To prevent amnesic shellfish poisoning (ASP) resulting from the consumption of shellfish contaminated with domoic acid, the quantitative analysis of domoic acid is very important. We validated a high performance liquid chromatography (HPLC) method for accurate and precise quantification of domoic acid. A clear peak and the isolation of domoic acid resulted on injecting a 50% methanol extract of CRM-ASP-Mus-c mussel reference material using HPLC. The limit of detection of domoic acid under the established HPLC conditions was $0.10\;{\mu}g/g$, and the limit of quantification of the toxin under the same conditions was $0.25\;{\mu}g/g$. The intra-accuracy and precision for domoic acid in CRM-ASP-Mus-c were 90.7-95.7% and 0.28-22.25%, respectively. The inter-accuracy and precision for domoic acid were 89.1-97.1% and 1.7-4.1%, respectively. The mean recovery of domoic acid in methanol extracts from ten species of marine invertebrates was 88.6-1105.1%.
A reverse-phase HPLC method with detection by mass spectrometry is described for the simultaneous determination of doxifluridine and its two active metabolites, 5-fluorouracil (5-FU) and 5-fluorouridine (5-FUrd), in beagle dog plasma. The optimal chromatographic separation was achieved on a Waters $Xterra^{(R)}$$C_{18}$ column ($4.6{\times}250\;mm$ i.d., $5\;{\mu}m$ particle size) with a mobile phase of 0.1% formic acid in a mixture of 99% methanol and purified water (99:1, v/v). The developed method was validated in beagle dog plasma with a lowest limit of quantification of $0.05\;{\mu}g/mL$ for both doxifluridine and 5-FU, and $0.2\;{\mu}g/mL$ for 5-FUrd. Doxifluridine and its two metabolites were stable under the analysis conditions, and intra- and inter-day accuracies exceeded 92.87%, with a precision variability ${\leq}11.34%$ for each analyte. Additionally, the method for quantifying doxifluridine and its two metabolites, 5-FU and 5-FUrd, in beagle dog plasma was applied successfully to the analysis of pharmacokinetic samples.
Generally, Gwakhyangjeonggi-san has been used for treatment of diarrhea-predominant irritable bowel syndrome. In this study, an ultra-performance liquid chromatography-electrospray ionization-mass spectrometer method was established for the simultaneous quantification of marker compounds 1-20 in Gwakhyangjeonggi-san water extract. All analytes were separated by gradient elution using two mobile phases on a UPLC BEH $C_{18}$ ($100{\times}2.1mm$, $1.7{\mu}m$) column and maintained at $45^{\circ}C$. The injection volume was $2.0{\mu}L$ and the flow rate was 0.3 mL/min with detection at mass spectrometer. Regression equations of the compounds 1-20 were acquired with $r^2$ values ${\geq}0.9950$. The values of limit of detection and quantification of all analytes were 0.01-2.79 ng/mL and 0.03-8.37 ng/mL, respectively. The amounts of the compounds 1-20 in Gwakhyangjeonggi-san water extract were not detected $-3,236.67{\mu}g/g$. The established LC-MS/MS methods will be valuable to improve quality control of traditional herbal formula, Gwakhyangjeonggi-san.
A multiplex competitive polymerase chain reaction (PCR) method was developed for the rapid identification and quantification of Leuconostoc mesnteroides and Lactobacillus plantarum populations which are the key microorganisms in kimchi fermentation. The strain-specific primers were designed to selectively amplify the target genes encoding 165 rRNA of L. plantarum and dextransucrase of L. mesenteroides. There was a linear relationship between the band intensity of PCR products and the number of colony forming units of each model organism. The PCR quantification method was compared with a traditional plate-counting method f3r the enumeration of the two lactic acid bacteria in a mixed suspension culture and also applied to a real food system, namely, watery kimchi. The population dynamics of the two model organisms in the mixed culture were reliably predictable by the competitive PCR analysis.
Riboflavin is a water-soluble vitamin, which serves as a precursor to flavin mononucleotide and flavin adenine dinucleotide. This study aimed to develop a simple and rapid liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) analysis for the quantification of riboflavin in the Beagle dog plasma. This method utilized simple protein precipitation with acetonitrile and 13C4, 15N2-riboflavin was used as an internal standard (IS). For chromatographic separation, a hydrophilic interaction liquid chromatography (HILIC) column was used with gradient elution. The mobile phase consisted of 0.1% (v/v) aqueous formic acid with 10 mM ammonium formate and acetonitrile with 0.1% (v/v) formic acid. Since riboflavin is an endogenous compound, 4% bovine serum albumin in phosphate buffered saline was used as a surrogate matrix to prepare the calibration curve. The quantification limit for riboflavin in the Beagle dog plasma was 5 ng/mL. The method was fully validated for its specificity, sensitivity, accuracy and precision, recovery, and stability according to the US FDA guidance. The developed LC-MS/MS method may be useful for the in vivo pharmacokinetic studies of riboflavin.
