To identify and discriminate the bacterial species at the subspecific level, rep-PCR is a reliable genomic fingerprinting tool. Fourteen strains of bacteria were isolated from different food sources, identified as Leuconostoc citreum using 16S rRNA gene sequencing, and amplified using rep-primers (REP, ERIC, and $(GTG)_5$). Fingerprinting patterns generated bands in the range of 300-6,000 bp with REP, 150-6,000 bp with ERIC, and 200-1,700 bp with $(GTG)_5$ primers. In UPGMA dendrogram analysis, 14 strains were clustered into three clades (I, II, and III) with all the primers, thus differentiating them at the molecular level. The present study revealed the differentiation of L. citreum strains using rep-PCR.
Park, Young-Goo;Sul, Ill-Whan;Shin, Dong-Ill;Park, Jang-Won;Park, Hee-Sung
Journal of Plant Biotechnology
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v.3
no.3
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pp.131-134
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2001
In $\lambda$-Zap II vector system, a cDNA library was constructed for the developing secondary xylem mRNA from hybrid poplar, Populus nigra x maximowiczii. A cDNA clone of 1.5 kb in size, pOMTB1.4 encoding a lignin-bispecific O-methyltransferase was screened by plaque hybridization using a probe of 540 bp cDNA amplified by polymerase chain reaction from the cDNA library and identified by nucleotide sequencing. Its nucleotide sequence contains one open reading frame of 366 amino acids. The deduced amino acid sequence in comparison with that of Populus tremuloides showed the differences of 9 amino acids and revealed 85-99% homology among alfalfa, poplar and aspen.
In June 2013, we collected leaf spot disease samples of Datura metel from Gangneung, Gangwon Province, Korea. The symptoms observed were small circular to oval dark brown spots with irregular in shape or remained circular with concentric rings. We isolated the pathogen from infected leaves and cultured the fungus on potato dextrose agar. We examined the fungus morphologically and confirmed its pathogenicity according to Koch's postulates. The results of morphological examinations, pathogenicity tests, and the rDNA sequences of the internal transcribed spacer regions (ITS1 and ITS4), glycerol-3-phosphate dehydrogenase (G3PDH) and the RNA polymerase II second largest subunit (RPB2) gene sequence revealed that the causal agent was Alternaria tenuissima. To the best of our knowledge, this is the first report of leaf spot of D. metel caused by A. tenuissima in Korea as well as worldwide.
Lee, Seo Hee;Park, Hyo Sun;Nguyen, Thuong T.T.;Lee, Hyang Burm
Mycobiology
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v.47
no.1
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pp.20-30
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2019
During a survey of fungal diversity in the class Sordariomycetes, 3 fungal strains, CNUFC-KMHY6-1, CNUFC-MSW24-2-11, and CNUFC-GW2S-4 were isolated from soil and freshwater samples, respectively in Korea. The strains were analyzed both morphologically and phylogenetically on the basis of internal transcribed spacer and RNA polymerase II second largest subunit gene sequences. On the basis of their morphology and phylogeny, CNUFC-KMHY6-1, CNUFC-MSW24-2-11, and CNUFC-GW2S-4 isolates were identified as Arcopilus aureus, Memnoniella echinata, and Stachybotrys sansevieriae, respectively. To the best of our knowledge, Ar. aureus and M. echinata have not been previously recorded in Korea, and this is the first report of S. sansevieriae from freshwater niche.
Lee, Seung-Yeol;Ten, Leonid N.;Back, Chang-Gi;Jung, Hee-Young
The Korean Journal of Mycology
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v.49
no.3
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pp.417-423
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2021
Apple decline symptoms were frequently observed on cv. Fuji apple orchards located in Gyeonggi, Gyeongbuk, and Gangwon provinces during surveys conducted from May until the end of September 2020. Three fungal strains were isolated from the margins of internal lesions of diseased apple trees, and their morphological characteristics were considered similar to Botryosphaeria sinensis. Phylogenetic analysis using internal transcribed spacer (ITS) regions, translation elongation factor 1-alpha (tef1), beta-tubulin (tub2), and the second largest subunit of RNA polymerase II (rpb2) gene sequences confirmed the closest relationship of isolates with B. sinensis at the species level. According to a pathogenicity test, the appearance of dark-brown discolorations and vascular necrosis on apple branches inoculated with the isolated strain KNUF-20-014 was observed. To the best of our knowledge, this is the first report of B. sinensis as the causal agent of apple disease in Korea.
