During growth of the genetically engineered E. coli CU103 in different media, extracellular DNAs released from the cells were studied. The extracellular DNAs released in the medium were concentrated by an thanol precipitation method and then quantified by a fluorescence method using Hoechst 33258. The released extracellular DNAs were also examined by gel electrophoresis and identified by Southern hybridization for the cloned pcbCD genes. The chromosomal DNAs and recombinant plasmid containing the cloned genes were observed to be released in an exponential growth phase. In Luria-Bertani (LB) broth and MM2-GLUCOSE, 210 and 69 ng/ml of DNAs were detected, respectively, after 3-4 days incubation at $30^{\circ}C$ and at pH 7.0. But the released DNAs were measured to be about 10-15 ng/ml in filtered river water (FW) and Tris-EDTA (TE). The at both $15^{\circ}C$ and $4^{\circ}C$, but the released DNAs were more easily degraded at the higher temperature. The extracellular DNAs were produced about 2 times more at pH 7.0 than at both pH 5.0 and pH 9.0 in MM2-glucose medium at $30^{\circ}C$. Therefore, the extracellular DNAs were found to be released actively from the cells during growth in liquid media.

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불꽃원자 흡수 분광법으로 활성탄소에 흡착된 메틸티몰 블루로 납(II)의 예비농축, 분리 및 측정 (Preconcentration, Separation and Determination of lead(II) with Methyl Thymol Blue Adsorbed on Activated Carbon Using Flame Atomic Absorption Spectrometry)

  • Ensafi, Ali A.;Ghaderi , Ali R.
    • 대한화학회지
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    • 제52권1호
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    • pp.16-22
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    • 2008
  • 예비농축 및 분리를 위한 온라인 시스템을 소개하였다. 이 방법은 활성탄소에 흡착된 메틸티몰 블루로 납(II)의 착체형성을 기저로 한다. 간섭이온의 효과는 물론 수용액상의 산성도, 고상의 용량, 흐름변수와 같은 희석용액으로부터 납(II)의 정량회수와 고상 시약의 준비 상태에 대해 연구되었다. 예비농축 후에 금속이온은 0.5M HNO3 용액의 5 ml에 자동적으로 용출되고 납이온의 양은 불꽃원자 흡수 분광법로 측정하였다. 최적조건하에서, 수용액시료의 납이온은 컬럼에 의해 약 1000배 분리 및 농축되었다. 검출한계는 0.001mg mL-1였다. 납은 강과 수돗물시료에서 98에서 102% 회수율을 보였다.

수동천에서의 세균의 분포와 생리적 활성도 (Bacterial Abundance and Heterotrophic Activity in Sudong Stream)

  • 최성찬;김상종
    • 미생물학회지
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    • 제26권4호
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    • pp.332-338
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    • 1988
  • 북한강 수계의 지류인 수동천에서 1986년 7월부터 1987년 3월까지 4개의 정점으로부터 종속영양 세균의 크기와 생리적 활성도를 조사하였다. 총 세균수는 0.8-$25.2\times 10^{5}$ cells/ml의 범위를 나타냈으며, 글루코오즈 흡수능 $V_{max}$은 0.006-24.39mg-C/l/hr의 변화폭을 보여주었다. 계절적인 분포에 있어서 $V_{max}$값은 여음에 높고, 겨울에 낫은 뚜렷한 계절적 양상이 판찰 되었으나 콜로니 생성균 수의 변화는 특정적 양상을 볼 수 없었다. 지역적으로는 인간활동의 영향을 거의 받지 않는 상류 정점에서 세균수와 생리적 활성도가 가장 낮으며, 유기 오염물질이 대량 유입되는 쟁점을 제외하고는 유사한 수푼을 나타내어 이러한 유입 현상이 전 수동천 생태계의 세균 군집의 크기 및 생리적 활성도의 변화에 가장 중요한 요인으로 작용함이 관찰되었다.

