• 제목/요약/키워드: Protein­polysaccharide

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톱밥배양한 버들송이의 균사체로부터 단백다당류의 분리 및 정제 (Isolation and purification of protein-bound polysaccharides from the sawdust mycelia of Agrocybe cylindracea)

  • 하효철;박신;박경숙;이춘우;정인창;김선희;권용일;이재성
    • 한국균학회지
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    • 제23권2호통권73호
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    • pp.121-128
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    • 1995
  • Agrocybe cylindracea의 톱밥배양 균사체로부터 항암효과가 있는 것으로 알려진 단백다당류를 분리, 정제하였으며 그 특성을 조사하였다. Agrocybe cylindracea 균사체로부터 열수추출한 조단백다당류(Fr.CB)의 수율은 ethanol 농도가 95%일 때 2.974 g으로서 원재료인 톱밥균사체를 기준으로 0.74%였다. 이 조단백다당류(Fr.CB)를 박막여과, ion exchange chromatography, 그리고 gel filtration에 의해 정제하였다. 조단백다당류 Fr.CB를 박막여과하여 분획한 결과 분자량 30만 이상의 분획(Fr.B)이 38.6%를 차지하여 고분자 단백다당류가 주성분임을 알 수 있었다. Fr.B를 ion exchange chromatography로 분리한 결과 2개의 분획이 17.4%(Fr.B-1), 10.3%(Fr.B-2)의 수율로 얻어졌다. 이들 분획을 농축한 다음 gel filtration한 결과 거의 순수한 단일 단백다당류의 peak를 얻을 수 있었다. Fr.B-1을 분리하여 얻은 $Fr.B-1-{\beta}$ 분획의 수율은 Fr.B-1을 기준으로 42.5%였다. 항암효과의 가능성이 가장 높은 것으로 판단되는 최종 정제된 분획인 $Fr.B-1-{\beta}$의 분자량은 710 KDa 부근이었으며 단당류의 조성을 HPLC로 분석한 결과, glucose가 주성분이었고 그외 fucose, galactose도 검출되었다. 또한 아미노산 조성을 분석한 결과 glutamic acid, alanine이 비교적 많이 검출되었고 cysteine은 검출되지 않았다.

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고사리 단백다당(Pteridium aquilinum Glycoprotein, PAG)이 마우스 면역활성에 미치는 영향 (Effects of the Glycoprotein Isolated from Pteridium aquilinum on the Immune Function of Mice)

