무지개송어의 초대배양 간세포에 있어서 Vitellogenin (VTG)의 합성 유도는 전기영동적 수법에 의해 행하였다. 간세포는 7일 동안 phositively charged dish를 이용한 배양으로 단층 확산되었다. 배양 7일의 간세포 생존율은 $E_2$의 유무에 따라 각각 20.7% 및 23.6%가 감소하였으며, DNA함유량도 각각 13.7% 및 14.0%가 감소하였다. $E_2$ 첨가군과 대조군간에는 생존율과 DNA 함유량에 있어서는 유의한 차이가 나타나지 않았다. 그리고, 총 단백질에 대한 VTG의 비율은 $E_2$$10^{-6}$ M의 첨가시에 최대치를 나타내었다. 그러나, 고농도($10^{-5}$M)에서는 오히려 감소하는 경향을 나타내었다.
Infection with salmonid alphavirus (SAV) is a serious disease that mainly affects rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) and Atlantic salmon (Salmo salar L.) reared in seawater or freshwater. SAV is prevalent in European countries including Norway that exports rainbow trout and Atlantic salmon to Korea. Consequently, SAV was listed as a disease notifiable to the OIE and many salmonid-producing countries either designate SAV as their notifiable disease or do research on the development of diagnosis and epidemiology to reduce the possibility of SAV infection. Unlike other salmonid-producing countries, SAV is not listed as a notifiable disease in Korea, thereby arousing concern that SAV will get into the country through the importation of live salmonids. Under the circumstance, Korea needs to have a legal basis to take much stricter follow-up measures, including listing SAV as a notifiable disease, establishing surveillance system based on OIE standards to declare Korea free from SAV, killing infected fish and conducting fallow system against affected farms.
자성 및 웅성스테로이드 호르몬들이 Vg 유전자발현에 영향을 미치는지를 미성숙 무지개송어의 배양간세포 막간을 이용하여 조사하였다. 이미 보고된 송어의 Vg gene의 염기배열을 참고로 Vg cDNA 단편(600 bp)을 증폭시킬 수 있는 primer들을 작성하였다. 이들 primer를 이용하여 증폭된 PCR 산물의 염기배열을 결정하여 송어의 Vg cDNA임을 확인하였고, RT-PCR법을 이용하여 배양간세포 그리고 E$_2$ 및 MT 처리된 송어의 간으로부터 Vg mRNA의 전사량 변화를 조사하였다. 호르몬 처리된 간세포 및 송어의 간에서 추출한 total RNA를 이용하여 RT-PCR법으로 분석한 결과 in vivo, in vitro 실험 모두에서 E$_2$ 또는 MT처리된 간세포 및 송어의 간으로부터 Vg mRNA와 Vg 단백질합성이 유도되었고, 이들의 증가 경향은 처리된 호르몬 농도 및 시간에 의존하고 있음이 밝혀졌다. 또한 progesterone, androsterone 그리고 testosterone 등의 웅성호르몬들도 Vg mRNA의 전사를 유도하고 있다는 것이 시사되었다. 이와 같은 결과로부터E$_2$ 뿐 아니라 웅성스테로이드들도 Vg mRNA의 발현을 유도하고 있음이 송어의 in vivo 또는 in vitro 실험에 의해서 확인되었다.
Roh, HyeongJin;Kim, Bo Seong;Kim, Ahran;Kim, Nameun;Lee, Mu Kun;Park, Chan-Il;Kim, Do-Hyung
한국어병학회지
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제33권1호
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pp.23-34
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2020
In recent years, global warming is causing dramatic environmental changes and deterioration, such as hypoxia, leading to reduced survival rate and growth performance of farmed aquatic animals. Hence, understanding systemic immuno-physiological changes in fish under environmental stress might be important to maximize aquaculture production. In this study, we investigated physiological changes in rainbow trout exposed to hypoxic stress by monitoring changes in blood chemistry, leukocyte population, and expression levels of related cytokine genes. Hematological and serological factors were evaluated in blood obtained from rainbow trout sampled at a dissolved level of 4.6 mg O2 L-1 and 2.1 mg O2 L-1. Blood and head kidney tissue obtained at each sampling time point were used to determine erythrocyte size, leukocyte population, and cytokine gene expression. The level of LDH and GPT in fish under progressive hypoxia were significantly increased in plasma. Likewise, the (Granulocyte + Macrophage)/lymphocyte ratio (%) of fish exposed to hypoxia was significantly lower than that in fish in the control group. Such changes might be due to the rapid movement of lymphocytes in fish exposed to acute hypoxia. In this study, significant up-regulation in expression levels of IL-1β and IL-6 gene appeared to be involved in the redistribution of leukocytes in rainbow trout. This is the first study to demonstrate the involvement of cytokines in leukocyte trafficking in fish exposed to hypoxia. It will help us understand systemic physiological changes and mechanisms involved in teleost under hypoxic stress.
