Oenanthe javanica와 O. javanica var. japonica 한국 내 식용미나리이다. Cicuta virosa는 독미나리로 시큐톡신을 함유하고 있다. 미나리에 대한 RAPD 마크에 의한 분자적 변이를 조사하였다. RAPD 분석을 위해 10개 올리고프라이머(오페론, OPB)로 6개 집단을 분석하였다. 6개 집단에서 72개 DNA 분절(밴드)을 찾았다. 72 밴드 중 61개(84.7%) 밴드는 다형현상을 나타내었다. 한국 내 독미나리 자연 집단은 작고 격리되어 패치 분포를 이루고 있지만 높은 유전적 다양도를 가지고 있었다. 반면에, 재배종 미나리(Oenanthe javanica var. japonica) 집단은 채소용으로 논에서 광범위한 분포를 나타내지만 독미나리와 야생종 미나리에 비해 낮은 유전적 다양도를 나타내었다. 비록 야생집단이 재배집단에 비해 다양도가 높지만 유의한 차이는 없었다. 전체 유전적 다양도(HT)는 0.342였다. 집단 내 유전적 다양도(HS)는 0.201이였다. 유전자 좌위에 근거한 집단 간 분화에서 전체 유전적 다양도의 비율(GST)은 0.414이므로 전체 변이의 41.4%는 집단 간에 있었다. 결론으로 RAPD기법은 독미나리와 식용미나리의 동정에 유용하였다. 또, RAPD의 OPB 마크는 미나리의 다른 자원과 식품 자원을 식별하는 데 도움이 될 수 있는 분자 마크임을 보여주었다.
Gibberella fujikuroi is species complex. This species complex includes Fusarium tabacinum, F. moniliforme(=F. verticillioides), F. nygamai, F. proliferatum as well as F. subglutinans. Our objective was to develop a technique to differentiate between isolates of F. subglutinans, F. proliferatum and F. verticillioides. Thirty-two strains of F. subglutinans, six strains from F. verticillioides and five strains of F. Proliferatum isolated from maize in Austria were studied using random amplified polymorphic DNA(RAPD). F. subglutinans strains clustered very closely, with similarity ranging from $87{\sim}100%$. On the other hand, all the amplification patterns of F. verticillioides were identical, as well as in the case of F. proliferatum. Our results indicated that these Fusaria species are distinct species and hence RAPD markers can be quick and reliable for differentiating them.
탄저균은 그람양성 아포형성세균으로 탄저를 일으키는 원인균이다. Bacillus cereus그룹에 속하는 22종을 포함하여 Bacillus 속의 29종에서 탄저균을 검증할 수 있는 DNA 마커를 개발하고 이를 이용하여 B. cereus 그룹에서 탄저균만을 구분하였다. 한국산 탄저균 경주로부터 709 bp마커(KHTS)를 확보하였다. KHTS분절로부터 얻어진 internal primer set의 PCR 산물은 B. cereus 그룹의 다른 종으로부터 탄저균만을 구별하였다.
The study was carried out for comparison of variants and development of genetic markers using Randomly Amplified Polymorphic D사A (RAPD) analysis method. The ginseng variants used were as follows: Chungkyung-Chong, Hwangskoog-Chong, KG101 selected by the pureline selection method, and 6 kinds of Jakyung-Chong strains Uinjakyung, Jakyung-Chong 81783, Jakyung-Chong 847913, Jaky tong-Chong 79742, Jinjakyung of USSR, and Mimaki of Japan). Four of 10 RAPD primers showed the distinctive polymorphism among 9 ginseng variants and lines, and were selected for more detailed polymorphic analysis. The sequences of 4 selected primers were TGCCGAGCTG (Primer#2), AATCGGGCTG (#4), GAAACGGGTG (U7), and GTGACGTAGG (#8). All primers produced several common bands among the strains. However, when primer # 2 was applied, the electrophoregram showed the specific band at 1.8 kb region in Chungkyung-Chong, Hwangskoog- chong, and KG101, and 1 kb in the Jakyung-Chong 847913. In primer #4, 1.1 kb band was shown in Chungkyung-Chong, Hwangskoog-Chong, KG101, and Jakyung-Chong 79742. In primer # 7, 700 bp band was appeared in Jakyung-Chong 81783 and Jinjakyung of USSR In primer # 8, 800 bp band was observed only in Mimaki, comparing to another strains. When Similarity Index (SI) was calculated, Chungkyung-Chong and Hwngskoog-Chong, and Jakyung- chong 81783 and Jinjakyung of USSR showed the most close SI, 0.11 and 0.08, respectively. The data of KG101, which showed the SI of 0.13 with the group of Chungkyung-Chong and Hwangskoog-Chong, coincided with the fact that it was released from Hwangskoog-Chong by breeding process. The data of Jakyung strains indicated the significant variation among the strains. From these results, RAPD analysis method could be succesively applied to the classification and genetic analysis for breeding of Korean ginseng.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제29권2호
