A mammalian DNA repair enzyme, UV endonuclease III which also functions as a ribosomal protein S3 (rpS3), was purified from mouse cells and characterized. UV endonuclease III was previously cloned and known to yield a peptide of 32 kDa upon expression in E. coli [Kim et al., (1995) J. Bioi. Chem. 270, 13620-13629]. However, biochemically purified UV endonuclease III, which has a sedimentation coefficient of 3.25, appears to have an additional peptide of 28 kDa. It appears that two bands were derived from one complex, judging from the comparison of the nuclease activity on the native and SDS-gel electrophoreses. UV endonuclease III becomes non-specific upon purification and this phenomenon is more significant in the case of pure fractions of the enzyme. Non-specific activity was not influenced by pH or any salt conditions.
We had analyzed 10 exome sequencing data and single nucleotide polymorphism chips for blood cancer provided by the PGM21 (The National Project for Personalized Genomic Medicine) Award program. We had removed sample G06 because the pair is not correct and G10 because of possible contamination. In-house software somatic copy-number and heterozygosity alteration estimation (SCHALE) was used to detect one loss of heterozygosity region in G05. We had discovered 27 functionally important mutations. Network and pathway analyses gave us clues that NPM1, GATA2, and CEBPA were major driver genes. By comparing with previous somatic mutation profiles, we had concluded that the provided data originated from acute myeloid leukemia. Protein structure modeling showed that somatic mutations in IDH2, RASGEF1B, and MSH4 can affect protein structures.
Evidence from recent studies in several laboratories indicates a relationship between type or level of fat in the diet and occurance of tumor at specific sites. The essential fatty acids in fat and degree of their unsaturation are important to determine the influence of a dietary fats on carcinogenesis. Alteration of dietary fat can also change carcinogenesis of cell in several tissues. Dietary fats appear to be important in both initiation and promotion stages of carcinogenesis. Several possible mechanisms have been investigated how dietary fat could affect to carcinogenesis at cellular level. One potential mechanism of dietary fat on carcinogenesis is through modulation of protein kinase C activity in the cell.
Yeom, Su-Cheong;Koo, Ok Jae;Park, Chung-Gyu;Lee, Byeong-Chun;Lee, Wang-Jae
Reproductive and Developmental Biology
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제37권1호
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pp.1-8
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2013
In order to investigate genetic stability and gene expression profile after cloning procedure, two groups of cloned pigs were used for swine leukocyte antigen (SLA) gene nucleotide alteration and microarray analyses. Each group was consist of cloned pigs derived from same cell line (n=3 and 4, respectively). Six SLA loci were analyzed for cDNA sequences and protein translations. In total, 16 SLA alleles were identified and there were no evidence of SLA nucleotide alteration. All SLA sequences and protein translations were identical among the each pig in the same group. On the other hand, microarray assay was performed for profiling gene expression of the cloned pigs. In total, 43,603 genes were analyzed and 2,150~4,300 reliably hybridized spots on the each chip were selected for further analysis. Even though the cloned pigs in the same group had identical genetic background, 18.6~47.3% of analyzed genes were differentially expressed in between each cloned pigs. Furthermore, on gene clustering analysis, some cloned pigs showed abnormal physiological phenotypes such as inflammation, cancer or cardiomyopathy. We assumed that individual environmental adaption, sociality and rank in the pen might have induced these different phenotypes. In conclusion, the results of the present study indicate that SLA locus genes appear to be stable following SCNT. However, gene expressions and phenotypes between cloned pigs derived from the same cell line were not identical even under the same rearing conditions.
Fish muscles are classified into white and red muscles, and the chemical composition of the two fish muscles have many differences. Few reports have assessed the health-promoting functions of white fish muscle proteins (WFP) and red fish muscle proteins (RFP). We therefore evaluated the mechanisms underlying the alteration of lipid profiles and cholesterol metabolism following the intake of WFP prepared from cod and RFP prepared from light muscles of tuna. Male Wistar rats were divided into six dietary groups: casein (23%), WFP (23%), and RFP (23%), with or without 0.5% cholesterol and 0.1% sodium cholate. Compared to the WFP-containing diet, the RFP-containing diet supplemented with cholesterol and sodium cholate significantly increased serum and liver cholesterol contents. However, in the RFP groups, an alteration in cholesterol metabolism including an increased tendency to excrete fecal sterols and hepatic cholesterol $7{\alpha}$-hydroxylase was related to the reduction of hepatic cholesterol contents. This phenomenon might be related to the tendency of an increased food intake in RFP-containing diets. These results highlight the differential effects of WFP and RFP on serum and liver lipid profiles of Wistar rats fed non-cholesterol- or cholesterol-containing diets under no fasting condition.
Previous studies have shown that transforming growth factor beta ($TGF-{\beta}$) is a potent regulator of cell growth and differentiation. To study the effects of $TGF-{\beta}$ on cell morphology and cytoskeleton reorganization, we conducted a survey using Mv1Lu mink lung epithelial cells with antibodies to cytoskeletal proteins and an extracellular matrix protein. While the untreated cells showed a cuboidal shape of typical epithelia, the Mv1Lu cells displayed a drastic shape change in the presence of $TGF-{\beta}$. This alteration was most prominent when near-confluent cells were treated with $TGF-{\beta}$. Since the morphology alteration is known to be accompanied by the reorganization of cytoskeletal proteins in other cell types, we investigated the intracellular distribution of the three major cytoskeletal structures: microfilaments, microtubules, and intermediate filaments. In the microfilament system, $TGF-{\beta}$ induced new stress fiber formation, which was caused primarily by the polymerization of cytoplasmic G-actin. However, $TGF-{\beta}$ appeared not to induce any significant changes in microtubular structures and vimentin filaments as determined by indirect fluorescence microscopy. Finally we confirmed the rapid accumulation of fibronectin by immunoblot analysis and chased the protein locations by immunofluorescence microscopy.
