Abdo Elgabbar, Mohammed A.;Jun, Sang-Cheol;Kim, Jong-Hwa;Jahng, Kwang-Yeop;Han, Dong Min;Han, Kap-Hoon
한국균학회소식:학술대회논문집
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2015.11a
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pp.28-28
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2015
Asexual reproduction or conidiation in aspergilli is a primary mean to produce their progenies that is environmentally and genetically controlled tightly. Previously, intensive researches in the model fungus Aspergillus nidulans disclosed some genes playing important roles in asexual and sexual development. Among them, one gene encoding a putative helix-loop-helix (HLH) transcription factor, named ndrA, has been isolated and characterized as a downstream regulator of developmental master regulator NsdD. By using comparative genome search of A. niduans NdrA protein, its orthologues have been identified in A. fumigatus and A. flavus, respectively (AfudrnA and AfldrnA). Deletion of the ndrA genes in both Aspergillus species made them unable to produce the conidia yet abundant production of sclerotia in A. flavus. Complementation of ndrA deletion strains by intact ndrA ORFs has restored the conidiation as in the control strains. In A. fumigatus, ndrA deletion also resulted in loss of conidiation phenotype. Northern analyses showed that the ndrA genes in both Aspergillus species are highly expressed at the early stage of the conidiation. Interestingly, the ndrA genes were found to be necessary for the proper expression of brlA genes. Antifungal sensitivity test revealed that the ndrA genes might be responsible for the sensitivity or resistance to some antifungal agents. However, ndrA deletion did not greatly influence the growth in both strains. And the A. flavus ndrA gene did not affect the aflatoxin production. Taken together, ndrA genes in Aspergillus species could be an important positive regulator of conidiation under the regulation of the nsdD gene yet upstream of the brlA gene.
Kim, Byung-Sup;Park, Eun-Woo;Roh, Seong-Hwan;Cho, Kwang-Yun
The Korean Journal of Mycology
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v.25
no.4
s.83
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pp.320-329
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1997
Botrytis cinerea isolates obtained from infected plants of cucumber, tomato, and strawberry were divided into three groups (sporing, sclerotial, and mycelial types). Of which sclerotial types were the major group. There were no correlations between morphological phenotypes and responses to benzimidazole and dicarboximide fungicides. External structure of conidia of three phenotypes by scanning electron microscope was the same with verrucose surface. Mycelial type was the most virulent on fruits of eggplants. Comparative tests were carried out to examine correlations between the virulence and production of fungal enzymes such as phenol oxidases, pectin methyl esterases (PME), amylases, cellulases, ureases, ${\beta}-glucosidases$, and proteinases. There was no correlation among the phenotypes in production of phenol oxidases and ${\beta}-glucosidases$. However, there were significantly different from each other in PME, amylase, cellulase, urease, and protease activity.
Interspecific hybrids between Aspergillus oryzae var. oryzae and Penicillium chrysogenum (Tyr$\^$-/), high alkaline protease producing fungi, were obtained by nuclear transfer technique. Nuclei isolated from the wild type Aspergillus oryzae var. oryzae strain were transferred into auxotrophic Penicillium chrysogenum mutants and selected the new strains showing an increased protein degrading capability. Maximum production of protoplasts were obtained by 1% Novozym 234 at $30^{\circ}C$ for 3 hours and the most effective osmotic stabilizers for the isolation of protoplasts were 0.6M KCl. Frequencies of hybrid formation by nuclear transfer were 1.3${\times}$10$\^$-3/∼2.8${\times}$10$\^$-3/. They could be suggested as an aneuploid by the observation of genetic stability, conidial size, DNA content, and nuclear strain. The hybrids showed 1.1~2.2 fold higher alkaline pretense activities than parental strains.
