• 한국자원식물학회지
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• 제22권5호
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• pp.446-453
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• 2009

동아시아에 분포하는 콩과에 속하는 칡 1종의 13집단과 근연분류군 2종의 4집단 등 총 17개의 개체군에 대하여 유전적 유연관계 및 종간 특이적인 분류학적으로 유용한 분자마커를 알아보기 위해 RAPD 분석을 실시하였다. 15개의 oligo primer를 이용한 효소중합반응을 통해 증폭된 RAPD 절편들은 200 bp에서 2,800 bp 사이의 구간에서 관찰되었다. 이중 유효한 polymorphic band makers는 총 208개, monomorphic bands는 3개를 확인하였으며, 칡의 종 특이적 분자마커는 4개로 확인되었다. 이러한 자료에 근거하여 칡속의 17개 개체군 집단에 대한 UPGMA 분석을 실시하였다. 도출된 UPGMA phenogram에서 한국산 칡 9개체군과 국외산 칡 3개체군이 각각 독립적인 두 개의 작은 유집군을 형성하였으며, 이후 두 유집군이 하나로 크게 유집되어 다른 칡 근연분류군과는 뚜렷하게 구분되었다. 따라서 RAPD 분석은 칡과 근연분류군간의 유연관계 분석 및 한국산과 국외산 집단의 원산지판별에 매우 유용한 분자마커로 생각된다.

• 한국작물학회지
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• 제51권2호
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• pp.169-172
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• 2006

Leaflet number of soybean controlled by Lf2 locus is the important trait in photosynthesis and plant type. The objective of this research was to identity molecular markers linked to the lf2 locus. A total of $115F_2$ plants were derived from a cross between normal three-leaflet type Sinpaldalkong (Lf2Lf2) and seven-leaflet mutant type T255 (lf2lf2). All leaflet counts of parents and $F_2$ individual plants were made in the field on fully expanded leaves on the main stem when terminal growth of the main stem had ceased. One-thousand 10-mer oligonucleotide RAPD primers and 664 SSR primers were used. The segregation ratios of 3 : 1 were observed in the $F_2$ population and the Chi-square values strongly suggested that the seven-leaflet was controlled by a single recessive gene. A genetic map was constructed from the 15 segregating markers (9 RAPDs, 5 SSRs, 1 lf2 locus). OPAD03 and OPAI13 RAPD markers were linked to the lf2 locus that controlled seven-leaflet type at a distance of 20.5 and 23.5 cM, respectively. Molecular markers identified in this study linked with lf2 locus will be helpful to locate lf2 locus on the public soybean molecular linkage map and would be useful for tagging the lf2 locus that controls seven-leaflet trait.

• The Plant Pathology Journal
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• 제31권4호
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• pp.402-413
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• 2015

Yellow rust (stripe rust), caused by Puccinia striiformis f. sp. tritici, is one of the most destructive foliar diseases of wheat in Egypt and worldwide. In order to identify wheat genotypes resistant to yellow rust and develop molecular markers associated with the resistance, fifty F8 recombinant inbred lines (RILs) derived from a cross between resistant and susceptible bread wheat landraces were obtained. Artificial infection of Puccinia striiformis was performed under greenhouse conditions during two growing seasons and relative resistance index (RRI) was calculated. Two Egyptian bread wheat cultivars i.e. Giza-168 (resistant) and Sakha-69 (susceptible) were also evaluated. RRI values of two-year trial showed that 10 RILs responded with RRI value >6 <9 with an average of 7.29, which exceeded the Egyptian bread wheat cultivar Giza-168 (5.58). Thirty three RILs were included among the acceptable range having RRI value >2 <6. However, only 7 RILs showed RRI value <2. Five RILs expressed hypersensitive type of resistance (R) against the pathogen and showed the lowest Average Coefficient of Infection (ACI). Bulked segregant analysis (BSA) with eight simple sequence repeat (SSR), eight sequence-related amplified polymorphism (SRAP) and sixteen random amplified polymorphic DNA (RAPD) markers revealed that three SSR, three SRAP and six RAPD markers were found to be associated with the resistance to yellow rust. However, further molecular analyses would be performed to confirm markers associated with the resistance and suitable for marker-assisted selection. Resistant RILs identified in the study could be efficiently used to improve the resistance to yellow rust in wheat.

