Viral hemorrhagic septicemia (VHS) is one of the most serious viral disease of farmed rainbow trout and some marine fishes in Europe and North America. It has been reported in various marine fish species of Asian countries and induced cause mass mortality in Japanese flounder (Paralichthys olivaceus) culturing in Korea. The aims of this study were to monitor VHSV in wild marine fishes and to give critical information for controling the disease through prophylactic methods. Prevalence of the viral disease, geological distribution and reservoir of the virus were investigated using wild marine fishes captured in southern coast and east china sea for two years. (Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction) RT-PCR results showed that VHSV were detected in 17 (10.6%) out of 160 fish. G gene sequences of viral strains isolated in this study were closely related to that of a reference strain, KVHS01-1, belonging to VHSV genotype Ⅰ. The results suggest that some of wild marine fishes are VHSV carriers and may spread the pathogen directly to fish farmed in coastal area.
The purpose of this study was to obtain reference data of parameters for hematological health diagnosis in cultured freshwater fish and also evaluate application of automatic dry-type chemistry analyzer (FUJI DRI-CHEM 3000) used to those blood tests. A blood profile of total 200 fish for rainbow trout (Onchorhynchus mykiss), israel carp (Cyprinus carpio), tilapia (Oreochromis niloticus) and eel (Anguilla japonica) cultured in Inland Fisheries Research Institute of NFRDI was determined by hemoglobin (Hb) and plasma chemistry tests: total protein (TP), albumin (ALB), alkaline phosphatase (ALP), blood urea nitrogen (BUN), lactate dehydrogenase (LDH), triglyceride (TG), total cholesterol (TCHO), creatinine (CRE), aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), glucose (GLU). The values of ALT, TG, LDH, ALB, TCHO, AST and ALP were outside from the minimum and/or maximum of the established detectable range of the analyzer. ALT and TG were not detectable in the range of 67%~61.5%. LDH, ALB and TCHO were not detectable in the range of 36~17%. AST and ALP were not detectable in the range of 5.5~0.5%. However, the values of BUN, CRE, GLU, Hb and TP were below the detectable limits of the analyzer.
In Feb., 1990 an epizootic disease to masu salmon fry, Oncorhynchus masou cultured at the hatchery of rainbow trout in Samchok, Kwangwon-do have broken out and induced high mortality over 70%. Externally, the diseased fish showed dark discoloration, abdominal distension with ascites, slight exophthalmus and fecal casts. Internally, the gill and the liver of diseased fish were edematous and pale, and the stomach of moribund fish contained the milkish fluid. Microscopically there was extensive necrosis of the hematopoietic tissue in kidney and spleen, and scattered necrosis of pancreas, liver and lateral muscle. Especially, the necrosis of lamina propria, muscle layer and tela submucosa in the digestive tract known as the typical signs associated with infectious hematopoietic necrosis virus was seen clearly.
Four strains of water mold, ChS-E0511, RaT-E0511, RaT-A0512 and MaS-F0512, were isolated from salmonid fish and/or their eggs taken from culture farms in Yangyang, Milyang and Pyeongchang, Korea in 2005. Descriptions of their morphological aspects, the results of the phylogenetic analysis conducted, and the sequence of the small sub-unit 18S rRNAs of the isolates confirmed that they all belong to the species Saprolegnia parasitica. Only one species, ChS-E0511, which was isolated from fertilized eggs of the chum salmon, was classified as part of the S. parasiticaGroup 1 according to its oogonia and gemmae production. The chemotherapeutic effects of various chemicals on the ChS-E0511 strain were assessed from the inhibitory effects of growth in GY media and the relative ratio of eyed eggs to fertilized eggs of the rainbow trout. Malchite green, a prohibited substance in food animals, was better than others, such as the Opuntia ficus-indicaextract, 2-bronopol, and sodium chloride. These results suggest that the fungi isolated from salmonids and/or their eggs identified as S. parasitica were composed of more than two groups. These isolates will be useful in an intensive evaluation of therapeutic agents.
