The inhibitory effect of Ramaria botrytis on the mutagenicity in Salmonella assay and cytotoxicity on cancer cell were studied. Ramaria botrytis methanol extracts showed antimutagenic effects of 60~90% on B(a)P and AFB1 in S. typhimurium TA98 and TA100. These extracts showed 73~85% antimutagenicity on TA100 against MNNG. The methanol extracts with strong antimutagenic activities were further fractionated by ethylacetate and water, the ethylacetate fraction were found to be stronger antimutagen icity against MNNG than water fraction. Ramaria botrytis methanol extracts and ethylacetate fraction revealed the highest cytoxicity against HT 29 human colon adenocarcinoma cells in which cell growth was inhibited by 57~88% and 69~94% at 0.25~1.0mg/ml, respectively. These methanol extract and ethyl acetate fraction exhibited 53~79% and 66~87% inhibition against HepG2 human hepatocarcinoma cells, respectively. But water fraction showed only 10~24% inhibition. However, these extract and fractions did not show cytotoxic effect against human chang liver cells. From these results, it is considered that Ramaria botrytis has stronger antimutagenic and anticancer effects in vitro.
Objectives: This study aimed to find out the antimicrobial activities of Ramaria botrytis (Fr.) extracts against oral pathogens. Methods: The antimicrobial activities of Ramaria botrytis (Fr.) extracts were evaluated against oral pathogens by the disc diffusion assay, and the minimum inhibitory concentrations (MICs) of ethyl acetate extracts were determined by broth dilution method. The strains used in this study were Staphylococcus aureus, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguinis, Streptococcus sobrinus, Streptococcus anginosus, Streptococcus ratti, Streptococcus criceti, Actinomyces israelii, Actinomyces viscosus and Aggregatibacter actinomycetemcomitans. Results: The ethyl acetate extract of Ramaria botrytis (Fr.) effectively inhibited the growth of oral bacteria compared with acetone or ethanol extract. The ethyl acetate extract exhibited MIC values ranging from 3.75 to 15.00 mg/ml, and it showed antimicrobial activity against both Gram-positive and negative oral bacteria. Conclusions: The ethyl acetate extracts from Ramaria botrytis (Fr.) showed the antimicrobial activities against ten oral bacteria. Thus, the extract of Ramaria botrytis (Fr.) may be considered as an effective natural antimicrobial agent for the prevention of oral pathogens.
The fruit body of Ramaria botrytis DGUM 29001 was used to determine enzyme activities of fruit body. The specific activity of laccase was the highest(6.5 unit/mg$\cdot$protein) and that of $\alpha$-amylase and xylanase was relatively high. However, little or no enzyme activity of $\beta$-glucosidase, CMCase, exo-$\beta$-1,4-glucanase, chitinase, lipase and protease was found.
The culture conditions for the enhanced mycelial growth of Ramaria botrytis was investigated. The optimal temperature and pH for the mycelial growth were $24^{\circ}C$ and 5.0, respectively. It was shown that starch was best of several carbon sources in Czapek-Dox medium as a minimal medium for the enhanced mycelial growth. Organic nitrogen sources were better than inorganic ones for mycelial growth. The appropriate vitamin and mineral salt were biotin and FeCl3, respectively. When this strain was cultured with $FeCl_3$ for 30 days, 19.23 g/l of dry mycelium of R. botrytis was obtained.
싸리버섯 메탄올 추출물이 간독성 물질인 B$({\alpha})$P을 투여한 마우스에서 간 손상 억제 효과 및 cytochrome P-450 1A1 발현에 미치는 영향을 살펴보았다. B$({\alpha})$P 투여로 인한 혈청 ALT와 AST의 활성, 간 조직증의 lipid peroxide 함량, cytochrome P-450 함량, AD 및 AH 활성이 유의적으로 증가하였으며 싸리버섯 메탄올 추출물의 투여시 이들 활성 및 함량이 유의적으로 감소하였다. 반면, 간 조직중의 GSH 함량, GST, r-glutamylcysteine synthetase의 활성은 B$({\alpha})$P만 투여한 군에 비해 싸리버섯 메탄올 추출물을 투여시 증가하였다. 또한 immuno blotting 결과로부터 B$({\alpha})$P 투여에 의해 현저히 증가되었던 cytochrome P-450 1A1 isozyme 단백질 함량이 싸리버섯 메탄올 추출물의 투여로 감소됨을 확인하였다. 이와 같은 결과로부터 싸리버섯 메탄올 추출물은 B$({\alpha})$P에 의한 간 손상에 대한 보호 효과가 있는 것으로 사료된다.
싸리버섯 메탄올 추출물의 항산화 효능을 DPPH법에 의한 free radical 소거작용능 및 $B({\alpha})P$로 간 독성이 유발된 마우스에서 항산화 효소, 글루타치온 및 과산화지질 함량 변화에 미치는 영향을 살펴보았다. 먼저 싸리버섯 메탄올 추출물의 항산화능을 DPPH radical 소거 작용법으로 시험한 결과 싸리버섯 추출물은 강한 자유라디칼 소거 효과를 나타내었다. 또한 $B({\alpha})P$투여로 인한 간 조직중의 SOD, catalase 그리고 GSH-Px의 활성은 유의적으로 증가되었다가, 싸리버섯 메탄올 추출물의 전 처리로 이들 활성이 유의적으로 감소하였다. 반면, GST 활성과 간 조직중의 글루타치온 함량은 $B({\alpha})P$ 단독군에서는 감소되었다가 싸리버섯 메탄올 추출물 투여시 유의적인 증가를 보였다. 그러나 지질과산화물 함량은 $B({\alpha})P$ 투여시 증가되었다가 싸리버섯 메탄올 추출물의 투여시 유의적으로 감소되었다. 이상의 결과로 싸리버섯 메탄올 추출물은 항산화계 효소의 활성 증가로 인한 $B({\alpha})P$에 의한 간 손상에 대한 보호효과를 가지는 것으로 사료된다.