• Mycobiology
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• 제30권3호
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• pp.139-145
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• 2002

Gibberella fujikuroi is species complex. This species complex includes Fusarium tabacinum, F. moniliforme(=F. verticillioides), F. nygamai, F. proliferatum as well as F. subglutinans. Our objective was to develop a technique to differentiate between isolates of F. subglutinans, F. proliferatum and F. verticillioides. Thirty-two strains of F. subglutinans, six strains from F. verticillioides and five strains of F. Proliferatum isolated from maize in Austria were studied using random amplified polymorphic DNA(RAPD). F. subglutinans strains clustered very closely, with similarity ranging from $87{\sim}100%$. On the other hand, all the amplification patterns of F. verticillioides were identical, as well as in the case of F. proliferatum. Our results indicated that these Fusaria species are distinct species and hence RAPD markers can be quick and reliable for differentiating them.

• 한국발생생물학회:학술대회논문집
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• 한국발생생물학회 2001년도 후기 제12차 학술대회 논문집
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• pp.34-35
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• 2001

RAPD analysis based on numerous markers have been used to investigate patterns of genetic differentiation ann and within two cultured and wild populations represented by the species crucian carp(Carassius carassius). From RAPD analysis using five primers, a total of 442 polymorphic bands were obtained in two populations and 273 were found to be specific to a wild population. According to RAPD-based estimates, average number of polymorphic bands in wild population was approximately 1.5 times as diverse as that in cultured. The average level of bandsharing values was $0.40 \pm 0.05$ in wild population, but was $0.69 \pm 0.08$ in cultured population, With reference to bandsharing values and banding patterns, wild population was considerably more diverse than cultured population. Knowledge of the genetic diversity of crucian carp should help in formulating more effective strategies for managing this aquacultural fish species.

• 원예과학기술지
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• 제31권6호
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• pp.756-763
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• 2013

당근의 기계적인 제모 시 발생하는 종자의 손실과 발아 시의 문제점을 개선한, 고품질의 당근 종자 생산을 위한 단모종자 당근 품종 육성에 이용할 분자표지를 개발하기 위하여 본 연구를 수행하였다. 본 연구에서는 2008년도부터 2013년도까지 단모종자 표현형 CT-SMR 616 OP 389-1 개체와 장모종자 표현형 CT-SMR 616-33 개체를 자가수분하여 세대 진전된 당근 계통들을 종자모 형질 관련 RAPD-SCAR 분자표지를 개발하는데 이용하였다. 이들 계통의 종자모 길이를 현미경을 이용하여 분석하였으며, 분석된 결과를 바탕으로 계통을 세대진전 시켜, 분자표지 다형성과도 비교분석하였다. 분자 표지 개발을 위하여 세대가 고정되었다고 판단되는 2011년 계통을 대상으로 80개의 random primer를 이용한 RAPD 분석을 통해 12개의 개체간 뚜렷한 차이를 보이는 종자모 형질 관련 특이적 band를 확인하였다. RAPD-SCAR 분자표지 개발을 위해 확인된 이들 특이적 band의 염기서열 분석을 통해 SCAR primer를 작성하였으며 각 SCAR primer는 24-28mer 크기로 3조합 이상 작성하였다. 분석 결과 작성된 SCAR primer 중 $SCA2_{1.2}$가 단모종자 표현형 계통에서만 특이적으로 증폭되는 것을 확인하였다. 이 $SCA2_{1.2}$ 분자표지의 정확성을 검증하기 위해 2012년도 계통과 2013년도 계통을 이용하여 재검증하였으며, 그 결과 개발된 SCAR 분자표지는 단모종자와 장모종자 계통을 구분할 수 있는 충분한 다형성을 제공하였다. 따라서 본 연구에서 개발된 SCAR 분자표지, $SCA2_{1.2}$는 당근의 단모종자 품종 육성 연구에 충분히 활용가능 할 것으로 기대된다.