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pp.169-178
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2014
In this study, we investigated genetic diversity of 22 microsporidian isolates infecting tropical tasar silkworm, Antheraea mylitta collected from various geographical forest locations in the state of Jharkhand, India, using polymerase chain reaction (PCR)-based marker assay: random amplified polymorphic DNA (RAPD). A type species, NIK-1s_mys was used as control for comparison. The shape of mature microsporidians was found to be oval to elongate, measuring 3.80 to $5.10{\mu}m$ in length and 2.56 to $3.30{\mu}m$ in width. Of the 20 RAPD primers screened, 16 primers generated reproducible profiles with 298 polymorphic fragments displaying high degree of polymorphism (97%). A total of 14 RAPD primers produced 45 unique putative genetic markers, which were used to differentiate the microsporidians. Calculation of genetic distance coefficients based on dice coefficient method and clustering with un-weighted pair group method using arithmetic average (UPGMA) analysis was conducted to unravel the genetic diversity of microsporidians infecting tasar silkworm. The similarity coefficients varied from 0.059 to 0.980. UPGMA analysis generated a dendrogram with four microsporidian groups, which appear to be different from each other as well as from NIK-1s_mys. Two-dimensional distribution based on Euclidean distance matrix also revealed considerable variability among different microsporidians identified from the tasar silkworms. Clustering of few microsporidian isolates was in accordance with the geographic origin. The results indicate that the RAPD profiles and specific/unique genetic markers can be used for differentiating as well as to identify different microsporidians with considerable accuracy.
서철재래종, 내장산 수집종, 대둔산 수집종, 거제도 수집종, 진부재래종 및 일본 도입종 등 계통의 용담을 대상으로 RAPD 분석을 통한 유사도 분석을 수행한 결과 적용한 20가지의 10-merprimer 중 8가지에서 54개의 증폭된 DNA 절편을 얻었다. 그 중 53.7%에 해당하는 29개의 band가 다형현상을 보였으며, 9.3%에 해당하는 5개의 band는 모든 계통에서 공통적으로 나타났고, 37%인 20개의 band가 특이성을 보였다. 특이성을 보이는 band들은 내장산 수집종에서 2개, 거제도 수집종에서 1개, 진부재래종에서 11개, 일본 도입종에서 6개가 관찰되었다. 유전적 유사도의 분석결과 서천재래종, 내장산 수집종, 대둔산 수집종 및 거제도 수집종이 0.76-0.87의 유사도를 보여 한 집단으로 구분되었으며, 이 집단과 진부재래종 및 일본 도입종 사이의 유사도는 0.23-0.34로 각 각 다른 집단으로 구별되었다. 또한 진부재래 종과 일본 도입 종 사이의 유사도는 0.41로 나타나 서로 구분되었다.
요코가와흡충과 미야타흡충의 genomic DNA를 RAPD 분석을 이용하여 비교하였다. 상업적으로 구 입한 60-70%의 G+C 성분을 가진 무작위 10-mer oligonucleotide 표지자 (Kit A, Operon Technologies Inc., CalifDmia, USA) 20개 중에서 다음의 8개를 이용하여 두 홉충간에 구별이 가능한 밴드양상을 관찰할 수 있었다: OPA-02,5-TCCCGAGCTG-3; OPA-09,5-GGGTAACGCC-3; OPA-10, 5-GTGATCGCAG-3; OPA-11, 5-CAATCGCCGT-3; OPA-13, 5-CAGCACCCAC-3; OPA-17, 5-GACCGCTGT-3; OPA-19,5-CAAACGTCGG-3; OPA-20, 5-GTrCCGATCC-3. 이 연구의 결과로 미야타흡충은 요코가와흡충과 서로 다른 유전자 염기 서열을 가지고 있음이 암시 되었다.
