O, Gyeong-Taek;Park, Gwi-Hwan;Lee, Jeong-Il;Lee, Jung-Gi;Kim, Seong-Jun;Motoki, Kubo;Jeong, Seon-Yong
한국생물공학회:학술대회논문집
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2000.11a
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pp.435-438
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2000
Crude oil-degrading microorganisms, Acinetobacter sp. A132, Pseudomonas aeruginosa F722, and Acinetobacter calcoaceticus OM1 were isolated from soil and sea. The optimal temperature of strain A132 and strain F722 on growth isolated from soil was $35^{\circ}C$ both, and also their growth were optimized at pH 8 and 9, respectively. The growth of the strains, A132 and F722, showed that crude oil of 2% (w/v) in culture broth in which crude oil was used as carbon and energy sources appeared to be an optimum. Optimal culture conditions of strain OM1 were different from those of the soil microorganisms except for temperature. The growth of strain OM1 was optimized at pH 7 and crude oil of 3.0% (w/v). The degradability to crude oil by strain A132 showed maximum $5.49g/\;l\;{\cdot}\;day$ under the conditions of $25^{\circ}C$, NaCl of 1.0% (w/v), and crude oil of 2.0% (w/v). The highest degradability of strain F722 to crude oil was $1.19g/\;l\;{\cdot}\;day$ under the culture conditions at $35^{\circ}C$, NaCl 1.0% (w/v), and crude oil of 2.0% (w/v). The degradation characteristics of kerosene $(nC_9-nC_{20})$ and diesel $(nC_9-nC_{28})$ by strain OM1, and F722 were analyzed by gas chromatography. Strain OM1 degraded more than 95% of kerosene and 75% of diesel for 7 days cultivation. Strain F722 showed degradation of more than 80% to kerosene in 10 days.
A fluidized biofilter was filled with Pseudomonas sp. and Bacillus cereus/thuringiensis-fixed waste-tire crumb media and was run to treat authentic textile-dyeing wastewater mixed with alkaline polyester-weight-reducing wastewater. As a result, its removal efficiency of $COD_{Cr}$ and color were 75~80% and 67%, respectively. In addition, upon constructing hybrid-recirculating system composed of the fluidized biofilter and a 450 W-UV/photocatalytic reactor, only fluidized biofilter was run bypassing UV/photocatalytic reactor at stage I. Subsequently, the hybrid system was continuously run at stage II-i, ii and iii. At stage II-i, the total removal efficiency of $COD_{Cr}$ was enhanced to be 80~85%, compared to 75% at stage I, owing to 20~30% removal efficiency of the UV/photocatalytic reactor. However, at stage II-i, the total removal efficiency of color was enhanced to be 65~70%, compared to 45~65% at stage I, even though the removal efficiency of the UV/photocatalytic reactor was tantamount to merely 0~5%. As far as the removal efficiency of fluidized biofilter of the hybrid-recirculating system is concerned, its removal efficiency of color was enhanced by the synergy effect of the hybrid-recirculating system unlike $COD_{Cr}$. Besides, despite of the increase of hybrid-recirculating system-recycle ratio, the deactivation of photo-catalytic activity was scarcely observed to eliminate the color while its irreversible deactivation was observed to eliminate $COD_{Cr}$.