싸리버섯은 한국에서 상업적으로 중요한 외생균근성 버섯중 하나로 자연채취하고 있다. 본 연구는 소나무 유묘에 싸리버섯균을 접종하여 균근형성을 시도하였다. 소나무 유묘에 형성된 싸리버섯 균의 외생균근은 단순형과 차상분지형이였다. 외생균근의 직경은 $325-380{\mu}m$ 이었고, 균투층은 반투명색으로 $20-30{\mu}m$ 이었다. 한편, 싸리버섯 균의 균사생장 최적온도는 $25^{\circ}C$ 이였고, PDA 배지에서 2달간에 5 cm 정도 생장하였다.
국내 자생하는 균근성 버섯 중 본 연구에서 수집한 붉은꾀꼬리버섯(C. cinnabarinus), 젖버섯속(L. parallelus), 송이(T. matsutake), 싸리버섯(R. botrytis) 추출물의 생리활성 성분을 평가하기 위하여 DPPH 라디컬 소거능, 철환원 항산화능, 환원력, 아질산염 소거능, 총 폴리페놀 및 총 플라보노이드 함량의 항산화 활성과 균근성 버섯의 건조시료를 이용하여 아미노산 성분 함량을 분석하였다. 본 연구의 수집된 균근성 버섯류 중에서 싸리버섯(R. botrytis) 열수추출물의 DPPH 라디컬 소거능(33.8%), 철 환원 항산화능(0.38), 환원력(0.35), 총 폴리페놀 함량(13.83 mg GAE/g) 및 총 플라보노이드 함량(2.56 mg QE/g)이 다른 버섯류에 비하여 월등히 높은 것으로 나타났으며, 아질산염 소거능은 젖버섯속(L. parallelus)이 높았다. 총 아미노산 및 총 필수아미노산 함량은 붉은꾀꼬리버섯(OK1165)이 각각 1,046.1 mg/kg과 404.9 mg/kg으로 다른 균근성 버섯류에 비하여 가장 높게 검출되었다. 4종의 균근성 버섯류에서 검출된 아미노산 성분 중 시스테인(Cys)이 전체 아미노산 성분 중에서 가장 높게 검출된 성분이었으며, 페닐알라닌(Phe)는 다음으로 많이 검출된 성분이었다. 붉은꾀꼬리버섯(C. cinnabarinus)의 경우 쓴맛을 내는 성분들이 함량이 높았으나 동시에 감칠맛, 단맛을 내는 성분들도 다른 균근성 버섯류에 비하여 높았으며, 송이(T. matsutake)는 감칠맛, 단맛을 내는 성분이 다른 균근성 버섯류에 비하여 높게 검출되는 것으로 나타났다. 본 연구의 야생에서 수집한 4종의 균근성 버섯류 중에서 항산화능은 싸리버섯(R. botrytis)이 가장 높았으며, 아미노산 함량은 붉은꾀꼬리버섯(C. cinnabarinus)이 높은 것으로 확인되었다.
국내에서 생산되는 재배버섯으로 일반느타리(Pleurotus ostreatus)와 고온성느타리(Pleurotus sajor-caju) 및 야생식용버섯으로 싸리버섯(Ramaria botrytis)과 젖버섯(Lactarius volemus)의 지질성분조성을 비교 검토한 결과 각 버섯의 지방함량은 $0.32{\sim}0.39%$이었으며, 그 조성은 인지질$(19.4{\sim}47.4%)$, 중성지질$(32.1{\sim}51.9%)$, 당지질$(14.8{\sim}28.7%)$ 순으로 많았으나 고온성 느타리는 다른 버섯에 비하여 중성지질(51.9%)의 함량이 높았다. 중성지질에서는 triglyceride$(21.2{\sim}38.2%)$, free sterol$(21.0{\sim}21.9%)$, sterol ester$(10.3{\sim}18.6%)$ 순으로 많았으나 고온성 느타리는 free fatty acid(34.1%)의 함량이 다른 버섯에 비하여 특이하게 높았다. 당지질은 steryl glycoside$(15.6{\sim}29.4%)$, esterified steryl glycoside$(13.4{\sim}23.9%)$, monogalactosyl diglyceride$(15.6{\sim}24.6%)$ 순으로 많았으며, 인지질의 조성은 phosphatidyl choline$(36.7{\sim}49.5%)$, phosphatidyl ethanolamine$(20.9{\sim}29.7%)$, phosphatidyl inositol$(18.4{\sim}26.1%)$ 순으로 많았다. 각 구성지질의 지방산조성은 4종의 버섯 공히 linoleic acid와 palmitic acid가 주요 지방산이었으나 싸리버섯은 중성지질에서 oleic acid의 함량이 높았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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