The present study was undertaken to determine the effect of tensile force on DNA and protein biosynthesis in bone cells, and to identify the cell type(s) which primarily respond to external physical force among the heterogenous bone cell populations. As a prerequisite for this study, two bone cell populations which retain fibroblastic and osteoblastic feature were isolated from fetal rat calvaria with sequential enzyme digestion scheme. Tensile force was delivered to each bone cell population by two acrylic resin plates connected with a orthodontic expansion screw during culture period. Rate of DNA and protein synthesis in each bone cell population were assessed by the incorporated radioactivity of $[^3H]-thymidine$ into DNA and $[^3H]-proline$ into fraction of collagenase-digestible protein and noncollagenous protein, respectively. DNA synthesis of osteoblast-like calvarial cell populations was increased significantly by the application of tensile force for 24 hours. In contrast, no alteration in DNA synthesis of fibroblast-like populations could be observed in response to applied force. Tensile force induced the change in protein synthesis of bone cell populations with the same pattern. Total protein and collagen synthesis were increased whithin 24 hours in osteoblast-like populations, but not in fibroblast-like populations by tensile force application. These findings indicate that physical force can affect cellullar activity of the particular cell population, not all cell Populations residing in bone and osteoblasts respond more sensitively than fibroblasts. So osteoblasts can modulate the behavior of other bone cells including osteoclasts by producing several local regulating factors of bone metabolism. In this context, preferential responsiveness of osteoblasts to applied tensile force observed in this study suggests that osteoblasts may play an important role in regulation of physical force-induced remodelling process.
Min, Cheol Woo;Gupta, Ravi;Truong, Nguyen Van;Bae, Jin Woo;Ko, Jong Min;Lee, Byong Won;Kim, Sun Tae
Journal of Plant Biotechnology
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제47권3호
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pp.209-217
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2020
The presence of high amounts of seed storage proteins (SSPs) improves the overall quality of soybean seeds. However, these SSPs pose a major limitation due to their high abundance in soybean seeds. Although various technical advancements including mass-spectrometry and bioinformatics resources were reported, only limited information has been derived to date on soybean seeds at proteome level. Here, we applied a tandem mass tags (TMT)-based quantitative proteomic analysis to identify the significantly modulated proteins in the seeds of two soybean cultivars showing varying protein contents. This approach led to the identification of 5,678 proteins of which 13 and 1,133 proteins showed significant changes in Daewon (low-protein content cultivar) and Saedanbaek (high-protein content cultivar) respectively. Functional annotation revealed that proteins with increased abundance in Saedanbaek were mainly associated with the amino acid and protein metabolism involved in protein synthesis, folding, targeting, and degradation. Taken together, the results presented here provide a pipeline for soybean seed proteome analysis and contribute a better understanding of proteomic changes that may lead to alteration in the protein contents in soybean seeds.
Sixteen crossbred (Bos indicus${\times}$Bos taurus) calves were randomly distributed in two groups (NP and LP) of eight calves each to study the effect of restricted (75%) protein supply on growth and immuno-biochemical response as an indicator of production and health of under-nourished animals during 3 to 9 months of age. The normal requirement of protein was provided to group NP and a less of 25% to group LP through calculated amount of concentrate and roughage in their daily ration. Assessment was made for weekly change in live weight, periodic alteration in blood metabolites and immunological status at six months of age in calves. An initial (during 3 to 6 months of age) depression (p<0.05) in growth was seen in low protein fed group (LP) compared to NP, which became non-significant in the later period of life (6 to 9 months of age). There was no significant effect on haemoglobin, total protein, albumin and globulin concentration except that of urea, which was decreased significantly (p<0.05) in animals fed on low protein diet ($19.83{\pm}1.25$ vs $25.93{\pm}1.29mg/dl$). The treatment effect that was seen in different periods of life was not uniform for other parameters except for urea, which showed a regular depression in LP compared to NP. The assessment of immunological status by indirect haemagglutination (IHA) test against Pasteurella multocida (P52 strain) was considerably (p<0.05) reduced in animals on LP ration compared to those on NP. It is thus argued that with poor nutrition (low protein) and state of compromised immunological response the production and health of the animals will be adversely affected.
대두식품의 가공 및 발효에 따른 phytate 함량의 변화, 그 함량이 pepsin과 pancreatin에 의한 단백질 소화에 미치는 영향, 그리고 전기영동법에 의한 단백질 분획의 변화를 조사하였다. 황색콩의 phytate 함량은 2.4%이었고 가공 및 발효에 따라 감소하여 두유 0.2%, 두부 0.7%, 비지 0.4%로, 청국장 0.9%, 메주 1.4%, 간장 0.2%, 된장 1.0%로 나타났다. Phytate/protein 비율은 pepsin에 의한 단백질 소화율과 상관성이 없었으나 pancreatin에 의한 단백질 소화율과는 부(負)의 상관관계를 나타냈다(p<0.01, r= -0.73). 전기영동 결과 콩을 물에 불리면 수용성 분획이 변화되었고 두유 제조시 비지에는 주로 저분자량 밴드들이 새로이 나타났다. 발효 과정에서는 단백질이 분해되어 밴드가 거의 나타나지 않았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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