Protein Solubilization in Reverse Micelles of Cationic Surfactant

양이온 계면활성제 역미셀내로 단백질의 용해

The solubilization of BSA, pepsin, trypsin and ribonuclease-a in cationic reverse micellar solutions has been investigated. For complete solubilization into reverse micellar solutions, pH values of several pH units above the isoelectric point of each protein were required. Solubilization was observed to decrease with increasing ionic strength of KCI. The size of empty micelles showed no significant change with increasing ionic strength. Trioctylmethyl ammonium chloride (TOMAC) in cyolohexane showed the lowest solubilization for the proteins. The system didodecyl dimethyl ammonium bromide (DDAB)-tetrachloroethylene was capable of solubilizing larger amounts of proteins than the system DDAB-benzene. Cetyl trimethyl ammonium bromide(CTAB)-hexanol-isooctane system showed lower solubilization than DDAB-tetrachloroethylene system, while it had higher Wo value.

양이온 계변활성제의 역미셀을 이용하여 단백질을 선택적으로 분리할 수 있는 분리조건을 밝히기 위해서 분자량과 등전점이 다른 여러 단백질의 용해에 미치는 pH, 이온 및 강도, 계면활성제의 종류 등 system para-meter 틀에 대해 연구 검토하였다. 등전점이 낮은 pepSIn 은 pH 5-7 이상에서, 등전점이 높은 ribotluclease-a 나 lisozym$\xi$은 pH 11-12 이상에서 용해되어 단백질이 계면 활성제의 (+)전하와 반대전하언 (-)를 띠는 등전점 이상의 pH영역에서 용해가 가능하였다. KCI을 이용하여 이온강도를 증가시킴에 따라 단백질의 용해 정도는 전반적으로 감소하였다. 친수성부분은 동일하나 소수성 무분이 다콘 양이온계면활성제 CTAB, DDAB, TOMAC 을 이용하여 역미셀제를 변화시켰을 때, 소수성 탄화수 소사슬이 3개 인 TOMAC(Wo=5) 이 탄화수소사슬이 1개인 CTAB(Wo=28)와 2개인 DDAB(Wo=7-12)에 비해 작은 역셀을 형성하여 낮은 용해 정도플 보였 다. 찬은 DDAB에 대해서도 유기용매의 종류에 따라 W Wo가 달랐는데 benzene(Wo=7)에 비하여 t$\xi$trachloro-ethylene (Wo= 12)이 보다 큰 역미젤을 형성하고 용해 능력도 높았다.