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근류균의 종자 접종방안의 차이가 근류형성 및 Alfalfa 유묘의 생장에 미치는 영향 (Effects of Seed Inoculation Methods on the Nodulation and the Growth of Alfalfa Seeding)

  • 이광회;이호진
    • 한국작물학회지
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    • 제26권2호
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    • pp.192-197
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    • 1981
  • Alfalfa에 대한 국내분이 근유균의 유효성과 효과적인 근유균 접종방법을 밝히고져 배지상에서 이들 균주의 근유형성 및 질소고정능력을 검토한 다음 이들 균주에 3가지 종자접종방법을 적용하여 사경재배를 실시한 결과는 다음과 같다. 1. 근유균 접종에 따른 근유의 형성은 접종 2주후부터 볼 수 있었고 유묘의 생장은 대조구보다 현저히 증가되있으며 질업처리구(70ugN/ml)와 차이가 없어 두 균주는 모두 유교균주로 평가되었다. 2. 두 균주 모두 Broth-vacuum 방법으로 접종한 것은 근규의 형성은 있었으나 실험기간 중 유묘의 생장에 있어서는 무접종 대조구와 차이가 없었다. 3. Peat & lime pelleting 방법은 두 균주 모두에서 근유형성과 유묘생장을 현저히 증가시켰으나 Peat-adhesive 방법은$ A_1$ strain 에서 만 효과적이었다. 4. 근유의 무게와 지상부 건물중 그리고 근유의 무게와 근중사이에는 두 균주 모두에서 고도의 정의 상관관계가 인정되었다.

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홍수터 여과 모형을 이용한 하천수중의 유기물과 질소 제거 (Removal of Organic Matter and Nitrogen from River Water in a Model System of Floodplain Filtration)

  • 하현수;김상태;김승현;정병룡;이영득;엄진섭;지승환;정종배
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제45권2호
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    • pp.84-91
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    • 2002
  • 유기물과 질소 함량이 높은 하천수가 대하천에 유입되기전 소하천의 잡초가 자라는 홍수터에 살포하여 사질 토층을 수직 이동하는 동안 잡초의 근권에서 유기물의 분해와 함께 탈질에 의해 질소가 제거되도록 하는 홍수터 여과공법을 개발하였다. 직경 15cm, 길이 150cm의 PVC pipe에 실제 홍수터에서 채취한 사질의 토양을 충진하여 제작된 홍수터 모형에 하천수를 27.2, 40.8, $68.0\;ml/day/m_2$의 유량으로 연속적으로 살포하고 정상상태에 이른 후 토양 깊이별로 토양 용액을 채취하여 유기물과 $NO_3-N$을 비롯한 무기질소의 이동과 제거 현상을 조사하였고 토양 기체를 채취하여 $N_2$$N_20$의 발생 현상을 측정하였다. 포화상태에 가까운 수준으로 유량을 조절할 경우 하천수에 포함된 유기물만을 이용하더라도 매우 효과적인 탈질 환경이 5cm깊이 부근의 표층 토양에서부터 형성되었으며 유기물의 제거와 함께 질소도 효과적으로 제거할 수 있는 것으로 나타났다. 90cm깊이의 홍수터 토양을 통과하는 동안 평균적으로 COD는 18.7에서 5mg/l로 무기질소함량은 2.7에서 0.4mg/l로 정화되었다. 탈질 기체는 대부분 $N_2$ 형태로 발생되었으며 온실효과와 오존층 파괴를 유발하는 $N_2O$ 발생량은 매우 적었다. 표층 토양에 잡초의 근권이 형성되어 있는 실제 홍수터에 이와 같은 기법을 적용할 경우 모형 실험에서 나타난 결과보다 더욱 활발한 탈질 현상이 유발될 수 있을 것으로 판단된다. 이러한 홍수터 여과는 부지가 따로 필요하지 않으므로 시설 및 운영비가 경쟁기술에 비해 싸고, 화학약품 처리나 슬러지 발생이 없는 환경친화적인 하천수 처리방법이 될 것으로 기대되며, 하천수 외에도 도시하수나 산업폐수의 3차 처리에도 응용되어 하폐수의 재활용을 통한 수자원의 절약과 하천수량의 증대에도 기여할 수 있을 것이다.

낙동강에서의 유기성 오염 유무에 따른 질화세균의 변화 (Changes of Nitrifying Bacteria Depending on the Presence and Absence of Organic Pollutant in Nak-Dong River)

