• 제목/요약/키워드: Protein solubilization

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CTAB/Hexanol/Isooctane 역미셀계를 이용한 단백질 분리 (Protein Separation with CTAB/Hexanol/Isooctane Reverse Micellar System)

  • 김영숙;신해헌;권윤중;변유량;홍석인
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제18권5호
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    • pp.517-524
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    • 1990
  • CTAB/hexanol/isooctane 역미셀을 이용하여 단백질을 선택적으로 분리할 수 있는 분리조건을 밝히기 위해서 먼저 분자량과 등전점이 다른 여러 단백질의 용해와 회수에 미치는 pH, 이온의 종류 및 이온 강도, 계면활성제의 종류 등 system parameters에 대해 연구 검토하였다. pH에 따른 단백질의 용해는 등전점이 낮은 pepsin이 pH5-7 이상, 등전점이 높은 lisozyme이나 ribonuclease-a는 pH11-12 이상으로 단백질이 계면활성제의 (+)전하와 반대전하인 (-)를 띠는 등전점 이상의 pH역역에서 용해가 가능하였다.

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활성 과황산염을 이용한 슬러지 가용화 (Sludge solubilization using sono-activated persulfate)

  • 문상재;남세용
    • 유기물자원화
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    • 제29권3호
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    • pp.35-40
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    • 2021
  • 초음파로 활성화된 과황산염을 이용한 슬러지의 가용화 정도를 확인하기 위하여 VSS 감량화율, 가용화율 및 체외고분자물질을 주요 지표로 측정하여 초음파 및 수산화나트륨을 이용한 알칼리·초음파 방법과 비교하였다. 과황산염·초음파 조건에서 VSS 감량화율은 27.6%, 가용화율은 58.9%로 증가하였고, TB-EPS as Carbohydrate와 Protein은 각각 770 mg/L, 2,162 mg/L 용출되었다. 초음파 및 알칼리·초음파 방법에 비하여 VSS감량화율 및 가용화율이 높았으며, TB-EPS지표로 볼 때 세포의 파괴 및 용출에서도 과황산염·초음파 조건에서 더 효율적이었다.

하수슬러지 가용화와 체외고분자물질(EPS)간의 관계 (The relation between sewage sludge solubilization and extracellular polymeric substances)

  • 전병철;남세용
    • 유기물자원화
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    • 제27권4호
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    • pp.43-49
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    • 2019
  • 본 연구는 알칼리·초음파 전처리를 통한 하수슬러지의 가용화 정도를 확인하기 위해 슬러지 가용화율과 VSS 감량화율을 측정하였다. 또한 슬러지 가용화와 EPS간의 관계를 확인하기 위해 LB-EPS(Loosely-Bound EPS), TB-EPS(Tightly-Bound EPS)를 측정하였다. 실험 결과, TS 1.0%, pH 12 조건에서 슬러지 가용화율은 27.7% 증가하였고, LB-EPS as Carbohydrate와 Protein은 각각 14.6, 13.3 mg/L/g TS가 증가하여 가용화에 따른 유기물의 변화와 유사한 경향을 나타내었다. 또한 VSS는 26.7% 감량되었고, TB-EPS as Carbohydrate와 Protein은 각각 15.7, 21.9 mg/L/g TS 용출되어 가용화에 따른 고형물의 변화 역시 유사한 경향을 나타내었다.

Preparation and characterization of protein isolate from Yellowfin tuna Thunnus albacares roe by isoelectric solubilization/precipitation process

  • Lee, Hyun Ji;Lee, Gyoon-Woo;Yoon, In Seong;Park, Sung Hwan;Park, Sun Young;Kim, Jin-Soo;Heu, Min Soo
    • Fisheries and Aquatic Sciences
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    • 제19권3호
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    • pp.14.1-14.10
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    • 2016
  • Isoelectric solubilization/precipitation (ISP) processing allows selective, pH-induced water solubility of proteins with concurrent separation of lipids and removal of materials not intended for human consumption such as bone, scales, skin, etc. Recovered proteins retain functional properties and nutritional value. Four roe protein isolates (RPIs) from yellowfin tuna roe were prepared under different solubilization and precipitation condition (pH 11/4.5, pH 11/5.5, pH 12/4.5 and pH 12/5.5). RPIs contained 2.3-5.0 % moisture, 79.1-87.8 % protein, 5.6-7. 4 % lipid and 3.0-3.8 % ash. Protein content of RPI-1 and RPI-2 precipitated at pH 4.5 and 5.5 after alkaline solubilization at pH 11, was higher than those of RPI-3 and RPI-4 after alkaline solubilization at pH 12 (P < 0.05). Lipid content (5.6-7.4 %) of RPIs was lower than that of freeze-dried concentrate (10.6 %). And leucine and lysine of RPIs were the most abundant amino acids (8.8-9.4 and 8.5-8.9 g/100 g protein, respectively). S, Na, P, K as minerals were the major elements in RPIs. SDS-PAGE of RPIs showed bands at 100, 45, 25 and 15 K. Moisture and protein contents of process water as a 2'nd byproduct were 98.9-99.0 and 1.3-1.8 %, respectively. Therefore, yellowfin tuna roe isolate could be a promising source of valuable nutrients for human food and animal feeds.