Oh, Young Hoon;Kang, Kyoung-Hee;Shin, Jihoon;Song, Bong Keun;Lee, Seung Hwan;Lee, Sang Yup;Park, Si Jae
KSBB Journal
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v.29
no.6
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pp.443-447
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2014
Biosynthesis of lactate-containing polyhydroxyalkanoates (PHAs) was examined in recombinant Escherichia coli W strain from sucrose. The Pseudomonas sp. MBEL 6-19 phaC1437 gene and the Clostridium propionicum pct540 gene, which encode engineered Pseudomonas sp. MBEL 6-19 PHA synthase 1 ($PhaC1_{Ps6-19}$) and engineered C. propionicum propionyl-CoA transferase ($Pct_{Cp}$), respectively, were expressed in E. coli W to construct key metabolic pathway to produce poly(3-hydroxybutyrate-co-lactate) [P(3HB-co-LA)]. The recombinant E. coli W expressing the phaC1437 gene and the pct540 gene could synthesize P(3HB-co-13mol%LA) up to the polymer content of 31.3 wt% when it was cultured in chemically defined MR medium containing 20 g/L of sucrose and 2 g/L of sodium 3-hydroxybutyrate. When Ralstonia eutropha phaAB genes were additionally expressed to provide 3-hydroxybutyrate-CoA (3HB-CoA) from sucrose, P(3HB-co-16mol%LA) could be synthesized from sucrose as a sole carbon source without supplement of sodium 3-hydroxybutyrate in culture medium, but the PHA content was decreased to 12.2 wt%. The molecular weight of P(3HB-co-16 mol%LA) synthesized in E. coli W using sucrose as carbon source were $1.53{\times}10^4$ ($M_n$) and $2.78{\times}10^4$ ($M_w$), respectively, which are not different from those that have previously been reported by other recombinant E. coli strains. Engineered E. coli strains developed in this study should be useful for the production of lactate-containing PHAs from sucrose, one of the most abundant and least expensive carbon sources.
Kim, Jong-Soo;Kim, Ji-Hyun;Ryu, Eun-Kyeong;Kim, Jin-Kyoo;Kim, Chi-Kyung;Hwang, In-Gyu;Lee, Kyoung
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.14
no.2
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pp.302-311
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2004
Comamonas testosteroni (formerly Pseudomonas sp.) NCIMB 10643 can grow on biphenyl and alkylbenzenes $(C_2-C_7)$ via 3-substituted catechols. Thus, to identify the genes encoding the degradation, transposon-mutagenesis was carried out using pAG408, a promoter-probe mini-transposon with a green fluorescent protein (GFP), as a reporter. A mutant, NT-1, which was unable to grow on alkylbenzenes and biphenyl, accumulated catechols and exhibited an enhanced expression of GFP upon exposure to these substrates, indicating that the gfp had been inserted in a gene encoding a broad substrate range catechol 2,3-dioxygenase. The genes (2,826 bp) flanking the gfp cloned from an SphI-digested fragment contained three complete open reading frames that were designated bphCDorfl. The deduced amino acid sequences of bphCDorfl were identical to 2,3-dihydroxybiphenyl 1,2-dioxygenase (BphC), 2-hydroxy-6-oxo-6-phenylhexa-2,4-dienoate hydrolase (BphD), and OrfI, respectively, that are all involved in the degradation of biphenyl/4-chlorobiphenyl (bph) by Ralstonia oxalatica A5. The deduced amino acid sequence of the orfl revealed a similarity to those of outer membrane proteins belonging to the OmpW family. The introduction of the bphCDorfl genes enabled the NT-l mutant to grow on aromatic hydrocarbons. In addition, PCR analysis indicated that the DNA sequence and gene organization of the bph operon were closely related to those in the bph operon from Tn4371 identified in strain A5. Furthermore, strain A5 was also able to grow on a similar set of alkylbenzenes as strain NCIMB 10643, demonstrating that, among the identified aromatic hydrocarbon degradation pathways, the bph degradation pathway related to Tn4371 was the most versatile in catabolizing a variety of aromatic hydrocarbons of mono- and bicyclic benzenes.