  • 박현애;권미향;한형미;성하진;양한철
    • 한국식품과학회지
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    • 제30권4호
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    • pp.976-982
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    • 1998
  • 고사리 수추출물에서 분리된 단백다당획분(Pteridium aquilinum glycoprotein, PAG)이 마우스 면역계에 미치는 영향을 알아보기 위하여 BALB/C 마우스의 복강내에 14일간 반복 투여한 후 마우스의 체중 및 면역장기의 무게변화를 관찰하면서 마우스 항체생성능과 비장세포 증식능에 대하여 조사하였다. PAG를 용량별$(0{\sim}500{\;}{\mu}g/kg)$로 투여한 결과 마우스 체중변화와 면역장기에는 커다란 효과를 관찰할 수 없었으나, HEL에 대한 항체생성능에 있어서는 $500{\;}{\mu}g/kg$ 투여시 뚜렷한 증가를 보였다. 시험물질을 투여한 마우스로부터 비장세포를 분리하여 phytohemagglutinin (PHA) 혹은 lipopolysaccharide (LPS)에 대한 비장세포 증식능을 측정한 결과, PAG 투여군에 있어서는 PHA와 LPS유도 비장세포 증식능이 용량 의존적으로 증가되었음이 관찰되었다. 비장세포 증식능에 대한 in vitro 시험결과 LPS에 대한 반응증가는 단백다당획분(PAG)의 세포에 대한 직접적인 작용에 의하며, PHA에 대한 반응증가는 세포에 대한 직접적인 작용은 아님을 알 수 있었다. PAG의 항체생성능 증가에 기여하는 활성부위를 규명하기 위하여 periodate산화 및 pronase소화를 실시하여 얻어진 각각의 조단백, 조다당분들과 고사리 수추출물에서 정제된 정제다당획분이 항체생성능에 미치는 영향에 대하여 시험하였다. 시험결과 조다당투여군과 정제다당 투여군에서는 항체생성능 증가가 관찰되지 않았으나 periodate 산화물인 조단백 투여군에서 뚜렷한 항체생성능을 확인할 수 있었으며, 이와 같은 실험결과 PAG의 단백성분이 항체생성능 증가에 있어서 주요 활성 본체임을 알 수 있었다., 660 mmHg 및 560 mmHg 압력 중 560 mmHg의 감압 하에서 5회 반복 수세하는 것이었다. 분자구조 변형에 의한 것이라 사료된다./TEX>일 경에 점질물과 산패취가 발생하여 상품으로서의 가치를 상실하였고, $-20^{\circ}C$ 저장구는 저장 100일 까지 상품으로서 가치를 유지하였다.등의 네 가지 요인으로 나누어서 각각의 효과를 요인간으로 비교하면 한일 양국이 함께 가격의 효과가 가장 작다. 그러나 그 이외 요인별 효과의 상대적 중요성은 양국간에 다른데 한국은 소비지출의 효과가 출생연도나 연령 효과보다 크지만 일본은 경제적 요인인 소비지출보다 세대주의 출생연도나 연령 등의 비경제적 요인의 효과가 크다.가능한 전분으로, 완전한 결정성구조를 가진 전분이 아닌 것으로 사료된다.147.33 peak area%인 것과 유사(類似)하게 높았다.tarrow}6$보다 $4{\beta}{\rightarrow}8$의 결합방식이, 그리고 procyanidin 류에서는 gallate를 갖는 물질이 이를 함유하지 많은 물질보다 더욱 높은 ACE의 저해효과를 나타내었으며, 또한 hydroxyl 기가 많을수록 효소 저해효과도 증가하는 것으로 나타났다. 이와 같은 결과는 chocolate의 주원료인 cacao bean의 polyphenol 성분 또한 녹차 등에서 볼 수 있는 생리활성효과에 손색없는 것으로 판단되고, 이러한 기능성에 기초하여 chocolate, 음료 등의 식품이나 의약품의 기능성 소재로서의 산업적 응용 가능성이 높은 것으로 사료된다.대장균군이 역시 난각에서 가장 높은 빈도로 분리되었고, 난황(Yolk)에서는 극히 낮은 수준의 세균오염도를 보였다. 다양한 동물종유래 S. aureus 균주들의 유전학적 분석목적에 가장 신뢰도 높고 감별능력이

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천마 분획물이 고지방식이를 급여한 흰쥐의 혈청 지질농도에 미치는 영향 (Effect of Gastrodiae rhizoma Fractions on Serum Lipid Concentrations in Rats Fed with High Fat Diet)

  • 홍희도;김영찬;금인경;김성수;김경임;한찬규
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제48권4호
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    • pp.370-374
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    • 2005
  • 건강식품소재로서 천마의 효능과 활용방안을 모색하고자 고지방식이를 급여한 흰쥐에게 천마성분 분획물이 혈청 지질함량과 동맥경화유발지수 등에 미치는 영향을 조사하였다. 시험기간은 총 12주간으로 실험 1기는 초기 6주 동안 흰쥐사료에 유지를 첨가한 고지방식이(HFCD)를 급여하였고, 실험 2기는 6주 동안 천마성분 분획물을 함께 투여하였다. 천마성분 분획물로는 에탄올 가용성인 저분자분획(MW<1K, GR-1), 수용성 획분에 pronase처리한 다당체분획(GR-2), periodate를 이용한 다당체산화를 통하여 단백질분획(GR-3)을 조제하여 사용하였다. 시험 종료체중은 고지방대조군이 천마분획물군 보다 평균 44 g 정도 높았지만 통계적인 차이는 없었으며 증체량, 식이섭취량 및 식이효율(FER) 역시 유의적인 차이가 없었다. 실험 2기 종료후 측정한 혈청 지질중 TC와 TG농도는 다당체 분획을 투여한 경우에 고지방대조군에 비해 각각 21.5, 39.6% 낮았다. HDL콜레스테롤은 단백질분획이 저분자분획과 다당체분획 보다 높았고, LDL콜레스테롤은 천마분획물 투여군에서 고지방대조군 보다 유의하게 낮았다. 동맥경화위험지수는 단백질분획이 1.45로 다른 천마성분 분획물들의 $1.94{\sim}2.05$, 대조군의 2.12에 비해 가장 낮았다. 따라서 천마 다당체 또는 단백질분획 같은 수용성 고분자분획은 혈중 지질함량 및 조성을 개선시킬 수 있는 기능성 식품소재로 활용될 수 있을 것으로 사료된다.