DNA methylation seems to play an important regulatory role in gene expression and cell differentiation during postimplantation embryonic development. However, the significance of DNA methylation which is maintained by the DNA MTase during preimplantation embryonic development, is not fully understood. In order to study the role of DNA methylation in the preimplantation embryos, the expression of DNA MTase transcripts was monitored in the oocytes and preimplantation embryos. The mRNA of DNA MTase was detected in the oocytes and pleimplantation embryos. The relative mRNA levels of DNA MTase were high from the stages of GV-oocytes and pronuclear embryos, and thereafter decreased gradually. By the treatment of $\alpha$-amanitin, it was confirmed that the transcripts presented in pronuclear embryos was derived from the maternal genome. The presence of transcripts of DNA MTase in the oocytes and pronuclear embryos suggests that the maintenance of DNA methylation may be necessary and seems to play an important role in gene expression and cell differentiation during preimplantation embryonic develop-ment in mouse.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.125.3-126
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2003
A near full-length sequence of a new tobamovirus infecting Hibiscus rosa-sinensis L. was determined. The genome consists of 58 nucleotides (nt) 5' UTR, followed by a 4.9 kb ORF which methyl transferase helicase domain (128 kDa), readthrough protein RNA dependent RNA polymerase (RdRp) 185 kDa and a 52 kDa protein. The 128 kDa protein had a maximum homology of 51.4 % to TMGMV and amino acids (an) were 54.3 % identical to TMV- vulgare strain. The 185 kDa RdRp had a maximum homology of 53.5% to TMV-Ob and KGMMV-Y and a 59.6% homology at the an level to CGMMV-SH. The MP gene encodes 282 aa and its theoretical molecular weight is 30.4 kDa. The nt and an sequence identities of MP ranged from 38.8% to 43.9% and 30.9% to 37.9%, respectively. The CP gene encodes 163 residues and with a theoretical molecular weight of 18.2 kDa The (nt) and aa sequences of the CP were 46.9 % to 51.6% and 45.3% to 57.1% identical to other tobamoviruses, respectively. The predicted virion origin of assembly (OAS) was located in the CP gene. Phylogenetic trees generated based on the nt and as sequences of RdRp, MP and CP genes indicated that this new virus clustered with subgroup II tobamoviruses. Although the CP ORF of this virus shared a high nt and aa sequence identity with Sunn-hemp mosaic virus (SHMV), Western analysis showed that it is serologically unrelated to SHMV. We propose the name Hibiscus virus S (HVS) for this Singapore isolate. This is the first report on a near full-length sequence of a Tobamovirus that infects hibiscus.
In Saccharomyces cerevisiae, Paf1 complex consists of five proteins, and they are structurally and functionally well conserved in yeast, fruit fly, plants, and human. With binding to RNA polymerase II from transcription start site to termination site, Paf1 complex functions as a platform for recruiting many types of transcription factors to RNA polymerase II. Paf1 complex contributes to H2B ubiquitination and indirectly influences on H3K4 di- and tri-methylation by histone crosstalk. But the individual effects of five components in Paf1 complex on these two histone modifications including H2B ubiquitination and H3K4 methylation largely remained to be identified. In this study, we constructed the single-gene knockout mutants of each Paf1 complex component and observed H3K4 mono-, di-, and trimethylation as well as H2B ubiquitination in these mutants. Interestingly, in each ${\Delta}paf1$, ${\Delta}rtf1$, and ${\Delta}ctr9$ strain, we observed the dramatic defect in H3K4 monomethylation, which is independent of H2B ubiquitination, as well as H3K4 di- and trimethylation. However, the protein level of Set1, which is methyltransferase for H3K4, was not changed in these mutants. This suggests that Paf1 complex may directly influence on H3K4 methylation by directly regulating the activity of Set1 or the stability of Set1 complex in an H2B ubiquitination independent manner.
Fusarium species, a large group of plant pathogens, potentially pose quarantine concerns worldwide. Here, we focus on the development of a method for detecting four Fusarium species in quarantined plants in Korea: F. solani f. sp. cucurbitae, F. stilboides, F. redolens, and F. semitectum var. majus. Species-specific primers were designed from the nucleotide sequences of either the translation elongation factor-1 alpha (TEF1) gene or RNA polymerase II subunit (RPB2) gene. Two different primer sets derived from TEF1, all specific to F. solani f. sp. cucurbitae, were able to differentiate the two races (1 and 2) of this species. A set of nested primers for each race was designed to confirm the PCR results. Similarly, two primer sets derived from RPB2 successfully amplified specific fragments from five F. stilboides isolates grouped within a single phylogenetic clade. A specific TEF1 primer set amplified a DNA fragment from only four of the 12 F. redolens strains examined, which were grouped within a single phylogenetic clade. All of the F. semitectum var. majus isolates could be specifically detected with a single RPB2 primer set. The specificity of the primer sets developed here was confirmed using a total of 130 Fusarium isolates.
Kim, Eun-Jin;Jung, Young-Ja;Kang, Shin-Jung;Chang, Seung-Yup;Huh, Keun;Nam, Doo-Hyun
BMB Reports
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v.34
no.2
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pp.114-117
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2001
Cervi Parvum Cornu is widely used as a hemopoietic, tonifying, growth-promoting, cardiotonic, and immuno-modulating agent in Korea. In order to develop the quality control method of Cervi Parvum Cornu by the identification of the biological source or origin, the molecular approach was applied using PCR (polymerase chain reaction) and PCR-RFLF (PCR-restriction fragment length polymorphism) analysis. In the PCR analysis of the mitochondrial 12S rRNA gene and cytochrome b gene regions, no distinctive DNA bands from Cervidae (deer) antlers and Rangifer (reindeer) antlers were observed. However, when the amplified products in the mitochondrial cytochrome b gene region were subjected to restriction digestion with TaqI, Cervidae antlers showed an undigested state of 380 by band, differently from two bands of 230 by and 1S0 by from Rangifer antlers. Based on this finding, the base sequences of amplified PCR products in the range of mitochondria) cytochrome b gene from Cervidae antlers and Rangifer antlers were determined and subjected to restriction analysis by various endonucleases. The results showed that antlers from Rangifer species could be simply discriminated with other antlers from 8 Cervidae species (Chinese deer, Russian deer, Hong Kong deer, New Zealand deer, Kazakhstan deer, elk, red deer and Sika deer) by PCR-RFLP analysis using AtuI, HaeIII, HpaII or Sau3AI(MboI) as well as TaqI in the range of the mitochondrial cytochrome b gene.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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