Lee, Kang Yu;Jang, Min;Park, In Gun;Um, Tae Young;Lim, Kyeong Ho
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.35
no.8
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pp.564-570
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2013
Domestic treatment facilities for acid mine drainage (AMD) mostly used a passive treatment process. But some passive treatment facility discharged high manganese concentrations because it is required high pH (>9) for abiotic oxidation of Mn(II) to Mn(IV). This study was focused on the feasibility of biological manganese treatment using the manganese-oxidizing bacteria (Pseudomonas sp. MN5) from AMD and economical application method of it. To investigate the various conditions of water quality the most part of the experiments were based on batch test. And result of it showed that maximum manganese oxidation rate were $10.4mg/L{\cdot}h$ at the pH7. We also performed small column tests in which MOB were attached to the functional polyurethane (FPU) media containing alkaline chemicals. Manganese concentration decreased 42 mg/L to below 6 mg/L. But anaerobic condition formed by excessive bacterial respiration in column resulted in increasing effluent manganese concentration.
Kim, You Jin;Chae, Cheol Gi;Kang, Kyoung Hee;Oh, Young Hoon;Joo, Jeong Chan;Song, Bong Keun;Lee, Sang Yup;Park, Si Jae
KSBB Journal
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v.31
no.1
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pp.27-32
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2016
Several CoA transferases from Clostridium beijerinckii, C. perfringens and Klebsiella pneumoniae were examined for biosynthesis of lactate-containing polyhydroxyalkanoates (PHAs) in recombinant Escherichia coli XL1-Blue strain. The CB3819 gene and the CB4543 gene from C. beijerinckii, the pct gene from C. perfringens and the pct gene from K. pneumoniae, which encodes putative CoA transferase gene, respectively, was co-expressed with the Pseudomonas sp. MBEL 6-19 phaC1437 gene encoding engineered Pseudomonas sp. MBEL 6-19 PHA synthase 1 ($PhaC1_{Ps6-19}$) to examine its activity for the construction of key metabolic pathway to produce poly(3-hydroxybutyrate-co-lactate) [P(3HB-co-LA)]. The recombinant E. coli XL1-Blue expressing the phaC1437 gene and CB3819 gene synthesized poly(3-hydroxybutyrate) [P(3HB)] homopolymer to the P(3HB) content of 60.5 wt% when it was cultured in a chemically defined medium containing 20 g/L of glucose and 2 g/L of sodium 3-hydroxybutyrate. Expression of the phaC1437 gene and CB4543 gene in recombinant E. coli XL1-Blue also produced P(3HB) homopolymer to the P(3HB) content of 51.2 wt% in the same culture condition. Expression of the phaC1437 gene and the K. pneumoniae pct gene in recombinant E. coli XL1-Blue could not result in the production of PHAs in the same culture condition. However, the recombinant E. coli XL1-Blue expressing the phaC1437 gene and the C. perfringens gene could produce poly(3-hydroxybutyrate-co-lactate [P(86.4mol%3HB-co-13.7 mol%LA) up to the PHA content of 10.6 wt% in the same culture condition. Newly examined CoA transfereases in this study may be useful for the construction of engineered E. coli strains to produce PHA containing novel monomer such lactate.
For the practical application and development of biopolymer flocculant Biopol32 produced by Pseudomonas sp. GP32, its flocculation effect on wastewater from food processing, slaughter houses, and the dyeing industry was investigated. In the food processing wastewater, Biopol32 led to a chemical oxygen demand (COD) reduction rate of 70% and a suspended solid (SS) removal rate of 49% at pH 6.0. In the slaughter house wastewater at pH 4.0, a COD reduction rate of 61% and SS removal rate of 91% were observed, and in the dyeing wastewater, the rates were 72% and 92%, respectively, at pH 5.0. The size of floc formed during the flocculation process was 10 mm at a final concentration of 20 ppm, and the dehydration efficiency was 62%. In both the bioflocculant Biopol32 group and a PAA synthetic flocculant group, optimal flocculant concentration that yielded the best overall dehydration efficiency was 20 ppm, and, at this concentration, the shortest filtration time to reach the natural critical moisture content of 78.1% was attained.