LEE Heui-Jung;PARK Jung-Youn;LEE Jeong-Ho;MIN Kwang-Sik;JEON Im Gi;YOO Mi-Ae;LEE Won-Ho
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.33
no.2
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pp.103-109
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2000
Complete senuences of the mitochondrial rRNA Benes were determined among six salmonines in Korean Waters (Brachpmystax lenok, Onoorhpchus keta, O. masou mason, O. mason ishikawae, O. mykiss, and albino mutant of O. mykiss). The purposes of this study were to provide the basic information on levels of mtDNA polymorphism among these species for genetic characterization; discuss phylogentic relationships among three Oncorhynchus sepecies; demonstrate the utility of rRNA gene sequence data as a genetic marker for disringuishinf among Korean salmonines. PCR/direct sequencing data indicated the following consistent results; 1) 12S rRNA genes was 945 bases long in Oncorhynchus species, and 946 bases in B. lenot including one insertion. 2) Of sequence variation in mitochondrial rRNA regions, transitional substitutions were superior to transversion. 3) The significant differences were not shown in the intraspecific variation values in these gene regions. The percentage sequence divergence values were ranged from $0.066 to 0.212{\%}$. 4) The interspecific divergences were greater than the intraspecific variation. Nevertheless, ribosomal RMh genes were more conserved among species than the other mitochondrial genes, and they showed potentiality as an intergenic marker for systematics. In addition, phylogenetic trees, constructed from this data, supported that cherry salmon was closer to chum salmon than to rainbow trout, and that lenok was most distantly related species in six salmonid species.
Jo, Pil-Gue;An, Kwang-Wook;Kim, Na-Na;Choi, Yong-Ki;Cho, Sung-Hwoan;Min, Byung-Hwa;Lim, Han-Kyu;Choi, Cheol-Young
Journal of Aquaculture
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v.20
no.3
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pp.199-202
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2007
We isolated a 317 bp of partial cDNA for doublesex-and mab-3-related transcription factor-1 (DMRT-1) from the testis of olive flounder, Paralichthys olivaceus using RT-PCR. Based on the multiple sequence alignment, olive flounder DMRT-1 shared relatively high sequence homology (82 to 94%) with orthologues from other teleost species such as Atlantic halibut, Hippoglossus hippoglossus, black porgy, Acanthopagrus schlegeli and rainbow trout, Oncorhynchus mykiss. DMRT-1 mRNA was predominantly expressed in the testis of olive flounder. In our investigation for the effect of testosterone treatment in vivo on induced expression of ovarian DMRT-1 transcript, mRNA levels of DMRT-1 in ovary were significantly up-regulated by testosterone treatments (0.3 or $3.0{\mu}g$ testosterone/g body weight for 12 to 36 hours) as judged by RT-PCR analysis. In overall, transcriptional stimulation of DMRT-1 during treatments was more affected by doses of testosterone than treatment durations. This result strongly suggests that the regulation of DMRT-1 be tissue- and gender-specific in olive flounder, and also provides useful baseline knowledge on the testosterone-mediated regulation in the reproductive physiology of this species.
At the present, fish farms are suffering a lot of economic losses due to infectious diseases caused by various pathogens including aeromonad. Aeromonad is ubiquitous bacteria that causes infectious diseases. At least 26 species in the genus Aeromonas have been reported to cause fatal infections not only in salmonid fishes, but also in other freshwater and seawater fishes. Molecular techniques based on nucleic acid sequences of 16S rDNA and housekeeping genes can be used to identify the Aeromonas species. In this study, The genus Aeromonas was isolated from salmonid fishes of sixteen fish farms in Gangwon-Do, Korea and phylogenetically identified based on the sequences of 16S rDNA and housekeeping genes for Aeromonad, i.e. RNA polymerase sigma factor ${\sigma}^{70}$ (rpoD) or DNA gyrase subunit B (gyrB). Consequently, 96 strains were collected from Atlantic salmon (Salmo salar), coho salmon (Oncorhynchus kisutch), masou salmon (Oncorhynchus masou) and rainbow trout (Oncorhynchus mykiss), and 36 isolates were identified as the genus Aeromonas by 16S rDNA analysis. Thirty six Aeromonad isolates were further analysed based on rpoD or gyrB gene sequences and found Aeromonas salmonicida (24 isolates), A. sobria (10 isolates), A. media (1 isolates) and A. popoffii (1 isolates), indicating that A. salmonicida is a main infectious bacteria in Salmonid fishes in Gangwon-Do. It was also proved that the phylogenetic identification of Aeromonas species based on the sequences of housekeeping gene is more precise than the 16S rDNA sequence.
