Induced pluripotent stem cells (iPSCs) show great promise for replacing current stem cell therapies in the field of regenerative medicine. However, the original method for cellular reprogramming, involving four exogenous transcription factors, is characterized by low efficiency. Here, we focused on using epigenetic modifications to enhance the reprogramming efficiency. We hypothesized that there would be a new reprogramming factor involved in DNA demethylation, acting on the promoters of pluripotency-related genes. We screened proteins that bind to the methylated promoter of Oct4 and identified Zinc finger protein 127 (Zfp127), the functions of which have not yet been identified. We found that Zfp127 binds to the Oct4 promoter. Overexpression of Zfp127 in fibroblasts induced demethylation of the Oct4 promoter, thus enhancing Oct4 promoter activity and gene expression. These results demonstrate that Zfp127 is a novel regulator of Oct4, and may become a potent target to improve cellular reprogramming.
Yun, Young-Shik;Kang, Eun-Hye;Yun, In Sik;Kim, Yong Oock;Yeo, Jong-Souk
Journal of International Society for Simulation Surgery
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제4권1호
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pp.1-8
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2017
In the field of tissue engineering, researches have been actively conducted to regulate stem cell fate by understanding the interaction between cell and materials. This approach is expected as a promising therapeutic method in the future medicine by utilizing differentiation of stem cells into desired cells or tissues using biomaterial. For this regenerative medicine, there exist lots of attempts to construct optimized structures of various shapes and sizes that can regulate the stem cell fate. In this review, we will empathize the topographic effect as stem cell niche on the mesenchymal stem cell (MSC) response (cell attachment, proliferation, and differentiation) according to the shape and size of the structure of the substrates, and comprehensively analyze the importance and the effect of shape and size of the surface topography.
Regenerative medicine using stem cells from various sources are emerging treatment modality in several refractory diseases in veterinary medicine. It is well-known that stem cells can differentiate into specific cell types, self-renew, and regenerate. In addition, the unique immunomodulatory effects of stem cells have made stem cell transplantation a promising option for treating a wide range of disease and injuries. Recently, the medical demands for companion animals have been rapidly increasing, and certain disease conditions require alternative treatment options. In this review, we focused on stem cell application research in companion animals including experimental models, case reports and clinical trials in dogs and cats. The clinical studies and therapeutic protocols were categorized, evaluated and summarized according to the organ systems involved. The results indicate that evidence for the effectiveness of cell-based treatment in specific diseases or organ systems is not yet conclusive. Nonetheless, stem cell therapy may be a realistic treatment option in the near future, therefore, considerable efforts are needed to find optimized cell sources, cell numbers and delivery methods in order to standardize treatment methods and evaluation processes.
While axons in the peripheral nerve can regenerate and lead to functional recovery to a certain extent after injury, its efficacy varies depending on the severity and duration of the injury. Here, we investigated the effects of Boyanghwano-tang (BYHOT) treatment on the regenerative responses in the sciatic nerves after prolonged transection and coaptation surgery. In mice given crush injury, axonal regeneration was completed when analyzed 1 week later and did not show any difference in regenerative reponses in the distal portion of the nerve between saline- and BYHOT-treated groups. In animal models with transection and reconnection, axonal regeneration was markedly retarded compared to animals with crush injury. Regenerating axons were extended into the reconnected distal portion of the nerve more actively in animals treated with BYHOT than saline controls. Cdc2 protein was similarly induced in nerves with crush injury and with transection and recollection, and its level was lower in BYHOT-treated animal than saline control when measured 2 weeks after nerve reconnection. These results suggest that BYHOT may be useful to promote axonal regeneration in the peripheral nerve after severe injury.