Abiotic and biotic stresses have been a serious threat to crop growth and productivity in the agricultural system. In this study, four strains (HS1, H30-3, KJ40, and BC42), which have biological activities related to disease suppression or alleviation of salinity and drought stresses, were tested for broad-spectrum biocontrol activity against anthracnose caused by Colletotrichum orbiculare, a bacterial fruit blotch caused by Acidovorax citrulli, and Fusarium wilt caused by Fusarium oxysporum in cucumber plants. As a result of test, when the four strains were drenched into the soil, anthracnose in cucumber leaves significantly decrease; strain KJ40 suppressed disease incidence by A. citrulli; strain BC42 significantly reduced bacterial fruit blotch and Fusarium wilt compared to control. Therefore, strain KJ40 could be a biocontrol candidate for controlling anthracnose through induced systemic resistance and the disease caused by A. citrulli as well as alleviating drought stress; strain BC42 has broad-spectrum biocontrol activity against anthracnose, Fusarium wilt, and bacterial fruit blotch.
Jang, Hyun Sup;Shin, Shoung Kyu;Song, Ji Hyeon;Hwang, Sun Jin
KSCE Journal of Civil and Environmental Engineering Research
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v.26
no.6B
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pp.695-701
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2006
A toluene-degrading bacterial strain was isolated from a mixed culture that was maintained using toluene as a sole carbon and energy source. The isolated bacterium was classified as Pseudomonas sp. TBD4 based on the close relationship to bacteria belonging to this genus. A bottle study to determine biodegradation rates of individual aromatic compounds showed that the biodegradation was faster in the order of toluene, benzene, styrene, and p-xylene. However, when various mixtures were subjected to TDB4, styrene was degraded at the highest rate, indicating that both toluene and p-xylene could stimulate the degradation of other substrates whereas styrene played as an inhibitor. In addition, the mixed culture and TDB4 were inoculated to the bioactive foam reactor (BFR), and the reactor performance and the corresponding change of microbial community were monitored using the fluorescent in situ hybridization (FISH) method. When an inlet concentration of the VOC mixture increased to greater than 250 ppm, the overall removal efficiency dropped significantly. The FISH measurement demonstrated that the ratio of TDB4 to the total bacteria also decreased to less than 20% along with the decline in removal efficiency in the BFR. As a result, the periodic addition of the pre-grown TDB4 might have been beneficial to achieve a stable performance in the BFR operated over an extended period.
Lee, Do Kyung;Kim, Min Ji;Kang, Joo Yeon;Park, Jae Eun;Shin, Hea Soon;Ha, Nam Joo
Korean Journal of Microbiology
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v.49
no.3
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pp.245-252
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2013
Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter baumannii are significant opportunistic pathogens in hospitals and are resistant to most antibiotics. Multidrug-resistant P. aeruginosa (MDRPA) and A. baumannii (MDRAB) cause severe human nosocomial infections and are more difficult to treat than methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Bifidobacteria are among of the most beneficial probiotics and have been widely studied for their antimicrobial activities. The present study explored the antimicrobial activity of Bifidobacterium sp. isolated from healthy Koreans against MDRPA and MDRAB. The antimicrobial activity of the isolates against MDRPA and MDRAB, which are resistant to ciprofloxacin, tobramycin, gentamicin, meropenem, and ceftazidime, was determined by modified broth microdilution methods using absorbance. Among all tested bifidobacteria isolates (nine B. adolescentis, three B. longum, and two B. pseudocatenulatum), the culture supernatant of B. pseudocatenulatum SPM1309 showed a strong growth inhibitory effect against MDRPA and MDRAB. No change in the turbidity of the mixture was observed during incubation, and its inhibitory effect occurred through bacteriostastic action. Moreover, the antibacterial activity was observed in the fraction with molecular weights <10 kDa of bifidobacteria culture supernatant, and the active fraction was heat-stable because it maintained its activity when heated at $70^{\circ}C$ for 10 min. The results suggest that this Bifidobacterium strain could have potential applications for alternative therapy in MDRPA and MDRAB infections.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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