Jo, Youn Sook;Park, Hye Bin;Kim, Ji Yun;Choi, Seong Min;Lee, Da Sol;Kim, Do Hoon;Lee, Young Hee;Park, Chang-Jin;Jeun, Yong-Chull;Hong, Jeum Kyu
The Plant Pathology Journal
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v.36
no.4
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pp.335-345
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2020
Tomato grey mould has been one of the destructive fungal diseases during tomato production. Ten mM of menadione sodium bisulfite (MSB) was applied to tomato plants for eco-friendly control of the grey mould. MSB-reduced tomato grey mould in the 3rd true leaves was prolonged at least 7 days prior to the fungal inoculation of two inoculum densities (2 × 104 and 2 × 105 conidia/ml) of Botrytis cinerea. Protection efficacy was significantly higher in the leaves inoculated with the lower disease pressure of conidial suspension compared to the higher one. MSB-pretreatment was not effective to arrest oxalic acid-triggered necrosis on tomato leaves. Plant cell death and hydrogen peroxide accumulation were restricted in necrotic lesions of the B. cinereainoculated leaves by the MSB-pretreatment. Decreased conidia number and germ-tube elongation of B. cinerea were found at 10 h, and mycelial growth was also impeded at 24 h on the MSB-pretreated leaves. MSB-mediated disease suppressions were found in cotyledons and different positions (1st to 5th) of true leaves inoculated with the lower conidial suspension, but only 1st to 3rd true leaves showed decreases in lesion sizes by the higher inoculum density. Increasing MSB-pretreatment times more efficiently decreased the lesion size by the higher disease pressure. MSB led to inducible expressions of defence-related genes SlPR1a, SlPR1b, SlPIN2, SlACO1, SlChi3, and SlChi9 in tomato leaves prior to B. cinerea infection. These results suggest that MSB pretreatment can be a promising alternative to chemical fungicides for environment-friendly management of tomato grey mould.
Lee, Se Jin;Shin, Tae Young;Kim, Jong-Cheol;Kim, Jae Su
Korean journal of applied entomology
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v.61
no.1
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pp.197-210
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2022
Entomopathogenic fungi can be used to control a variety of sucking and chewing insects, with little effect on beneficial insects and natural enemies. Approximately 170 entomopathogenic fungal insecticides have been registered and used worldwide, with the recent focus being on the mode of action and mechanism of insect-fungal interactions. During the initial period of research and development, the industrialization of entomopathogenic fungi focused on the selection of strains with high virulence. However, improvement in productivity, including securing resistance to environmental stressors, is a major issue that needs to be solved. Although conidia are the primary application propagules, efforts are being made to overcome the limitations of blastospores to improve the economic feasibility of the production procedure. Fungal transformation is also being conducted to enhance insecticidal activity, and molecular biology is being used to investigate functions of various genes. In the fungi-based pest management market, global companies are setting up cooperative platforms with specialized biological companies in the form of M&As or partnerships with the aim of implementing a tank-mix strategy by combining chemical pesticides and entomopathogenic fungi. In this regard, understanding insect ecology in the field helps in providing more effective fungal applications in pest management, which can be used complementary to chemicals. In the future, when fungal applications are combined with digital farming technology, above-ground applications to control leaf-dwelling pests will be more effective. Therefore, for practical industrialization, it is necessary to secure clear research data on intellectual property rights.
An entomopathogenic fungus was isolated from the two-spotted spider mite (Tetranychus urticae) in a rearing house, and identified as Neozygites floridana (Entomophthorales: Neozygitaceae). A high infection rate induced by N. floridana could increase the price of the natural enemy. The body color of mites infected by this fungus changed to red or orange and swelling occurred. Fungal conidia were discharged into the webbing produced by the spider mites, making it relatively easy to infect the mites. Primary conidia were pear shaped and capilliconidia almond shaped. The fungus could not be cultured on solid media (PDA, SDAY, or EYSDA), but could possibly be cultured in liquid media (Grace's insect tissue culture medium + 5% fetal bovine serum). Kidney beans were supplied as food for T. urticae; the mite infection rate in a kidney bean canopy was about 36.1%. The density of infected mites was higher on the underside than on the upper side of leaves. Based on the results of this survey, we need to identify methods of fungal control for natural enemy production and biological control agents for T. urticae for effective crop management.
Seedlot disinfection techniques to control mung bean sprout rot caused by Colletoricum acutatum and C. gloeosporioides were evaluated for commercial production scheme. Soaking seedlots in propolis (100 X) and ethanol (20% for 30 min) appeared promising with control values of 85.5 and 80.8 respectively, but still resulted in up to 20% rot incidence. None of the C. acutatum conidia survived through hot water immersion treatment (HWT) for 10 min at temperatures of 55, 60 and $65^{\circ}C$, whereas the effective range of the dry heat treatment (DHT) was $60-65^{\circ}C$. Tolerance of mung bean seedlot, as estimated by hypocotyl elongation and root growth, was lower for HWT than for DHT. Germination and growth of sprouts were excellent over the range of $55-65^{\circ}C\;at\;5^{\circ}C$ intervals, except for HWT at $65^{\circ}C$ for 5 min. At this marginal condition, heat damage appeared so that approximately 2% of seeds failed to sprout to normal germling and retarded sprouts were less than 5% with coarse wrinkled hypocotyls. These results suggested that DHT would be more feasible to disinfect mung bean seedlots for commercial sprout production. Heat treatment at above ranges was highly effective in eliminating the epiphytic bacterial strains associated with marketed sprout rot samples. HWT of seedlot at 55 and $60^{\circ}C$ for 5 min resulted in successful control of mung bean sprout rot incidence with marketable sprout quality. DHT at 60 and $65^{\circ}C$ for 30 min also gave good results through the small-scale sprouting system. Therefore, we optimized DHT scheme at 60 and $65^{\circ}C$ for 30 min, considering the practical value of seedlot disinfection with high precision and accuracy. This was further proved to be a feasible and reliable method against anthracnose incidence and those bacterial strains associated with marketed sprout rot samples as well, through factory scale mung bean sprout production system.