Graphene is a one-atom-thick sheet composed of carbon atoms only. It has a two-dimensional honeycomb structure with $sp^2$ orbital bonding, which presents some unique properties. Due to large Young's modulus, good electrical conductivity, ability to immobilize several kinds of small molecules and proteins, and biocompatibility of graphene, it has attracted interests inits ability to enhance cell growth and differentiation, followed by recent several studies. We reviewed about the osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells, and neurogenic differentiation of neuron stem cells, and the ectodermal and mesodermal differentiation of induced pluripotent stem cells using graphene. Graphene has not only enhanced the adhesion and proliferation of mesenchymal stem cells, but also led to the faster differentiation even without any other exogenous signals. Nonetheless, graphene has some cytotoxicities in its amount-response manner, which is critical to regenerative medicine. The cytotoxicities of graphene were compared with those of grapheneoxide and carbon nanotubes.
Manganese superoxide dismutase (MnSOD) is a vital enzyme that protects cells from free radicals through eliminating superoxide radicals ($O^{2-}$). Hirudin, a kind of small active peptide molecule, is one of the strongest anticoagulants that can effectively cure thrombus diseases. In this study, we fused Hirudin to the C terminus of human MnSOD with the GGGGS linker to generate a novel dual-feature fusion protein, denoted as hMnSOD-Hirudin. The hMnSOD-Hirudin gene fragment was cloned into the pET15b (SmaI, CIAP) vector, forming a recombinant pET15b-hMnSOD-Hirudin plasmid, and then was transferred into Escherichia coli strain Rosetta-gami for expression. SDS-PAGE was used to detect the fusion protein, which was expected to be about 30 kDa upon IPTG induction. Furthermore, the hMnSOD-Hirudin protein was heavily detected as a soluble form in the supernatant. The purification rate observed after Ni NTA affinity chromatography was above 95%. The hMnSOD-Hirudin protein yield reached 67.25 mg per liter of bacterial culture. The identity of the purified protein was confirmed by western blotting. The hMnSOD-Hirudin protein activity assay evinced that the antioxidation activity of the hMnSOD-Hirudin protein obtained was $2,444.0{\pm}96.0U/mg$, and the anticoagulant activity of the hMnSOD-Hirudin protein was $599.0{\pm}35.0ATU/mg$. In addition, in vitro bioactivity assay showed that the hMnSOD-Hirudin protein had no or little cytotoxicity in H9c2, HK-2, and H9 (human $CD_4{^+}$, T cell) cell lines. Transwell migration assay and invasion assay showed that the hMnSOD-Hirudin protein could suppress human lung cancer 95-D cell metastasis and invasion in vitro.
The use of human mesenchymal stem cells (hMSCs) in cell-based therapy has attracted extensive interest in the field of regenerative medicine, and it shows applications to numerous incurable diseases. hMSCs show several superior properties for therapeutic use compared to other types of stem cells. Different cell types are discussed in terms of their advantages and disadvantages, with focus on the characteristics of hMSCs. hMSCs can proliferate readily and produce differentiated cells that can substitute for the targeted affected tissue. To maximize the therapeutic effects of hMSCs, a substantial number of these cells are essential, requiring extensive ex vivo cell expansion. However, hMSCs have a limited lifespan in an in vitro culture condition. The senescence of hMSCs is a double-edged sword from the viewpoint of clinical applications. Although their limited cell proliferation potency protects them from malignant transformation after transplantation, senescence can alter various cell functions including proliferation, differentiation, and migration, that are essential for their therapeutic efficacy. Numerous trials to overcome the limited lifespan of mesenchymal stem cells are discussed.
In this study, we investigated various coating methods of graphene oxide on the surface of a petri dish made of polystyrene and analyzed the physical and chemical properties of the coated surface. For coating, spinning, spraying and pressing methods were attempted. The coated surface was characterized by SEM, Raman Spectroscopy, AFM, FT-IR, UV-Vis Spectroscopy and Contact Angle measurement. By spin coating and spray coating, well distributed graphene oxide in the form of multiple islands on the plastic surface with an average size of 5 to 20㎛ are observed by SEM, and high binding energy between graphene oxide and plastic surface is measured by AFM. In case of hand press coating, graphene oxide of 10㎛ or more was observed, and low surface energy was measured. By FT-IR and Raman Spectroscopy analysis, surface coating of graphene oxide was confirmed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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