Background: The effects of the dietary administration of two heat-inactivated whole bacteria from the Vibrionaceae family, singly or combined, on innate immune response of the rainbow trout were studied. The two bacteria (Pdp11 and 51M6), which were obtained from the skin of rainbow trout, showed in vitro characteristics that suggested they could be considered as potential fish probiotics. Methods: The fish were fed four different diets: control (non-supplemented), or diets supplemented with heat-inactivated bacteria at $10^8$ cfu/g Pdp11, $10^8$ cfu/g 51M6 or with $0.5{\times}10^8$ cfu/g Pdp11 plus $0.5{\times}10^8$ cfu/g 51M6 for 4 weeks. Six fish were sampled at weeks 1, 2, 3 and 4, and then the main humoral (natural haemolytic complement activity and serum peroxidase content) and cellular innate immune responses (leucocyte peroxidase content, phagocytosis, respiratory burst and cytotoxicity) were evaluated. Results: The serum peroxidase content and the natural haemolytic complement activity increased with time, reaching the highest values in the third and fourth weeks of feeding, respectively. The phagocytic ability of specimens fed the mixture of the two inactivated bacteria was significantly higher than in the controls after 2 and 3 weeks of treatment. The same activity increased significantly in rainbow trout fed the Pdp11 diet for 2 weeks or the 51M6 diet for 3 weeks. Respiratory burst activity was unaffected by all the experimental diets at all times assayed. Cytotoxic activity had significantly increased after 3 weeks in fish fed the 51M6 diet. Conclusion: Our results demonstrated the usefulness of incorporating inactivated probiotic bacteria into fish diets.
A study is reported which investigated the additive nature of digestible energy (DE) from dietary nutrients and to estimate the relative energy values of different energy-yielding nutrients in practical trout diets. A growth study was conducted over 12 weeks with 6 diets. Rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) were fed diets once a day ad libitum. Digestible energy values determined and calculated had direct relationship indicating additive nature of such values for feed ingredients. Overall growth performance was best in a diet containing 33% digestible protein (DP) with a DP/DE ratio of 18.6. A reduction in digestible protein level with the same DP/DE rat io led to a significant decrease in growth and feed efficiency. The increase of 7% of lipid with concomitant decrease in protein resulted in the relative gain of 130% in growth and nutrient retention, suggesting that 1 g of lipid is equal to about 1.3 g of proteins in terms of net energetic value. Replacement of 10% of dietary lipid by carbohydrates led to a slight decrease in energy retention efficiency but to a great increase in lipid retention efficiency (130%) showing that dietary carbohydrates led to increased lipogenesis.
무지개송어(체장 $17.1{\pm}1.0cm$, 체중 $68.4{\pm}2.0g$)의 수온변화에 따른 생리적 반응의 단기적 지표로서 산소소비율, 호흡수, 헤모글로빈 함량 변화 및 내성 상한 온도를 조사하였다. 실험 수온은 $15^{\circ}C$를 중심으로 낮은 온도 쪽으로는 4, 5, 6, 7 및 $10^{\circ}C$, 높은 온도 쪽으로는 17, 20, 23, 26 및 $28^{\circ}C$에서 각각 적응시켜 산소소비량과 호흡수를 측정하였다. 수온의 하강과 상승은 $15^{\circ}C$에서 사육하던 무지개 송어를 1일 $1^{\circ}C$씩 순차 적응시키면서 각 수온에 7일간 적응시켰다. 무지개송어는 수온이 $23^{\circ}C$ 이상이 되면 산소소비율, 호흡수 및 헤모글로빈 함량에 변화를 가져오면서 체내 항상성이 급격하게 낮아지는 것으로 나타났다. 또한 생존 상한수온은 $28^{\circ}C$로 나타났다. 무지개송어가 무리없이 생활할 수있는 온도 범위는 $10{\sim}20^{\circ}C$로서 $10{\sim}15^{\circ}C$의 낮은 온도에서는 낮은 온도쪽으로, $15{\sim}20^{\circ}C$의 높은 온도에서는 높은 온도쪽으로 $5^{\circ}C$ 이상 급격한 변화를 주지 않는 것이 무지개송어의 생리활력에 현저한 변화가 나타나지 않는 것으로 조사되었다.