To compare the morphological and cultural characteristics of Cordyceps militaris, forming conditions of artificial fruiting body production were investigated in this experiment. The stroma shapes of artificial fruiting body were confirmed to club and/or stick. However, both shapes were same color as a orange. Perithecia of stroma was semi-egg shape and was ranged from $30{\sim}90{\times}90{\sim}130\;{\mu}m$ and it's asci was narrowly cylindric. Ascospore of perithecia was belong to filiform and multiseptate. The conidia of C. militaris was centurally grown and shaped with globose, long clavate type, floccose, centrally raised during anamorph stage. When it was cultured between glass and PP bottle, production of artificial fruiting body, pinheading ratio and total yield were higher in PP bottle. The optimum illumination was 1,000 lx for the those production. The culture medium of barley, wheat and hulled rice showed higher artificial fruiting body compared to that of silkworm. Pinheading and yield of it's isolates was decreased at more than three subsequent transculture.
The study was carried out to find effects of the saponins that were extracted from red ginseng on the growth of, aflatoxins production by, and protein patterns of Aspergillus flavus NRRL 3357. A. flavus with $10^6$ conidia as grown at $30^{\circ}C$ for seven days on the enriched medium. Mycelial growth and pH changes of medium which cultured the mold, were similar to those of the control group. However, aflatoxin which produced by the mold was less than that of the control in all concentration of the saponin. To be more specific, 0.3 % of the saponin inhibited production of aflatoxin $B_1$ and $G_1$ to the extent of 31.6 and 21% of the control. The protein peaks of A. flavus at the fourth day of the culture were shown high intensity near the level of 14,300 daltons. However, the mold which cultured in the medium containing the saponin showed low intensity of protein than that of the control group on all molecular weight.
Species belonging to the genus Fusarium are widely distributed and cause diseases in many plants. Isolation of fungal strains from air or cereals is necessary for disease forecasting, disease diagnosis, and population genetics [1]. Previously we showed that Fusarium species are resistant to toxoflavin produced by the bacterial rice pathogen Burkholderia glumae while other fungal genera are sensitive to the toxin, resulting in the development of a selective medium for Fusarium species using toxoflavin [2]. In this study, we have tried to elucidate the resistant mechanism of F. graminearum against toxoflavin and interaction between the two pathogens in nature. To test whether B. glumae affects the development of F. graminearum, the wild-type F. graminearum strains were incubated with either the bacterial strain or supernatant of the bacterial culture. Both conditions increased the conidial production five times more than when the fungus was incubated alone. While co-incubation resulted in dramatic increase of conidial production, conidia germination delayed by either the bacterial strain or supernatant. These results suggest that certain factors produced by B. glumae induce conidial production and delay conidial germination in F. graminearum. To identify genes related to toxoflavin resistance in F. graminearum, we screened the transcriptional factor mutant library previously generated in F. graminearum [3] and identified one mutant that is sensitive to toxoflavin. We analyzed transcriptomes of the wild-type strain and the mutant strain under either absence or presence of toxoflavin through RNAseq. Expression level of total genes of 13,820 was measured by reads per kilobase per million mapped reads (RPKM). Under the criteria with more than two-fold changes, 1,440 genes were upregulated and 1,267 genes were down-regulated in wild-type strain than mutant strain in response to toxoflavin treatment. A comparison of gene expression profiling between the wild type and mutant through gene ontology analysis showed that genes related to metabolic process and oxidation-reduction process were highly enriched in the mutant strain. The data analyses will focus on elucidating the resistance mechanism of F. graminearum against toxoflavin and the interaction between the two pathogens in rice. Further evolutionary history will be traced through figuring out the gene function in populations and in other filamentous fungi.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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