Biotechnology will play critical role in improving animal productivity. Animal growth rate and muscle deposition potential can be greatly improved by the application of biotechnology and biotechnological products. Administration of recombinant somatotropin (ST) or other compounds such as IGF-1 and growth hormone-releasing peptides (GHRPs) can enhance growth rate and carcass lean percentage. Gene transfer offers a powerful approach to manipulate endocrine system and metabolic pathways toward faster growth and better feed efficiency. Biotechnology is also extensively used for improving metabolism and activity of gut microorganisms for better nutrient digestibility. Knockout of growth-inhibiting genes such as myostatin results in considerable acceleration of body weight and muscle growth. Animal growth can also be improved by the use of gene therapy. Immunomodulation is another approach for efficient growth through controlling the activity of endogenous anabolic hormones. All the above aspects will be discussed in this review.
Erythropoietin (EPO), a glycoprotein hormone produced from primarily cells of the peritubular capillary endothelium of the kidney, is responsible for the regulation of red blood cell production. We have been investigating the roles of glycosylation site added in the biosynthesis and function of recombinant protein. In this study, we analyzed by immunohistochemical methods adaptive mechanisms to excessive erythrocytosis in transgenic (tg) mice expressing dimeric human erythropoietin (dHuEPO) gene. Splenomegaly was observed over 11~21 times in the tg mice. The 2,672 candidate spleen-derived genes were identified through the microarray analysis method, and decreased genes were higher than increased genes in the spleen. The specific proteins in the increased and decreased genes were analyzed by immunohistochemical methods. Our results demonstrate that problems of abnormal splenomegaly would solve in tg mice overexpressing dHuEPO gene.
한국식물학회 1987년도 식물생명공학 심포지움 논문집 Proceedings of Symposia on Plant Biotechnology
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pp.117-132
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1987
Plants are inherited spatial and temporal coordination systems in their growth and differentiation processes which are precisely governed by the two interlocked control systems; autogenous and environmental. Looking into the overall course of plant development from molecular to organismal level, it can be comparable to a concerto for plant hormones, environmental stimuli and plant genomic orchestra conducted by an unidentified virtuoso. Some of the recent significant attempts to puzzle out the mystery of the life processes of plant development are briefly reviewed. The revolutionary advances in understanding the mystic processes are contemporarily achieved by the application of various molecular techniques. The characterization of plant genomes is now attained through recombinant DNA approaches, and the sensitive detection of specific gene products during the plant development is perimitted by the immunochemical procedures. However, along with the recognition of underlying molecular events such as developmental changes in gene expression and hormone-receptor interrelation associated with tissue sensitivity to hormones, more emphasis should be placed upon the physiological approaches of organismal level for the understanding the correlative systems of the developmental processes of plants as intact eukaryotic organisms.
Jo, Yeong-Woo;Park, Yong-Man;Lee, Ghun-Il;Yang, Hi-Chang;Kim, Mi-Ryang;Lee, Sung-Hee;Kwon, Jong-Won;Kim, Won-Bae;Choi, Eung-Chil
대한약학회:학술대회논문집
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대한약학회 2002년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2
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pp.424.2-424.2
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2002
The in vivo release characteristics of rhGH-loaded PLGA microsphere prepared using a double emulsion process from hydrophilic 50:50 poly(D.L-lactide-co-glycolide) (PLGA) polymers were analyzed. This formulation showed particle size of ca 53.1$\mu\textrm{m}$ with high drug incorporation efficiency. To investigate in vivo release kinetics without the interference of formation of antibodies to rhGH in the experimental animals, the animals were immunosuppressed by treatment with Cyclosporin. (omitted)
세포 분열 및 성장 촉진에 영향을 주는 상피세포 성장인자(Epidermal Growth Factor, EGF)는 다양한 의학적 용도를 갖고 있는 호르몬 단백질이다. 본 연구에서는 human EGF 유전자를 대장균 코돈에 최적화 하고 pRSET 벡터에 클로닝하여 발현벡터를 구축하였다. Human EGF를 봉입체가 아닌 활성이 있는 형태로의 과량 발현을 위해 코돈의 최적화와 더불어 최초로 샤페론 공발현이 시도되었다. 발현된 Native protein 형태의 재조합 human EGF는 고순도로 정제하기 위해 Ion Exchange Chromatography를 2번 연속적으로 수행하여 순수 분리 정제되었고, ELISA 분석결과 99% 이상으로 재조합 EGF의 활성도가 상업용 EGF와 유사하게 나타났으며, 세포증식시험 결과 인간 재조합 EGF는 인체 피부 섬유아세포의 세포증식을 촉진하는 것으로 확인 되었다. 본 연구의 인간 EGF 발현 시스템은 양적인 측면 뿐 아니라 성공적인 활성형태의 발현으로 추가적인 재접힘 과정 및 N 말단의 융합부분을 제거하기 위한 크로마토그래피 작업이 필요가 없다는 점에서 기존의 방법들에 대체 될 수 있는 효과적인 인간 EGF 발현 시스템을 제공하고 있다.