Optimization of ultrasonification of slaughter blood for protein solubilization

  • Jeon, Yong-Woo
    • Environmental Engineering Research
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    • 제20권2호
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    • pp.163-169
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    • 2015
  • In this study, we attempted to solubilize protein in slaughter blood (SB) using ultrasonic technology. The application of ultrasonic technology can make enzymatic degradation of SB more effective, which has no comparable alternative for treatment. The SB was homogenized by grinding it for 10 minutes at 10,000 rpm as a pretreatment for preventing its clotting, and then ultrasonic treatment was attempted to solubilize protein in SB. To maximize the efficiency of ultrasonic treatment for SB, the optimum condition of ultrasonic frequency (UF) was determined to be 20 kHz. To optimize the operation conditions of ultrasonification with 20 kHz of frequency, we used response surface methodology (RSM) based on ultrasonic density (UD) and ultrasonification time (UT). The solubilization rate (SR) of protein (%) was calculated to be $101.304-19.4205X_1+0.0398X_2+7.9411X_1{^2}+0.0001X_2{^2}+0.0455X_1X_2$. From the results of the RSM study, the optimum conditions of UD and UT were determined at 0.5 W/mL and 22 minutes, respectively, and SB treated under these conditions was estimated to have a 95% SR. Also, experimentally, a 95.53% SR was observed under same conditions, accurately reflecting the theoretical prediction of 95%.

Reconstitution of Sarcoplasmic Reticulum-$Ca^{2+}$ Release Channels into Phospholipid Vesicles : Investigation of Conditions for Functional Reconstitution

  • Yang, In-Sik;Lee, Hee-Bong
    • BMB Reports
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    • 제28권2호
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    • pp.129-137
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    • 1995
  • The ryanodine-receptor $Ca^{2+}$ release channel protein in the sarcoplasmic reticulum membrane of rabbit skeletal muscle plays an important role in muscle exitation-contraction (E-C) coupling. Various types of detergents were tested, including Chaps, cholate, octylglucoside, Zwittergents, Mega-9, Lubrol PX, and Triton X-100 for solubilization of this protein. Among these, Chaps and Triton X-100 were found to optionally solubilize the channel complex. Optimum conditions for this solubilization were pH 7.4 with a salt concentration of 1 M. The addition of phospholipid in the solubilization step helped in stabilizing the protein. The purification of the receptor was performed using sucrose density gradient centrifugation. Various methods [dilution, freeze-thaw, adsorption (Biobeads), and dialysis] were investigated to incorporate the Chaps-solubilized and purified $Ca^{2+}$ release channel protein into liposomes made from different types of phospholipids. Of these, a combined method consisting of a dialysis, freeze-thaw and sonication steps yielded the best results. Reconstituted vesicles produced by this method with 95% phosphatidylcholine (from soybean extract) had good function.

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양이온 계면활성제 역미셀내로 단백질의 용해 (Protein Solubilization in Reverse Micelles of Cationic Surfactant)