The genetic variability within and among three deer species in Malaysia, namely Cervus nippon (sika), Cervus timorensis (rusa) and Cervus unicolor (sambar), were evaluated using the RAPD technique. The DNA extracted from the buffy coat of 34 sika, 38 rusa and 9 sambar were analysed using ten primers that gave bands which showed good resolution. The primers generated 164 RAPD markers in total, and these ranged in size from 150 to 900 bp. The percent of polymorphism of the bands generated per primer ranged from 66.66-93.33% for rusa, 36.84-61.14% for sambar and 52.38-100% for sika. The overall percent polymorphism observed for the 164 RAPD markers was 99.39%. The results revealed five exclusive, monomorphic markers for sambar and one exclusive, monomorphic marker for sika; none was observed for rusa. However, these cannot be declared as markers for the identification of the species without analysis of more samples, populations and species. The means of within population genetic distances, based on Dice's and Jaccard's similarity indices, were similar for the rusa (0.383 and 0.542, respectively) and sika (0.397 and 0.558, respectively) populations with the sambar population being the least variable (0.194 and 0.323, respectively). The Dice based genetic distances within the species ranged from 0.194 to 0.397 and the genetic distances among the species were 0.791-0.911. The genetic distances based on Dice's and Jaccard's similarity indices between the rusa and sambar were 0.556 and 0.713, between the rusa and sika populations were 0.552 and 0.710, and between sambar and sika were 0.622 and 0.766, respectively.
The genus Acorus is known as an indigenous medicinal plant. Genetic diversity of thirteen accessions of A. calamus and eight of A. gramineus, with an accession of Colocasia antiquorum and two of Iris pseudacorus as outgroups, were evaluated using RAPD markers for cluster analysis and principal coordinate analysis, and NIR spectroscopic profiles for principal component analysis.A total of 371 polymorphic bands were obtained by using the selected 12 random primers. The genetic distances were estimated from 0.03 to 0.31 within A. calamus and from 0.03 to 0.51 within A. gramineus. The dendrogram and three-dimensional plot separated the accessions into four distinct groups (A. calamus, A. gramineus, C. antiquorum, and I. pseudacorus). Moreover, for the diversity among genus Acorus, eleven A. calamus accessions, one A. gramineus accession, and two I. pseudacorus accessions were non-destructively analyzed from their leaves by NIR spectroscopy, which discriminated Acorus accessions like the RAPD analysis. Interestingly, thirteen accessions of A. calamus were clustered into two groups based on RAPD and NIR analyses, which indicates that there are two ecotypes of A. calamus in Korea. An accession (CZ) of A. calamus with yellow stripe on leaves was closely grouped with another (CX) at a genetic distance (GD) of 0.03, which shows that the stripe trait might be generated by chimeric mutation. The genetic distance between A. calamus and A. gramineus was revealed to be farthest from 0.80 to 0.88 GD. In genus Acorus the genetic diversity and genetic variation were identified by using RAPD marker technique and non-destructive NIRs.
전복은 전복속(Haliotis)에 속하며 전 세계적으로 식품산업에서 중요한 복족류 연체동물이다. 우리나라에는 6개종; 북방전복(Haliotis discus hannai), 둥근전복(Haliotis discus discus), 왕전복(Haliotis madaka), 말전복(Haliotis gigantea), 오분자기(Haliotis diversicolor diversicolor), 마대오분자기(Haliotis diversicolor supertexta)가 보고되어 있다. 이 연구에서는 우리나라 해역에 서식하는 중ㆍ대형 전복과 4종인 북방전복, 둥근전복, 왕전복, 말전복의 유전학적 유연관계를 분석하기 위하여 미토콘드리아의 cytochrome c oxidase subunit I (COI) 유전자와 Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) 분석법을 실시 하였다. 본 연구의 결과 COI 유전자 분석과 RAPD 분석을 활용하면 4종의 전복 중 북방전복, 둥근전복, 왕전복을 한 그룹으로 나머지 한 그룹을 말전복으로 구분하는 종 분류는 명확히 구분할 수 있었다. 이러한 결과는 전복 교잡육종을 이용한 수출용 전복 신종자 개발에 있어 주요 대상종인 전복과 4종에 대한 유전적 근연 관계를 규정함으로써 향후 교잡육종 연구의 기초 자료를 제공할 수 있을 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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