염색 공단 폐수로부터 채취한 시료에서 Remazol Black B를 유일 탄소원으로 성장할 수 있는 미생물들을 순수 분리 하고, 염료 분해능이 가장 우수한 균주를 API 20E kit를 이용해 생화확적 특성을 분석해 본 결과, Stenotrophomonas maltophilia EJ-211로 명명하였다. S. maltophilia EJ-211에 의한 난분해성 반응염료인 Remazol Black B 분해 반응을 분석한 결과, 보조 탄소원으로 포도당 1.0%(w/v), 질소원으로 trypton peptone은 1.0%(w/v), 3$0^{\circ}C$, pH 6.5의 최적 조건을 결정할 수 있었다. 호기적 조건에서의 S. maltophilia EJ-211의 Remazol Black B는 28시간 동안 약 86% 수준의 염료 분해능을 보여주어 Remazol Black B에 대한 생분해능이 아주 우수함을 확인할 수 있었다.
반응염색(反應染色) 견(絹) fibroin의 graft 중합(重合) 거동(擧動)을 알아보기 위하여, C. I. Reactive Yellow 179, Red 2, Black 5, Blue 13, Blue 49, Blue 4, Blue 19, Red 6, Blue 71, Blue 21로 견(絹) fibroin의 염착량(染着量)이 각각 다르게 염색(染色)하고, methacrylamide graft 중합(重合)하였으며 그 결론(結論)은 다음과 같다. 1. 염료(染料)의 고착속도(固着速度)는 흡착속도(吸着速度)와 일치(一致)하는 경향(傾向)이었으며, 고착속도(固着速度)는 Yellow 179 및 Blue 71이 가장 낮았고, Black 5, Blue 49, Blue 4, Blue 19, Blue 21은 비교적 빠른 것으로 나타났다. 2. 염색시간(染色時間)이 경과(經過)할수록 즉(卽), 염착량(染着量)이 증가(增加)할수록 증량율(增量率)은 감소(減少)하는 것으로 나타났으나, Blue 71 및 Blue 21 염색(染色) 견(絹) fibroin의 증량율(增量率)은 염착량(染着量)의 다소(多少)에 관계없이 현저하게 높았으며, Blue 19의 경우 증량율(增量率)은 12% 내외(內外)로 일정(一定)하게 나타났고, Yellow 179 염색(染色) 견(絹) fibroin의 증량율(增量率)은 무처리(無處理) 견(絹) fibroin과 비슷한 것으로 나타났다. 3. 평형염색(平衡染色) 견(絹) fibroin의 증량율(增量率)은 Blue 71 및 Blue 21 염색(染色) 견(絹) fibroin의 경우를 제외하고는 모두 무처리(無處理) 견(絹) fibroin에 비하여 낮은 것으로 나타났으며, 염색온도(染色溫度)가 상승(上昇)할수록 증량율(增量率)은 저하(低下)하는 것으로 나타났다. 4. Graft 중합(重合) 과정에서 색상(色相)이 다소(多少) 변화(變化)하는 것으로 나타났다.