고전압 펄스 전기장 기술을 이용한 차가버섯 추출물의 피부 효능 증대 방법 (New Approaches to Increase Skin Efficacy of Chaga Mushroom Extract using High Voltage P ulsed Electric Fields Technology)

  • 성미경;강정욱;정윤주;김봉준;조항의;조현대
    • 대한화장품학회지
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    • 제46권3호
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    • pp.231-241
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    • 2020
  • 본 연구에서는 고전압 펄스 전기장 기술을 사용하여 식물 내 유효성분과 피부 효능을 증대시키고자 하였다. 고전압 펄스 전기장을 전처리한 차가 버섯(Inonotus obliquus) 추출물을 제조한 후, 성분 측정과 피부 효능 평가를 수행하였다. 총 당과 폴리페놀 함량은 0.5 kV/cm에서 50 Hz, 25 Hz 전처리 추출물 순으로, 총 단백질 함량은 0.5 kV/cm, 25 Hz 전처리 추출물에서 상온 물 추출물과 에탄올 추출물보다 높게 측정되었다. DPPH 소거능 효과는 폴리페놀 함량 결과와 유사하게 0.5 kV/cm에서 25 Hz, 50 Hz의 전처리 추출물에서 가장 우수하였다. 피부 효능에서는 단백질 함량이 가장 높은 0.5 kV/cm, 25 Hz 전처리 추출물에서 sodium dodecyl sulfate (SDS)와 UVB에 대한 세포 보호효과가 가장 우수하였으며, 0.5k V/cm에서 50 Hz, 100 Hz 전처리 추출물에서 히알루론산 생성 촉진이 가장 우수하였다. 따라서 고전압 펄스 전기장 전처리 차가 추출물의 유효성분, 피부 효능이 증대하는 것을 확인하여 세포 보호 및 보습 효과가 있는 기능성 소재로의 개발이 가능하며, 이러한 green technology가 화장품 분야와 소재개발에 다양하게 활용될 수 있을 것으로 기대된다.

막걸리에서 분리한 다당의 면역자극 활성에 미치는 효과 (Immunomodulatory Activity of Crude Polysaccharides from Makgeolli)

  • 조장원;이영경;이영철;김영찬;신광순;남소현;홍희도
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제43권2호
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    • pp.238-242
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    • 2014
  • 본 연구에서는 막걸리로부터 다당을 분리하여 자연면역계를 구성하고 있는 보체계 및 macrophage에 대한 면역자극활성을 측정하였다. 열수추출한 뒤 ethanol 침전을 통하여 조다당을 추출한 후 특성을 검토한 결과, 막걸리 조 다당체(RWW)의 neutral sugar 함량은 87.3%, uronic acid 함량은 2.5%, protein 함량은 10.2%이었다. RWW는 인체 초기 면역반응에 있어 중요한 역할을 담당하는 보체계에 대한 활성을 나타냈으며, 마우스 RAW 264.7 macrophage에서 세포증식 및 면역유도 cytokine 분비활성을 나타내었다. RWW를 1, 10, $100{\mu}g/mL$ 농도로 macrophage에 처리하여 면역자극을 유도한 결과 모든 처리 농도에서 IL-6, IL-12, TNF-${\alpha}$의 분비가 증가되었다. 이상의 결과를 종합해 볼 때, 막걸리 유래 다당체는 자연면역계를 구성하고 있는 보체계와 macrophage의 활성인자로 작용할 수 있음이 확인되었고, RWW를 통해 cytokine 분비를 유도, 조절함으로써 체내 면역기능을 증강시킬 가능성이 있을 것으로 사료되었다.