  • 진선영;이영옥
    • 미생물학회지
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    • 제49권2호
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    • pp.137-145
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    • 2013
  • 유기성 오염원(생활하수 처리시설 방류수) 유무에 따른 질화 세균의 변화를 알아보기 위해 낙동강의 2 조사수역에서 다양한 형태의 질소(T-N, $NH_4$-N, $NO_2$-N, $NO_3$-N) 농도를 측정하였고 조사 수역에 있는 질화세균 종류를 확인한 후, fluorescent in situ hybridization (FISH)법으로 질화세균 수를 정량 평가하였다. 즉 암모니아 산화세균의 종류는 amoA 유전자, 그리고 아질산 산화 세균인 Nitrobacter sp.는 SSU 16S rDNA 특정 기호서열을 목표로 한 PCR-DGGE를 수행한 후 염기서열 분석으로 그들이 각각 Nitrosomonas sp., Nitrobacter sp.임이 확인됨에 따라 그에 상응하는 gene probe, NSO190와 NIT3을 사용해 FISH법을 수행하여 각 수역의 질화세균수를 비교하였다. 아울러 전반적인 세균학적 수질을 모니터링하기 위해 수계에 많은 ${\alpha}{\cdot}{\beta}{\cdot}{\gamma}$-Proteobacteria도 FISH법으로 검출하였다. ${\alpha}{\cdot}{\beta}{\cdot}{\gamma}$-Proteobacteria 분포도와 모든 유형의 질소 측정 결과에 따르면 정점 1 보다 정점 2의 유기물 오염도가 높다고 할 수 있었다. 이에 상응해 NSO160과 NIT3로 검출한 평균 질화세균수도 정점 1 (암모니아산화세균, $7.8{\times}10^5$; 아질산산화세균, $0.8{\times}10^6$ cells/ml)보다 정점 2 (암모니아산화세균, $9.3{\times}10^5$; 아질산산화세균, $1.6{\times}10^6$ cells/ml)에 더 많았고 그들이 총세균수에서 차지하는 평균 비율(%) 역시 정점 1 (NSO190, 18%; NIT3, 23%)에 비해 정점 2 (NSO190, 27%; NIT3, 34%)에서 높았다. 따라서 유기오염도가 낮은 상수원수 취수장 인근 수역인 정점 1 보다 생활하수처리시설 방류수로 인해 유기성 오염원이 상존하는 정점 2에서의 질화작용이 더 활발하다고 결론지을 수 있었다.

식물체를 이용한 조류제어 현장 적용성 실험 (Application of Various Plants as an Inhibitor of Algal Growth: Studies in Barge Enclosure and Artificially Eutrophicated Pond)

  • 김상훈;전선옥;임병진
    • 생태와환경
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    • 제35권2호통권98호
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    • pp.123-132
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    • 2002
  • 인공부영양화 실험실에서 조류를 대량 증식 시켜 초기세포수의 농도가 $10^4\;cells/ml$가 되게 한 후 잣잎, 솔잎, 은행잎은 각각 0.5 g/l를 투여하였고 애기마름은 0.3 g/l를 투여하여 조류제어 효과를 실험하였다. 그리고 북한강 인근의 바지선에 현장 조류제어 실험조를 설치하여 남조류(Microcystis)가 최대로 증식할 때 솔잎은 0.3 g/l를 투여하여 조류제어 실험을 수행하였다. 인공실험지에서는 잣잎과 솔잎은 Chl-3와 조류세포수 모두 평균 65%의 억제 효율을 보여 비교적 양호한 효과를 나타내었다. 그러나 은행잎은 Chl-a는 33%, 조류세포수는 55%로 잣잎과 솔잎에 비하여 조류제어 효과가 다소 감소하였다. 애기마름도 0.1 g/l와 0.3 g/l로 투여량과는 거의 상관없이 Chl-a늘 34%, 조류세포수는 $55{\sim}67%$의 조류증식 억제 효과를 보였다. 5현장 실험조에서는 초기 Chl-a농도는 $70{\sim}90\;{\mu}g/l$로 비교적 높은 농포를 보였으며 우점조류는 남조류인 Microcystis이었다. 솔잎은 Chl-a로보았을 때는 74%, 조류세포수는 83%의 조류제어효과를 보였다. 은행잎은 Chl-a로 보았을 때는 40%, 조류세포수는 65%로 솔잎 투여에 비해서는 조류 증식억제 효과가 감소하였다. 식물체를 이용한 조류제어실칩 결과 솔잎이 현장에서 조류제어 효과가 가장 좋은 것으로 분석되었고 투여량은 0.3 g/l가 이상적이며 다음이 잣잎 0.5 g/l가 비교적 양호한 효과를 보였다. 솔잎 투여량은 0.3 g/l에서 $70{\sim}80%$의 조류제어 효과를 나타내었고 독소량도 80%이상 제거되었다. 한편 은행잎과 애기마름은 조류제어 효과는 있는 것으로 추정되나 투여량은 추가적으로 실험을 더 수행해야 결정할 수 있을 것으로 본다. 식물체내 유기화합물 분석결과 조류제어에 효과가 있는 페놀 성분이 검출되었고 식물체 생태독성시험 결과 식물체 투여량은 $1{\sim}5\;g/l$가 적정한 것으로 분석되었다.