그람음성균의 외막은 수많은 생물물리학적 및 생화학적 과정이 작용하여 생존력을 유지하도록 설계되어 있는 세포환경의 가장 바깥 층이다. 세포공학의 발전으로 인해 박테리아의 막 환경을 변경하는 등 유전정보를 원하는 대로 조작할 수 있게 되었고 이는 박테리아를 특정 목적에 적용시킬 수 있게 하였다. 그중 기능성 분자를 박테리아 외막에 표지하는 세포 표면공학은 숙주세포가 특정 외부물질이나 자극에 반응하도록 유도하는 전략 중 하나이다. 기능성 펩타이드 또는 단백질을 세포 표면에 표지하기 위한 방법으로 막 고정 모티프를 융합한 후 세포 내에서 발현하는 방법이 일반적으로 사용되고 있지만 이는 박테리아 시스템에서 발현할 수 없는 외인성 단백질이나 크기가 큰 단백질에는 적용할 수 없다는 한계점이 있다. 박테리아 외막의 구성요소에 자연적으로 존재하는 반응성 그룹과 기능성 물질을 화학접합하는 방법도 있으나 필수 구성 요소의 비특이적 변형으로 인해 세포의 생장이 저해되는 경우가 많다. 본 연구에서는 비천연아미노산 또는 자가결합 도메인을 사용해 대장균의 세포 표면을 부위 특이적으로 형광 표지하는 두 가지의 접근법을 수행하였다. 첫 번째 접근법은 화학선택적 반응성을 지닌 비천연아미노산이 삽입된 펩타이드를 대장균 표면에 발현하여 위치 특이적으로 형광염료를 접합시키는 방법이다. 두 번째 접근법은 자가결합능력을 지닌 이종 이량체 코일-코일에서 유래된 α-나선 도메인을 대장균 외막에 발현하고 녹색 형광 단백질이 융합된 상보적인 α-나선 도메인을 막 표면에 특이적으로 고정하는 방법이다. 제시된 방법들은 위치와 시간이 제어된 방식으로 박테리아 외막에 새로운 기능을 부여하는 방법론으로서 유용하다.
This study was conducted to examine the optimal concentration and treatment time of antioxidants for inhibition of the ROS generation in bovine somatic cell nuclear transfer (SCNT) embryos. Bovine oocytes were activated parthenogenetically, during which oocytes were treated with various antioxidants to determine the optimal concentrations and kind of antioxidants. Determined antioxidants were applied to oocytes during in vitro maturation (IVM) and/or SCNT procedures. Finally, antioxidant-treated SCNT embryos were compared with in vitro fertilized (IVF) embryos. $H_2O_2$ levels were analyzed in embryos at 20 h of activation, fusion or insemination by staining of embryos in $10{\mu}M$ 2'7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate (H2DCFDA) dye, followed by fluorescence microscopy. $H_2O_2$ levels of parthenogenetic embryos were significantly lower in $25{\mu}M$${\beta}$-mercaptoethanol (${\beta}$-ME), $50{\mu}M$ L-ascorbic acid (Vit. C), and $50{\mu}M$ L-glutathione (GSH) treatment groups than each control group ($24.0{\pm}1.5$ vs $39.0{\pm}1.1$, $29.7{\pm}1.0$ vs $37.0{\pm}1.2$, and $32.9{\pm}0.8$ vs $36.3{\pm}0.8$ pixels/embryo, p<0.05). There were no differences among above concentration of antioxidants in direct comparison ($33.6{\pm}0.9{\sim}35.2{\pm}1.1$ pixels/embryo). Thus, an antioxidant of $50{\mu}M$ Vit. C was selected for SCNT. $H_2O_2$ levels of bovine SCNT embryos were significantly lower in embryos treated with Vit. C during only SCNT procedure ($26.4{\pm}1.1$ pixels/embryo, p<0.05) than the treatment group during IVM ($29.9{\pm}1.1$ pixels/embryo) and non-treated control ($34.3{\pm}1.0$ pixels/embryo). Moreover, $H_2O_2$ level of SCNT embryos treated with Vit. C during SCNT procedure was similar to that of IVF embryos. These results suggest that the antioxidant treatment during SCNT procedures can reduce the ROS generation level of SCNT bovine embryos.