• Journal of Forest and Environmental Science
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• 제25권2호
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• pp.93-100
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• 2009

In Malaysia, Labisia pumila Benth & Hook f, popularly known as 'Kacip Fatimah' has been used traditionally to treat various elements of the woman's health in Malay community. The objective of this study was to develop randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) based DNA markers for the identification of L. pumila and to distinguish its three varieties from each other. Total DNA from nine accessions of L. pumila was extracted by CTAB method and polymerase chain reactions (PCR) were carried out to amplify the segments of DNA using different primers to develop DNA barcode using RAPD technique. To find out variety-specific DNA marker/s, twenty different 10-mer primer sequences with annealing temperature from 36-$40^{\circ}C$ were evaluated in triplicate. Out of 20 random primers, two primers (OPA-1 and OPA-2/A10) were selected which produced reliable RAPD band patterns. To have DNA based handle, two RAPD amplification products were cloned and sequenced to determine the identity of the DNA. RAPD analysis using two random primers generated 72 discrete bands ranging in size 200 bp-3,000 bp. Fifty nine of these were polymorphic loci (82%) and thirteen were non-polymorphic loci (18%). A total of 32 bands polymorphic loci (72%) were amplified with primer OPA-1 and analyzed by cluster analysis and UPGMA (Unweighted Pair Group Method with Arithmetic) to present a dendogram depicting the degree of genetic relationship among nine accessions of L. pumila. Our results shows the reasonable genetic diversity among the L. pumila varieties and within varieties; and two RAPD marker sequences obtained could be used to identify L. pumila at species level.

• 생명과학회지
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• 제14권3호
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• pp.521-524
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• 2004

본 연구는 short oligonucleotide primer를 이용하여 마 품종간 유전 분석을 실시 하고자 PCR증폭 기법을 확립하고, 확립된 기술을 이용하여 제주도에 사육중인 천념기념물 347호로 등록된 제주말과 경주마로 잘 알려진 더러브렛간의 유전적인 다양성을 분석한 결과 마 품종간 차이를 보이는 DNA marker는 9개의 primer에서 확인되었으며, 이중 6개의 primer에서 더러브렛 특이 밴드와 나머지 3개에서 제주 마 특이 RAPD 밴드가 확인되어 cloning과 sequencing후에 SCAR primer를 제작하여 마 품종 식별에 활용할 수 있을 것으로 사료되며, 본 연구결과 RAPD표지인자는 마 품종간의 유전 분석에 매우 유용한 것으로 판단되었다.

• 한국약용작물학회지
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• 제8권3호
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• pp.243-249
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• 2000

RAPD 분석을 통한 marker선별과 건조약재의 비교, 그리고 내부형태 특징을 통해 당귀3종(種)을 구별할 수 있는 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 50개의 primer중 5개의 primer에서 당귀류 3품종을 모두 구별할 수 있는 특이적인 band가 나타났다. 2. 유연관계 분석에서 중국당귀와 일당귀가 참당귀보다 더 근연관계임을 알 수 있었다. 3. 신선한 잎과 건조된 약재에서 RAPD 재현성이 확인되어 RAPD 분석법을 통해 당귀감별에 응용할 수 있을 것으로 사료된다. 4. 뿌리 내부구조에서 중국당귀는 정상적인 2기사부와 2기목부에 덧붙여 일부 이상비대생장을 보였고, 일당귀나 참당귀의 도관절에 비하여 더 넓고 짧아 계통학적으로 훨씬 더 진화된 것으로 여겨진다. 5. 일당귀는 현저하게 두꺼운 코르크층이 발달한 반면 참당귀의 코르크층 아래에 $5{\sim}7$층의 후각세포층이 환상으로 발달하여 뚜렷한 대조를 이루었다.

• 한국자원식물학회지
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• 제19권2호
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• pp.336-339
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• 2006

홍화 수집종의 RAPD 분석을 통한 유전적 다양성 및 유연관계를 밝히고 품종군을 분류하여 품종육성의 기초자료로 활용코자 시험한 결과는 아래와 같다. RAPD 분석에 적용한 37개의 Primer 중 25개의 적정 primer를 선발하였고, 증폭원 PCR산물은 $0.1{\sim}4.0kb$에서 재현성있는 band를 보였으며 각 primer에 의해 증폭된 band의 수는 $1{\sim}9$개로 다양하였고 평균 4.8개였다. PCR 반응에 사용된 25개의 primer에서 120개의 band가 관찰되었으며 다형성을 보이는 band될 수는 23개(19.2%)였다. RAPD-PCR에 의해 얻어진 dendrogram에서 유연계수 0.042를 기준으로 합을 했을 때 6개 군으로 분류되었고 II군과 III군은 각각 12종(38%)씩 속하였다.