남해 해역의 해양환경변화가 시아노박테리아 개체수와 군집 조성에 미치는 영향 (Effect of Marine Environment Changes on the Abundance and Community Composition of Cyanobacteria in the South Sea of Korea)

  • 원종석;이연정;이호원;노재훈
    • Ocean and Polar Research
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    • 제43권4호
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    • pp.279-293
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    • 2021
  • To investigate the effect of seasonal marine environment conditions on the cyanobacteria abundance and diversity in the South Sea, four-seasonal surveys were conducted along the 127.5°E survey transect line in the central South Sea using flow cytometry and 16S-23S ITS on the Miseq platform from August 2016 to May 2017. The average abundance of Synechococcus varied from 3.3 × 103 to 7.4 × 104 cells ml-1. The abundance was the highest in the summer and the lowest in the winter, and the abundance fluctuated according to water temperature. The abundance was high in the outer sea affected by TWC. However, in summer, the Coastal areas affected by the Yangtze River were more populated than the outer sea. Prochlorococcus was rare and could not penetrate into coastal areas due to the fronts, but showed its dominance in the waters influenced by the TWC. Synechococcus clades II, VII, IX, CRD1, and CRD2 were predominant in the outer sea area affected by the TWC. In the coastal area, clades I and IV showed higher dominance whereas clades V, VI, WPC1, and 5.3-MS3 with euryhaline characteristics, showed a high dominance rate in the water masses affected by the low-salinity water of the Yangtze River in the summer. Clade XVI, XVII, CB1, CB5, and 5.3-I/II showed high dominance in nutrient-rich waters in the summer with increased water temperature. The abundance and community composition of cyanobacteria changed in the South Sea due to the influence of the TWC and stratification. In the summer, the abundance and the community composition differed, and were mainly affected by the general influence of the TWC in addition to the influence of the Yangtze River low-salinity water.

Application of Artificial Intelligence Technology for Dam-Reservoir Operation in Long-Term Solution to Flood and Drought in Upper Mun River Basin

  • Areeya Rittima;JidapaKraisangka;WudhichartSawangphol;YutthanaPhankamolsil;Allan Sriratana Tabucanon;YutthanaTalaluxmana;VarawootVudhivanich
    • 한국수자원학회:학술대회논문집
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    • 한국수자원학회 2023년도 학술발표회
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    • pp.30-30
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    • 2023
  • This study aims to establish the multi-reservoir operation system model in the Upper Mun River Basin which includes 5 main dams namely, Mun Bon (MB), Lamchae (LC), Lam Takhong (LTK), Lam Phraphoeng (LPP), and Lower Lam Chiengkrai (LLCK) Dams. The knowledge and AI technology were applied aiming to develop innovative prototype for SMART dam-reservoir operation in future. Two different sorts of reservoir operation system model namely, Fuzzy Logic (FL) and Constraint Programming (CP) as well as the development of rainfall and reservoir inflow prediction models using Machine Learning (ML) technique were made to help specify the right amount of daily reservoir releases for the Royal Irrigation Department (RID). The model could also provide the essential information particularly for the Office of National Water Resource of Thailand (ONWR) to determine the short-term and long-term water resource management plan and strengthen water security against flood and drought in this region. The simulated results of base case scenario for reservoir operation in the Upper Mun from 2008 to 2021 indicated that in the same circumstances, FL and CP models could specify the new release schemes to increase the reservoir water storages at the beginning of dry season of approximately 125.25 and 142.20 MCM per year. This means that supplying the agricultural water to farmers in dry season could be well managed. In other words, water scarcity problem could substantially be moderated at some extent in case of incapability to control the expansion of cultivated area size properly. Moreover, using AI technology to determine the new reservoir release schemes plays important role in reducing the actual volume of water shortfall in the basin although the drought situation at LTK and LLCK Dams were still existed in some periods of time. Meanwhile, considering the predicted inflow and hydrologic factors downstream of 5 main dams by FL model and minimizing the flood volume by CP model could ensure that flood risk was considerably minimized as a result of new release schemes.

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