본 연구에서는 전복을 동결 건조시킨 후 전복의 지방산을 비교 분석하였고 세포독성 활성 및 세포 내 활성산소종 생성 억제 효과를 측정하여 전복의 생리활성을 알아보고자 하였다. 지방산 조성 변화를 살펴보면 포화지방산들 내에서는 16:0의 함량이 건조 전복에서 높았고 불포화지방산들 내에서는 건조 전복의 경우 낮은 함량의 20:4n-6와 높은 함량의 22:6n-3를 나타내었다. 전복 A+M 추출물을 0.05 및 0.1 mg/ml 첨가농도로 HT-29 암세포에 처리했을 때 24%의 세포독성 효과를 나타내었다(p<0.05). MeOH 추출물의 경우 A+M 추출물과 비교했을 때 세포독성 효과가 낮았다. 건조 전복의 각 분획물을 농도별로 처리하였을 때, 농도의존적으로 세포독성 활성을 나타내었고, 특히 85% aq. MeOH 분획물에 의한 세포독성 활성이 가장 높았다(p<0.05). 세포 내 활성산소종 생성 억제효과에서 낮은 농도에서는 MeOH 추출물보다는 A+M 추출물에 의한 저해효과가 높았으며 분획물들 간 큰 차이는 없으나 85% aq. MeOH 분획물에 의한 생성 억제효과가 다소 높아 36%의 활성산소종 억제효과를 나타내었다.
Kim, Beob-Soo;Yeo, Tae-Yun;Yun, Yeon-Hee;Lee, Byung-Kook;Cho, Yong-Woo;Han, Sung-Soo
Macromolecular Research
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제17권10호
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pp.734-738
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2009
Biodegradable, pH-sensitive, glycol chitosan (GC) hydrogels were prepared using divinyl adipate (DVA) as a crosslinker and acetic acid as a catalyst. DVA has highly reactive double vinyl ester groups and GC contains a high density of hydroxyl groups, with two in every glucosamine unit. The transesterification reaction between vinyl esters and hydroxyl groups produced crosslinked GC hydrogels. The initial crosslinking reaction was monitored by measuring the viscosity of the reaction mixture. When DVA was added to the GC solution and heated to $50^{\circ}C$, the viscosity of the GC solution gradually increased, implying a crosslinking reaction and hydrogel formation. A new peak from the ester group was observed in the FTIR spectra of the GC hydrogels, confirming the crosslinking reaction. The synthesized GC hydrogel showed pH-dependent water absorbency, mainly due to the presence of amine groups ($-NH_2$) at the C-2 position of the glucosamine unit of GC. The water absorbency greatly increased at acidic pH and slightly decreased at alkaline pH. The GC hydrogel gradually degraded in $37^{\circ}C$ water due to hydrolysis of the ester bonds, which were intermolecular crosslinking sites. A red dye, 5-carboxyltetramethyl-rhodamine (CTMR), was entrapped in the GC hydrogels as a model compound. CTMR was released from GC hydrogels in two steps: an initial burst release mainly due to desorption and diffusion, and a second sustained release possibly due to gradual degradation.
Sanguisorbae radix (SR) from Sanguisorba officinalis L. (Losaceae) is widely used in Korea and China due to its various pharmacological activity. The present study aims to investigate the effect of the methanol extract of SR on amyloid ${\beta}$ Protein(25-35) $(A{\beta}\;(25-35))$, a synthetic 25-35 amyloid peptide, -induced neurotoxicity using cultured rat cortical neurons. SR, over a concentration range of $10-50\;{\mu}g/ml$, inhibited the $A{\beta}$ (25-35) $(10\;{\mu}M)-induced$ neuronal cell death, as assessed by a 3-[4,5-dimethylthiazole-2-yl]-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide (MTT) assay and the number of apoptotic nuclei, evidenced by Hoechst 33342 staining. Pretreatment of SR $(50\;{\mu}g/ml)$ inhibited $10\;{\mu}M\;A{\beta}$ (25-35)-induced} elevation of cytosolic calcium concentration $([Ca^{2+}]c)$, which was measured by a fluorescent dye, fluo-4 AM. SR $(10\;and\;50\;{\mu}g/ml)$ inhibited glutamate release into medium induced by $10\;{\mu}M\;A{\beta}(25-35)$, which was measured by HPLC, and generation of reactive oxygen species. These results suggest that SR prevents $A{\beta}$ (25-35)-induced neuronal cell damage in vitro.