본 연구는 rBST, vitamin E 및 selenium (Se)의 투여가 한우 종모우의 혈액성분 및 호르몬의 농도변화에 미치는 영향을 검토하였다. 1. rBST 투여구, Vit. E 투여구 및 Se 투여가 한우 종모우의 혈액성분에 미치는 효과를 조사한 결과, 혈중 albumin의 함량은 Se 투여구가 대조구, rBST 투여구 및 Vit. E 투여구보다 통계적으로 유의하게 높은 함량을 나타났으며 (P<0.05), 혼합투여구는 여타구 (대조구, rBST 투여구 및 vitamin E 투여구)보다 통계적으로 유의하게 높게 나타났다 (P<0.05). 혈중 BUN (Blood Urea Nitrogen)과 creatinine의 함량은 rBST 투여구가 여타구보다 통계적으로 유의하게 높게 나타났다 (P<0.05). 혈중 total protein 함량은 rBST 투여구, Se 투여구 및 혼합투여구가 대조구보다 통계적으로 유의하게 높은 함량을 나타냈다 (P<0.05). 혈중 calcium, cholesterol, glucose, inorganic phosphoros 의 함량은 투여구간에 차이가 없었다 (P>0.05). 2. rBST, Vit. E 및 Se 투여가 한우 종모우의 혈중내 호르몬의 변화에 미치는 효과를 조사한 결과, 혈중 estradiol의 농도는 Se 투여구와 혼합투여구가 여타구 (대조구, rBST 투여구 및 Vit. E 투여구 )보다 다소 높게 나타났지만 유의차는 인정되지 않았으며 (P>0.05), 혈중 testeserone의 농도는 투여구간에 커다란 차이는 없었다 (P>0.05).
Park, Jong-Ju;JarGal, Naidansuren;Yoon, Jong-Taek;Min, Kwan-Sik
Reproductive and Developmental Biology
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제34권1호
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pp.33-40
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2010
Equine chorionic gonadotropin (eCG) is a heavily glycosylated glycoprotein composed of non-covalently linked $\alpha$- and $\beta$-subunits. To study the function and signal transduction of tethered recombinant-eCG (rec-eCG), a single chain eCG molecule was constructed, and the rec-eCG protein was prepared. In this study, we constructed 5 mutants (${\Delta}1$, ${\Delta}2$, ${\Delta}3$, ${\Delta}4$, and ${\Delta}5$) of rec-eCG using data about known glycoprotein hormones to analyze the role of specific follicle stimulating homone (FSH)-like activity. Three amino acids of certain specific sites were replaced with alanine. The expression vectors were transfected into CHO cells and subjected to G418 selection for 2~3 weeks. The media were collected and the quantity of secreted tethered rec-eCGs was quantified by ELISA. The LH- and FSH-like activities were assayed in terms of cAMP production by rat LH/CG and rat FSH receptors. Then, the metabolic clearance rate analyzed by the injection of rec-eCG (5 IU) into the tail vein was analyzed. The mutant eCGs (${\Delta}l$, ${\Delta}4$, and ${\Delta}5$) were transcripted, but not translated into proteins. Rec-eCG A2 was secreted in much lower amounts than the wild type. Only the rec-eCG ${\Delta}3$ ($\beta$-subunit: $Gln^{94}-Ile^{95}-Lys^{96}{\rightarrow}Ala^{94}-Ala^{95}-Ala^{96}$) was efficiently secreted. Although activity is low, its LH-like activity was similar to that of tethered $eCG{\beta\alpha}$. However, the FSH-like activity of rec-$eCG{\beta\alpha\Delta}3$ was completely flat. The result of the analysis of the metabolic clearance rate shoed the persistence of the mutant in the blood until 4 hours after the injection. After then, it almost disappeared at 8 hours. Taken together, these data suggest that 94~96 amino acid sequences in eCG $\beta$-subunit appear to be of utmost importance for signal transduction of the FSH receptor.
Ethylene, known as a stress hormone regulate wide developmental processes including germination, root hair initiation, root and shoot primordial formation and elongation, leaf and flower senescence and abscission, fruit ripening. The acceleration of ethylene biosynthesis in plant associated with environmental and biological stresses. 1-Aminocycloprophane-1-carboxlyate deaminase(ACCD) is an enzyme that cleaves ACC into and ammonia, a precursor of the plant hormone ethylene. Plant growth-promoting rhizobacteria (PGPR) having ACCD can decrease endogenous ACC level of tissue, resulting in reduced production of ethylene in plants. ACC deaminse was a key enzyme for protect stressed plants from injurious effects of ethylene. ACCD gene was encoded from Pseudomonas flourescens, PGPR and was cloned in Escherichia coli. We expressed the recombinant ACCD(rACCD) containing 357 amino acids with molecular weight 39 kDa that revealed by SDS-PAGE and western blot. The rACCD was purified by Ni-NTA purification system. The active form of rACCD having enzyme activity converted ACC to a-ketobutyrate. The optimal pH for ACC deaminase activity was pH 8.5, but no activity below pH 7.0 and a less severe tapering activity at base condition resulting in loss of activity at over pH 11. The optimal temperature of the enzyme was $30^{\circ}$ and a slightly less severe tapering activity at 15 - 30$^{\circ}$, but no activity over $35^{\circ}$. P. flourescens ACC deaminase has a highly conserved residue that plays in allowing substrate accessibility to the active sites. The enzymatic properties of this rACCD will provide an important reference for analysis of newly isolated ACCD and identification of newly isolated PGPR containing ACCD.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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