Glycated hemoglobin ($HbA_{1c}$) has been commonly used to screen and diagnose for patients with diabetes mellitus. Here the accelerated procedure of microwave-assisted sample treatment from acid hydrolysis to enzyme digestion followed by isotope dilution liquid chromatography-tandem mass spectrometry (ID-LC-MS/MS) was optimized and applied to measure $HbA_{1c}$ in an effort to speed up analysis time. First, two signature peptides of $HbA_{1c}$ and hemoglobin $A_0$ were certified with amino acid analysis by setting optimized acid hydrolysis conditions to $150^{\circ}C$, 1.5 h and $10{\mu}M$ sample concentration in 8 M hydrochloric acid. Consequently, the accurate certified peptides above were used as calibration standards to implement the proteolytic procedure with endoproteinase Glu-C at $37^{\circ}C$, 700 W for 6 h. Compared to the traditional method, the microwave heating not only shortened dramatically sample preparation time, but also afforded comparable recovery yields. The optimized protocol and analytical conditions in this study are suitable for a primary reference method of $HbA_{1c}$ quantification with full SI-traceability and other similar proteins in complex biological samples.
Kim, Min Kyoung;Park, Geonha;Hong, Seon-Pyo;Jang, Young Pyo
Natural Product Sciences
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v.27
no.4
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pp.264-273
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2021
Simultaneous quantification of multiple marker compounds in herbal medicine by high performance liquid chromatography (HPLC) analysis is still a challenge due to the complexity in various parameters to be considered and co-existing multi-components. As a case study, a reliable HPLC method for simultaneous quantification of paeoniflorin from Paeoniae Radix and decursin from Angelicae Gigantis Radix in various commercial herbal medicine was developed based on analytical quality by design (AQbD) strategy. As a first step, risk assessment was performed to select the critical method parameters (CMPs) which were decided as organic mobile phase ratio and column oven temperature. In order to evaluate the effect of the CMPs on critical method attributes (CMAs) of peak resolution and tailing, central composite design (CCD) was employed. The final chromatographic conditions were optimized as follows: column- C18, 4.6 × 250 mm, 5 ㎛ particle size; mobile phase- A: acetonitrile, B: 0.1% acetic acid water; detection wavelength- 235 nm for paeoniflorin, 325 nm for decursin; column oven temperature- 25℃; flow rate- 1.0 mL/min; gradient mobile phase system as Time (min) : % A, 0:14, 25:14, 30:50, 60:50, 61:100, 65:100, 66:14, 75:14. The method was successfully validated according to the International Conference on Harmonization (ICH) guidelines and piloted for ten commercial herbal medicines.
Proceedings of the Korea Water Resources Association Conference
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2020.06a
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pp.123-123
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2020
The present study is aimed to correcting radar-based mean areal precipitation forecasts to improve urban flood predictions and uncertainty analysis of water levels contributed at each stage in the process. For this reason, a long short-term memory (LSTM) network is used to reproduce three-hour mean areal precipitation (MAP) forecasts from the quantitative precipitation forecasts (QPFs) of the McGill Algorithm for Precipitation nowcasting by Lagrangian Extrapolation (MAPLE). The Gangnam urban catchment located in Seoul, South Korea, was selected as a case study for the purpose. A database was established based on 24 heavy rainfall events, 22 grid points from the MAPLE system and the observed MAP values estimated from five ground rain gauges of KMA Automatic Weather System. The corrected MAP forecasts were input into the developed coupled 1D/2D model to predict water levels and relevant inundation areas. The results indicate the viability of the proposed framework for generating three-hour MAP forecasts and urban flooding predictions. For the analysis uncertainty contributions of the source related to the process, the Bayesian Markov Chain Monte Carlo (MCMC) using delayed rejection and adaptive metropolis algorithm is applied. For this purpose, the uncertainty contributions of the stages such as QPE input, QPF MAP source LSTM-corrected source, and MAP input and the coupled model is discussed.
This study presents an in-vitro model designed to simulate mitral valve regurgitation, aiming to compare the quantification results between Proximal Isovelocity Surface Area(PISA) and 4D Flow MRI on both fixed and valve annulus tracking(VAT) views. The in-vitro model replicates the dynamic conditions of the mitral valve in a pulsatile environment, utilizing a piston pump set at 60 bpm. Through systematic experiments and analysis, the study evaluates the accuracy and effectiveness of PISA and 4D Flow MRI in assessing regurgitation severity, considering both fixed and valve annulus tracking. The displacement length measured in echo closely resembled that of optical measurements, making it advantageous for structural analysis. VAT-4D flow MRI exhibited the smallest deviation from actual flow rate values, establishing it as most accurate method for quantitative regurgitation assessment.
Data modelling and interpretation for structural health monitoring (SHM) field data are critical for evaluating structural performance and quantifying the vulnerability of infrastructure systems. In order to improve the data modelling accuracy, and extend the application range from data regression analysis to out-of-sample forecasting analysis, an improved most likely heteroscedastic Gaussian process (iMLHGP) methodology is proposed in this study by the incorporation of the outof-sample forecasting algorithm. The proposed iMLHGP method overcomes this limitation of constant variance of Gaussian process (GP), and can be used for estimating non-stationary typhoon-induced response statistics with high volatility. The first attempt at performing data regression and forecasting analysis on structural responses using the proposed iMLHGP method has been presented by applying it to real-world filed SHM data from an instrumented cable-stay bridge during typhoon events. Uncertainty quantification and correlation analysis were also carried out to investigate the influence of typhoons on bridge strain data. Results show that the iMLHGP method has high accuracy in both regression and out-of-sample forecasting. The iMLHGP framework takes both data heteroscedasticity and accurate analytical processing of noise variance (replace with a point estimation on the most likely value) into account to avoid the intensive computational effort. According to uncertainty quantification and correlation analysis results, the uncertainties of strain measurements are affected by both traffic and wind speed. The overall change of bridge strain is affected by temperature, and the local fluctuation is greatly affected by wind speed in typhoon conditions.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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