소목으로부터 분리된 Brazilin이 Streptococcus mutans ATCC 25175의 생장에 미치는 효과 (Effect of Brazilin from Caesalpinia sappan L. on the Growth of Streptococcus mutans ATCC 25175)

  • 권현정;한만덕
    • 치위생과학회지
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    • 제12권3호
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    • pp.209-215
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    • 2012
  • 본 연구는 소목(C. sappan L.)으로부터 분리된 Brazilin이 S. mutans의 생장 및 배양 환경 에 미치는 영향을 측정하고 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. Methanol에 의해 분리된 소목의 수율은 총 4.8%로 나타났으며, 여러 분획물 가운데 brazilin이 포함된 에틸아세테이트(EtOAc) 분획물에서 3.94%로 가장 높은 수율을 보였다. 2. 소목으로부터 분리된 brazilin의 S. mutans 생장에 대한 효과는 대조군이 24시간에서 0.816으로 최대 생장률을 보였으나, brazilin (0.3 mg/ml, 1 mg/ml, 3 mg/ml)을 투여한 배지는 32시간 만에 최대생장을 보였다. 3. S. mutans를 16시간 동안 배양한 후 배지 내 pH를 측정한 결과 대조군은 5.25이었으며, brazilin (0.3 mg/ml, 1mg/ml, 3 mg/ml)을 투여한 배지는 각각 pH 7.00, pH 7.01, pH 6.98로 유지하여 산 생성을 억제하였다. 4. S. mutans를 48시간 동안 배양한 후 배지 내 탄수화물 변화량을 측정한 결과 대조군보다 소목의 brazilin이 투여된 배지의 탄수화물의 소모량이 적었다. 5. S. mutans를 24 시간 동안 배양한 후 배지 내 단백질 변화량을 측정한 결과, 최대 생장량을 보인 24 시간에서 대조군은 2.46 mg/ml 이었으며, 소목의 brazilin이 투여된 배지는 2.54 mg/ml 이었다. 6. S. mutans의 다당류 생성에 미치는 효과는 대조군의 경우 배양 8 시간에 300 mg/100 ml을 생성하였으나, 소목의 brazilin이 투여된 배지에서는 200 mg/100 ml을 생성하였다. 이상의 결과를 볼 때, 소목의 EtOAc 분획에 존재하는 brazilin은 배지 내 S. mutans 균주의 생육을 억제하는 효과가 있어, 향후 구강 내 우식원성 세균의 억제물질로 활용을 제시한다.

흑효모배양액 분말의 면역관련 사이토카인에 미치는 영향에 대한 무작위 배정 임상연구 (A 4 week Randomized, Double-blind Human Trial to Compare the Efficacy and Safety of Aureobasidium pullulans Cultured Solution and Placebo on Improvement of Immune in Subjects)