Lyocell is a not only environmentally-friendly but also very advantageous fiber. When Lyocell is soaked in water, its wet tenacity does not decrease and elongation and moisture regain of it are better than cotton. However, one drawback of lyocell is its fibrillation. The fibrills of lyocell were generated during wet process such as scouring and dyeing deteriorates the dyeing color depth and the appearance of fabric. The purpose of this study was to decrease the fibrillation tendency of lyocell fabric using crosslinking agent, epichlorohydrine(ECH). The effects of NaOH scouring and ECH crosslinking were observed. The different types of ECH addition methods to lyocell and the various concentrations of ECH in crosslinking reaction onto dyeing characteristic and fibriallation were investigated. Weight loss and whiteness index of crosslinked lyocell by ECH were examined. K/S values of ECH treated lyocell fabrics dyed with reactive dye were measured and SEM images of untreated and treated lyocells were observed extensively to define the fibrillation tendency. The results were as follows ; 1) ECH treatment showed the effect of weight loss and scouring because ECH crosslinking reaction was conducted in alkaline condition. 2) The increase in ECH concentration from 5 to 30% does not affected K/S value changes. 3) ECH crosslinking can effectively prevent the fibrillation tendency of lyocell.
Objectives: In this study we made an effort to investigate the protective effect of SSMT on the N-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP) -induced cytotoxicity of SH-SY5Y cells. Methods: The cell viability was assessed by 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MMT) assay. The fluorescence intensity was measured by using a dye and then with propidium iodide (PI) DNA flow cytometry analysis of the effects on the cell cycle of the SH-SY5Y cells and were used to measure the fluorescence of intracellular reactive oxygen species generation by MPTP. Results: Pretreatment of SSMT significantly suppressed MPTP-induced cytotoxicity, which was revealed as apoptosis characterized by the reduction of cell viability, the increase of ROS production, and the loss of mitochondrial membrane potential in SH-SY5Y cells. Conclusions: These findings suggest that SSMT exerts neuroprotective effects on human neuroblastoma SH-SY5Y cells by MPTP-induced dopaminergic neurodegeneration.
Jang, Ji Yeon;Kim, Se-Yong;Song, Kyung-Sik;Seong, Yeon Hee
Natural Product Sciences
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제21권2호
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pp.134-140
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2015
The present study aims to investigate the effect of methanol extract of Korean mistletoe (KM; Viscum album var. coloratum), on amyloid $\beta$ protein ($A\beta$) (25-35), a synthetic 25-35 amyloid peptide, -induced neurotoxicity in cultured rat cerebral cortical neurons and memory impairment in mice. Exposure of cultured neurons to $10{\mu}M$$A\beta$ (25-35) for 24 h induced a neuronal cell death, which was measured by a 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide (MTT) assay and Hoechst 33342 staining. KM (10, 30 and $50{\mu}g/ml$) significantly inhibited the $A\beta$ (25-35)-induced apoptotic neuronal death. KM ($50{\mu}g/ml$) inhibited 10 μM Aβ (25-35)-induced elevation of intracellular calcium concentration ([Ca2+]i), which was measured by a fluorescent dye, Fluo-4 AM. Glutamate release into medium and generation of reactive oxygen species (ROS) induced by $10{\mu}M$$A\beta$ (25-35) were also inhibited by KM (10, 30 and $50{\mu}g/ml$). These results suggest that KM may mitigate the $A\beta$ (25-35)-induced neurotoxicity by interfering with the increase of [Ca2+]i and then inhibiting glutamate release and generation of ROS in cultured neurons. In addition, orally administered KM (25 and 50 mg/kg, 7 days) significantly prevented memory impairment induced by intracerebroventricular injection of $A\beta$ (25-35) (8 nmol). Taken together, it is suggested that anti-dementia effect of KM is due to its neuroprotective effect against $A\beta$ (25-35)-induced neurotoxicity and that KM may have therapeutic role in prevention of the progression of Alzheimer's disease.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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