본 연구는 미성숙 혹은 성숙된 3년생 무지개 송어(Oncorhynchus mykiss) 수컷 150마리의 뇌하수체와 정자형성세포의 형태적인 변화를 조사하기 위해서 실시되었다. 3월부터 그 이듬해 2월까지 번식주기에 따라 광학현미경, 투과 및 주사전자현미경으로 정자 형성과 정자완성시기의 미세구조적 변화를 연구하였다. 뇌하수체 호르몬 분비세포의 성숙은 휴지기 (3월부터 8월까지), 정자형성기 (9월부터 11월가지), 번식기 (12월부터 2월까지)의 3가지 시기로 구분되었다. 뇌하수체 호르몬 분비세포의 미세구조가 변하는 추세는 정소의 주기적 변화와 대체적으로 일치하였다. 정자형성초기에는 여러 단계의 세포군이 하나의 세정관안에 위치해 있었다. 정원세포로부터 정자세포까지 사류ㅕ볼 때 핵과 세포질의 크기는 각 발달단게마다 점진적으로 감소하였다. 제2차 정모세포 및 정자세포의 세포질 외측에 작은 크기의 미토콘드리아가 확인되었다. 정자세포의 2개의 미토콘드리아는 세포질의 한쪽에 위치하면서 길게 늘어지기 시작하였다. 정자의 경우, 핵의 크기가 감소하였고, 핵막과 세포질막은 두부의 핵과 근접해 있었따. 2개의 미토콘드리아는 다른 척추동물과 달리 그 수가 적었고, 축사로부터 분리되어 있었다. 무지개송어의 축사구조는 축추동물의 전형적인 "9+2"형을 나타내었다. 투과 및 주사전자현미경으로 여러 단계의 정자형성세포들을 관찰한 결과 그 두부의 크기와 형태의 구체적인 차이를 확인할 수 있었다.확인할 수 있었다.
본 연구는 무지개송어 양식 산업의 생산성 향상을 위해 전 암컷 무지개송어 대량생산을 위한 일환으로 성호르몬에 의한 생리학적 성전환과 자성발생 2배체어를 유도하였다. 생리학적으로 성전환된 수컷을 만들기 위하여 부화 후 첫 먹이를 먹는 시기에 웅성호르몬인 17 alpha-methyltestosterone (MT) 5 mg을 사료에 흡착시켜 사육수온 $13^{\circ}C$에서 적산수온 $800^{\circ}C$까지 처리한 결과 96.7%의 수컷 유도율을 보였다. 또한 정상 수컷 정액을 이용하여 수정 10분 후 $28^{\circ}C$에서 20분간 고온 처리하여 61.7%의 자성발생 2배체가 유도되었다.
색소 추출물의 급이에 의한 무지개송어 간지질의 지방산조성 변화를 조사한 결과는 다음과 같다. 1. 색소 추출물의 지방산조성은 18:2n-6가 $14.2\%$, 20:5n-3가 $3.5\%$, 22:6n-3가 $8.3\%$로 EFA 사료로서의 가치가 인정되었다. 2. 모노엔산의 함량은 급이 중 변화가 컸으며 이는 고도불포화산의 변화에 기인된 것으로 나타났다. 3. 색소 추출물 급이에 의해 2주 후 무지개송어의 고도불포화지방산의 함량이 증가하여 $25.9\%$ 및 $23.1\%$로 나타났으나, 대조구 및 pink구에서는 $15.0\%$ 및 $18.8\%$로 각각 나타났다. 4. 20:4n-6의 함량이 대조구나 pink구에 비하여 높게 나타나 EFA 결핍에 의한 변화는 없는 것으로 나타났다. 20:1n-11 및 20:2n-11의 함량이 낮은 것은 급이사료에 의해 영향을 받는 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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