  • 최해윤;김종대;박미연
    • 한국한의학연구원논문집
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    • 제15권3호
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    • pp.83-91
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    • 2009
  • $\beta$-glucan is a fiber-type complex sugar (polysaccharide) derived from the cell wall of baker's yeast, oat and barley fiber, and many medicinal mushrooms, such as maitake. The primary uses of $\beta$-glucan are to enhance the immune system, to lower blood cholesterol levels and to treat tumor. $\beta$-glucan has no systemic toxicity in mice, therefore it needed clinical trail to prove efficacy and safety for human. The subjects total 56 healty volunteers were divided into two groups including taken $\beta$-glucan tablet group and placebo group. Subjects were taken two tablets per oral for 4 weeks. They had agreed to take part in this experiment, and didn't take any other clinical trail products. After 4 weeks blood of subjects were checked. The check list are TNF-$\alpha$, INF-$\gamma$, IL-2, IL-4, total WBC, differential WBC, RBC, hemoglobin, platelet, MCV, MCH, MCHC, HCT, Na, K, Ca, Cl, AST, ALT, ALP, $\gamma$-GTP, total protein, triglyceride, total cholesterol, total bilirubin, albumin, uric acid, creatinine, BUN, pH, protein, glucose, ketone body, blood, bilirubin. We evaluated efficacy by cytokines that compare before and after taking. Collected data were analyzed as two sample t-test, chi-square test and ANOVA using SAS V.9.1.This study results are that in TNF-$\alpha$ of $1^{st}$ efficacy measurement item, all of two groups figure were increased significantly compare to before figure. In IL4 of $2^{nd}$ efficacy measurement item, experimental group figure were decreased significantly but placebo group figure were increased. The conclusions show that based on the above results, $\beta$-glucan has favorable effect to enhance immune system, especially IL4 results showed that it has effect to improve the allergic immune system.

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LPS로 자극한 돼지 말초혈액 단핵구세포의 Nitric Oxide (NO) 생산 및 Activator Protein-1 (AP-1) 활성화에 있어 Fucoidan의 효과 (Effects of Fucoidan on Nitric Oxide Production and Activator Protein-1 Activation in Lipopolysaccharide-Stimulated Porcine Peripheral Blood Mononuclear Cells)

  • 박종찬;안창환;강병택;강지훈;정의배;양만표
    • 한국임상수의학회지
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    • 제32권4호
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    • pp.289-294
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    • 2015
  • Fucoidan은 갈조류로부터 추출되는 황산다당류로 다양한 생리학적 활성을 갖고 있다. 본 연구의 목적은 LPS로 자극한 돼지 말초혈액 단핵구세포(PBMCs)의 NO 생산에 있어 fucoidan의 효과를 검토하고, 이러한 효과가 iNOS의 발현과 AP-1의 활성화와 관련이 있는지를 조사하는데 있다. LPS 무처치 돼지 PBMCs에서 fucoidand의 처리는 NO 생산과 AP-1활성에 대해 효과를 보이지 않았다. 또한 iNOS와 AP-1의 mRNA 발현도 fucoidan 처치에 의해 영향을 받지 않았다. 그러나 LPS로 자극한 PBMCs에서는 NO 생산과 AP-1의 활성 그리고 iNOS와 AP-1의 mRNA 발현이 현저하게 증가하였다. 이와 같은 LPS에 의한 돼지 PBMCs의 NO 생산과 AP-1 활성증가는 fucoidan 첨가에 의해 감소되었다. 또한 fucoidan은 LPS에 의한 iNOS와 AP-1의 mRNA 발현증가도 억제시켰다. 이상의 결과는 fucoidan이 LPS 자극 돼지 PBMCs에서 iNOS 발현과 AP-1 활성의 억제와 함께 NO 생산을 하향 조절함으로써 항염증효과를 나타내는 것으로 사료되었다.

후코이단의 3T3-L1 지방세포에서 PI3K/AMPK 경로를 통한 포도당 흡수 촉진 및 인슐린 민감성 증진 효과 (Fucoidan Stimulates Glucose Uptake via the PI3K/AMPK Pathway and Increases Insulin Sensitivity in 3T3-L1 Adipocytes)