  • 김영숙;노영태
    • KSBB Journal
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    • 제5권3호
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    • pp.215-221
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    • 1990
  • 양이온 계변활성제의 역미셀을 이용하여 단백질을 선택적으로 분리할 수 있는 분리조건을 밝히기 위해서 분자량과 등전점이 다른 여러 단백질의 용해에 미치는 pH, 이온 및 강도, 계면활성제의 종류 등 system para-meter 틀에 대해 연구 검토하였다. 등전점이 낮은 pepSIn 은 pH 5-7 이상에서, 등전점이 높은 ribotluclease-a 나 lisozym$\xi$은 pH 11-12 이상에서 용해되어 단백질이 계면 활성제의 (+)전하와 반대전하언 (-)를 띠는 등전점 이상의 pH영역에서 용해가 가능하였다. KCI을 이용하여 이온강도를 증가시킴에 따라 단백질의 용해 정도는 전반적으로 감소하였다. 친수성부분은 동일하나 소수성 무분이 다콘 양이온계면활성제 CTAB, DDAB, TOMAC 을 이용하여 역미셀제를 변화시켰을 때, 소수성 탄화수 소사슬이 3개 인 TOMAC(Wo=5) 이 탄화수소사슬이 1개인 CTAB(Wo=28)와 2개인 DDAB(Wo=7-12)에 비해 작은 역셀을 형성하여 낮은 용해 정도플 보였 다. 찬은 DDAB에 대해서도 유기용매의 종류에 따라 W Wo가 달랐는데 benzene(Wo=7)에 비하여 t$\xi$trachloro-ethylene (Wo= 12)이 보다 큰 역미젤을 형성하고 용해 능력도 높았다.

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어류 알로부터 알칼리 가용화공정을 통해 회수한 Collagenous Protein 획분의 식품 기능특성 (Food Functionality of Collagenous Protein Fractions Recovered from Fish Roe by Alkaline Solubilization)

  • 윤인성;김진수;허민수
    • 한국수산과학회지
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    • 제51권4호
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    • pp.351-361
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    • 2018
  • This study investigated the potential of collagenous protein fractions (CPFs) as functional foods. The specific CPFs studied were recovered from the roe of bastard halibut (BH), Paralichthys olivaceus; skipjack tuna (ST), Katsuwonus pelamis; and yellowfin tuna (YT), Thunnus albacares through the alkaline solubilization process at pH 11 and 12. The buffer capacity, water-holding capacity and solubility of CPFs with pH-shift treatment were significantly better at alkaline pH (10-12) than at acidic pH (2.0). At pH-shift treatment (pH 2 and 12), the foaming capacities of CPFs from ST and YT were improved compared to those of controls, but they were unstable compared to BH CPFs. The emulsifying activity index (EAI, $m^2/g$ protein) of CPFs (controls) was 16.0-21.1 for BH, 20.1-23.9 for ST and 9.3-13.7 for YT (P<0.05). CPFs adjusted to pH 12 showed improved EAI and YT CPFs showed significantly greater emulsifying ability than those from BH and ST. CPFs recovered from fish roe are not only protein sources but also have a wide range of food functionalities, confirming the high availability of fish sausage and surimi-based products as protein or reinforcing materials for functional foods and alternative raw materials.

실크의 가용화 조건이 효소분해 실크 펩타이드의 분자량 분포에 미치는 영향 (Effect of Solubilization Conditions on Molecular Weight Distribution of Enzymatically-Hydrolyzed Silk Peptides)

  • 채희정;인만진;김의용
    • KSBB Journal
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    • 제13권1호
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    • pp.114-118
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    • 1998
  • 실크의 피브로인 단백짐의 가수분해에 의한 실크 펠타이드의 제조를 위하여 설크의 가용화 조건이 분자량 분포에 미치는 영 향을 고찰하였다 염 화칼숨, ethylenediamine 및 황산에 의해 가용화된 실크의 평균 분자량은 각각 41600, 3308과 1268 dalton 으로서 염화칼숨을 제외한 나머지 두 가용화 방법에서 평균 분 자량이 수천 dalton인 실크 용액을 얻을 수 있었으며 분산계수 는 3-4의 범위뜰 보였다. 가용화 및 분말화한 후 6시간 동안 단백질 분해효소 처리에 의하여 600-1200 dalton의 중량평균 분 자량을 갖는 살크 접타이드틀 얻을 수 있었다. 24시간 염산에 의한 산분해 처리에 의해 얻은 실크 웹타이드의 평균 분자량은 145 dalton으로 80%의 높은 유리 아미노산 함량을 나타내었다. 여러가지 가용화 방법 및 가수분해 방법 중 낮은 농도의 황산용 액으로 우선 실크를 가용화한 후 중화 및 효소처리에 의해 웹타 이드로 가수분해하는 방법이 과도한 아미노산의 유리를 억제하 면서 분자량의 조절도 용이할 것으로 판단되었다.

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