[ $17\;{\alpha}-hydroxylase/17,20-lyase(P450_{C17})$ ] is the key enzyme mediating the conversion of progesterone to $17\;{\alpha}-hydroxyprogesterone$, ultimately to androstenedione during steroidogenesis. R. dybowskii's ovarian $P450_{C17}$ cDNA was cloned to understand the regulatory mechanism of ovarian steroidogenic pathway at the molecular level in amphibian. A 2.5kb cDNA clone encoding a single open-reading frame with a 519 deduced amino acid was isolated with the screening of ovarian cDNA library. This sequence contained the three highly conserved domains as seen in $P450_{C17}$ of other species. The comparison of amino acid sequence of Rana $P450_{C17}$ with other animal's $P450_{C17}$ showed relatively high identity with 76% in Xenopus, 63% in chicken, 60% in rainbow trout, and 45% in human. Phylogenic analysis also indicated that Rana $P450_{C17}$ gene was evolutionary well conserved among vertebrate. Northern analysis indicated that the two different sizes of $P450_{C17}$ transcripts with approximately 2.5 and 3.6kb were detected in ovary tissue, but not in other tissues. The expression vector of Rana $P450_{C17}$ clearly showed the $17\;{\alpha}-hydroxylase$ activity converting the exogenous progesterone into $17\;{\alpha}-hydroxyprogesterone$ in the nonsteroidogenic COS-1 cells. Therefore, Rana $P450_{C17}$ cDNA is very useful to investigate the molecular mechanism of the ovarian steroidogenesis in amphibian.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.44
no.5
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pp.649-656
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2015
The protective effect of zinc against cortisol-induced cell injury was examined in rainbow trout gill epithelial cells. Cells exposed to cortisol for 24 h showed increased leakage of lactate dehydrogenase (LDH) as well as decreased cell viability in a dose-dependent manner. Treatment with zinc ($100{\mu}M$$ZnSO_4$) reduced the severity of both LDH release and cell death as well as protected cells against cortisol-induced caspase-3 activation, indicating reduction of apoptosis. Cortisol-induced cell death, leakage of LDH, and caspase-3 activation were blocked by the glucocorticoid receptor antagonist Mifepristone (RU-486), suggesting that cell injury was cortisol-dependent. In addition, we studied the effect of zinc on the expression of antioxidant genes such as metallothionein A (MTA), metallothionein B (MTB), glutathione-S-transferase (GST), and glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) during cortisol-induced cell injury. MTA, MTB, GST, and G6PD mRNA levels increased after treatment with zinc or cortisol, separately or in combination. Higher mRNA levels of MTA, MTB, GST, and G6PD were detected when cells were treated with $100{\mu}M$$ZnSO_4$ and $1{\mu}M$ cortisol in combination at the same time compared to treatment with zinc or cortisol separately. Cells treated with zinc showed increased intracellular free zinc concentrations, and this response was significantly enhanced in cells treated with cortisol and zinc. In conclusion, zinc treatment inhibited cortisol-induced cytotoxicity and apoptosis through indirect antioxidant action.
Park, Myoung-Ae;Sohn, Sang-Gyu;Park, Jeong-Woo;Jeong, Young-Kee
Journal of fish pathology
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v.7
no.1
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pp.13-22
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1994
To identify the immunogens of a PRT strain of Infectious Hematopoietci Necrosis Virus (IHNV) isolated from cultrued fish in Korea (Park et al, 1993). a panel of 4 monoclonal antibodies (MAbs) against IHNV-PRT strain and two polyclonal antisera from rainbow trout survived IHN disease were prepared. Proteins of purified IHNV-PRT strain were analysed on 10% SDS-PAGE and transferred onto NC paper and were incubated with the antibody solutions. With the polyclonal antibodies, four bands ($M_1$, $M_2$, G and 90Kd) were detected and the band density was in the order of $M_2$ > 90Kd > $M_1$ > G. However, with the MAbs, only two bands(G and 90Kd) were detected. The origin of 90Kd protein was not clear but maybe cell. All the results represented that among the five proteins of IHNV-PRT strain (Park et al., 1993), $M_2$, $M_1$ and G proteins were immunogens and $M_2$ protein was the strongest one.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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