  • 이지희;박재은;한지숙
    • 생명과학회지
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    • 제31권1호
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    • pp.1-9
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    • 2021
  • 본 연구는 갈조류 유래 물질인 후코이단이 인슐린 민감성을 증진시키는지를 규명하기 위하여 3T3-L1 지방세포에서 포도당 흡수에 미치는 후코이단의 영향을 측정하고 그 작용기전을 조사하였다. 후코이단은 지방세포에서 포도당 흡수를 유의하게 증가시켰으며 이는 PM-GLUT4의 발현 증가와 관련이 있음을 관찰하였다. 후코이단은 인슐린 신호전달 경로에서 PI3K의 활성화 및 pIRS1tyr, Akt, PKCλ/ζ의 인산화를 대조군에 비해 유의하게 증가시켰다. 또한, AMPK의 활성화를 나타내는 pAMPK 수준이 유의하게 증가하였다. 이들 PI3K 및 AMPK 활성화는 포도당 수송체인 GLUT4를 세포막으로 이동시켰으며 이로 인하여 PM-GLUT4의 발현이 증가되고 포도당 흡수가 촉진되었다. 후코이단에 의한 PI3K 및 AMPK 경로의 활성화를 증명하기 위해, PI3K 억제제인 Wortmannin과 AMPK의 억제제인 Compound C를 사용하여 이들 처리에 의한 포도당 흡수능과 PM-GLUT4의 발현을 측정한 결과 이들의 발현이 유의하게 저해되었다. 따라서 후코이단은 3T3-L1 지방세포에서 PI3K 및 AMPK 경로를 활성화시킴으로써 인슐린 민감성을 증진하고 포도당 흡수를 촉진시킬 수 있음을 나타내었다.

귤피로부터 분리한 마우스의 장관면역 활성 다당류의 검색 (Isolation of Polysaccharides Modulating Mouse’s Intestinal Immune System from Peels of Citrus unshiu)

  • 양현석;유광원;최양문
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제33권9호
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    • pp.1476-1485
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    • 2004
  • 90여종의 전통차 및 죽류용 식물로부터 조제된 다양한 용매추출물 중에서, 귤피(peels of C. unshiu)의 냉수추출물 (CUI-0)이 Peyer’s patch를 매개로 한 가장 높은 장관면역 활성을 나타내었으며 다시마(L. japonica), 둥글레(P. japonicum), 탱자(P. trifoliata)의 냉수추출물과 구기자(L. chinense) 및 치자(G. jasminoides)의 열수추출물을 제외한 나머지 식물의 용매추출물은 거의 활성을 가지지 못하였다. CUI-0는 MeOH-가용성 획분(CUI-1), MeOH-불가용성이면서 EtOH-가용성 획분(CUI-2)과 조다당 획분(CUI-3)으로 분획되었다. 이러한 획분들 중 CUI-3은 Peyer’s patch 세포를 매개로 하는 골수세포 증식의 자극활성이 가장 높았으며 arabinose, galacturonic acid, galactose, glucose, glucuronic acid와 rhmanose(molar ratio; 1.00:0.53:0.45:0.28:0.28:0.19) 등을 주요 구성당으로 함유하고 있었으며 소량의 단백질(9.4%)도 구성물질로 포함된 활성 획분임이 밝혀졌다. CUI-3의 장관면역 활성은 pronase 및 periodate 처리에 의해 감소되었으며 특히 periodate 산화는 CUI-3의 활성에 심각한 영향을 끼치는 것을 알 수 있었다. 활성 획분으로서 당 함량이 높은 CUI-3IIb-3-2는 DEAE-Sepharose FF, Sepharose CL-6B 및 Sephacryl S-200에 의해 귤피 냉수추출물의 조다당 획분으로부터 정제되었으며 HPLC에 의해 분자량 약 18,000 Da의 단일 peak임을 확인하였다. CUI-3IIb-3-2는 주로 arabinose, galactose, rhamnose, galacturonic acid와 glucuronic acid(molar ratio; 1.00:0.54:0.28:1.45:0.63) 등의 구성당으로 구성되어져 있었으며 소량의 단백질(3.2%)이 함유되어진 물질로 구성되어 있었다. 한편 CUI- 3IIb-3-2는 Peyer’s patch를 경유하였을 때만 골수세포 증식활성을 나타내었으며 활성물질 자체가 직접 골수세포 증식활성에 관여하지는 않는것으로 확인되었다. 이러한 결과로부터 귤피의 장관면역 활성은 측쇄에 arabinose와 galactose 등의 중성당이 결합된 polygalacturonan 구조를 갖는 펙틴계통의 다당류에 기인하고 있음을 보여주었다.