매년 많은 식중독 사고가 보고되고 있는데, 특히 우리나라에서는 생선의 소비량이 많기 때문에 Salmonella 다음으로 Vibrio에 의한 식중독 사고가 높은 것으로 보고되고 있다. 이러한 세균성 식중독은 일반적으로 미생물이 숙주세포에 침입을 해야 하는데, 이를 위해 우선적으로 숙주세포 표면의 여러 단백질 층을 분해해야 한다. 이때 작용하는 단백질 분해효소가 병원성에 직ㆍ간접적으로 관여된다고 생각되고 있으며, 비브리오균이 생산하는 여러 가지 단백질 분해효소가 인간이나 어류의 병원성에 관여되어진다고 보고되고 있다. (중략)
Enzymes have been used as processing aids in the manufacture of food products to improve their quality, solubility and stability for centuries. About 50% of the enzymes used as industrial processing aids are protein hydrolases which have been used in a number of industrial application including laundry detergents, feed, leather treatment, silk degumming, cheese making, chill proofing, meat tenderzing, fermented sauces, and pharmaceuticals. (omitted)
Protein inhibitors are proteins or peptides capable of inhibiting catalytic activities of proteolytic enzymes. They are grouped primarily as either serine, cysteine, aspartic or metallto-proteinase inhibitors. Pretense inhibitors have been hewn since the end of the last century in nematodes and human blood serum, and their ubiquitous distribution in microorganisms, animals and plants has been widely documented. (omitted)
Steinernematidae와 Heterorhabditidae속에 속하는 7종의 곤충병원성 선충으로부터 매우 강한 살충성을 갖는 공생박테리아를 분리하여 그 종별 특성을 비교하였다. 분리된 공생박테리아의 종별 배양특성, 살충특성, 단백질 분해 효소의 활성 및 지방산 함량 등이 조사되었다. XR-PC 및 XR-MK의 성장 및 살충성이 가장 우수한 것으로 나타났으며 대수증식기 초기에 살충성이 가장 높은 반면에, 시간이 지남에 따라 살충성도 점차 감소되었다. 이 살충성은 protease 역가와 직접 관련이 없었으나 XR-DR의 경우 다른 종에 비해 배양 3일째 약 4.5배의 최대 활성을 보였다. 그러나 HE-HY의 경우 균체의 성장에 비례하여 protease 역가도 계속 증가하였다. 지방간 함량의 경우 특히 공생박테리아의 종별로 12:0, 14:0, 16:1 cia 5, 17:0 cyclo에서 지방산 함량의 차이를 크게 나타내었으며 hydroxy와 branch 지방산이 전체 지방간의 약 2-15%가지 변화하는 것으로 나타났다.
참치 가공 부산물로 부터 유용한 식량소재를 찾기위한 목적으로 상업용 단백질 분해효소를 이용하여 반응표면분석법에 의한 최적화한 조건에서 참치 가수 분해물을 제조한 결과를 요약하면 다음과 같다. 8종의 상업용 단백질 분해효소에서 가격에 대한 효소활성도와 관능검사 결과치로부터 Pretease P가 최적 효소로 선정되었으며, 참치 가공 부산물 가수분해 과정중 원료 자체의 가수분해효과는 없었다. 반응표면분석 결과 결정계수(0.9460) 및 적합결여검증(P>0.1)을 통해, 본 실험의 디자인이 만족하게 설계되었음을 알 수 있었고 일차식 및 이차식에서는 p<0.05% 수준에서 유의하였다. 다중회귀분석 및 능선분석 결과, 가수분해물 제조를 위한 최적 조건은 pH 7.2, 반응온도 $51^{\circ}C,$ 기질농도 33.3%, 기질에 대한 효소농도 0.48%에서 3.94시간 가수분해시 킬 때이며, 이때의 가수분해율은 64.88%였다.
V. parahaemolyticus를 균수로 alkaline protease 생산을 위한 배지의 초기 pH, 배양온도 그리고 배양시 진탕속도에 따른 영향을 조사하였다. 배지의 초기 pH에 따른 변화는 pH 7.6에서 60시간, 72시간 배양한 후에는8.lunit, 7.4unit로 활성이 가장 높게 나타났고, pH 7.0, 8.0 그리고 9.0에서는 활성이 크게 낫아졌으며, pH 6.0과 10.0에서는 활성이 전혀 나타나지 않았다. 배앙온도에 따른 변화를 보면 37$^{\circ}C$에서 60시간, 72시간 배양한 후에는 7.3unit, 6.9unit로. 활성이 가장 높게 나타났고, $25^{\circ}C$와 3$0^{\circ}C$에서 배양한 경우에는 2.5unit 전후로 활성이 크게 낮아졌으며, 45$^{\circ}C$에서는 활성이 거의 나타나지 않았다. 배양시 진탕속도에 따는 변화를 보면 250 rpm에서 60시간, 72시간 배양한 후에는 6.87unit, 6.9unit로 활성이 가장 높게 나타났고, 150rpm에서는 활성이 1.5unit 전후로 급격히 낮아졌으며 정치 배양한 경우에는 활성이 거의 나타나지 않았다.
The objective of this study was to determine the effect of nitrification inhibitor dicyandiamide (DCD) and urease inhibitor hydroquinone (HQ) on ammonia ($NH_3$) and nitrous oxide ($N_2O$) emission from pig slurry applied to Timothy (Phleum pretense L.) sward. The daily emission of ammonia ($NH_3$) and nitrous oxide ($N_2O$) was monitored for 9 days in three different treatments; 1) control (only pig slurry application), 2) DCD treatment (pig slurry + DCD), and 3) HQ treatment (pig slurry + HQ). Most $NH_3$ emission occurred after 4~5 days in three treatments. Total $NH_3$ emission, expressed as a cumulative amount throughout the measurement time, was $1.33kg\;N\;ha^{-1}$ in the control. The DCD and HQ treatment decreased total $NH_3$ emission by 16.3% and 25.1%, respectively, compared to the control. Total $N_2O$ emission in the control was $47.1g\;N\;ha^{-1}$. The DCD and HQ treatment resulted in a reduction of 67.9% and 41.8% in total $N_2O$ emission, respectively, compared to the control. The present study clearly indicated that nitrification and urease inhibitor exhibited positive roles in reducing N losses through $NH_3$ and $N_2O$ emission.
The biochemical properties of the fibrinolytic protease of 50,800 Da isolated from the venom of Kgdistrodon blomhoffi brevicaudus were characterized. The enzyme hydrolyzed the carboxyl side of arginine in the synthetic chromogenic peptides, N-Benzoyl-Phe-Val-Arg-pNA and N-p-Tosyl-Gly-Pro-Arg-pNA, and the enzyme activity was inhibited by phenylmethylsulfonylfluoride indicating that the enzyme belongs to the serine protease family. The pretense showed maximum activity at pH 7.5 and inhibited by ZnCl$_2$, CuSO$_4$, but not by soybean trypsin inhibitor, pepstatin A, 2-mercaptoethanol and EDTA. The fm value determined with N-p-Tosyl-Gly-Pro-Arg-pNA was 0.2 mM. The thrombolytic activity of the purified enzyme was evaluated by platelet aggregation test in rabbits. While the platelet count ratio in blood of the rabbits injected with thrombin alone declined from 1.0 to 0.6 within 7 min and maintained around 0.6 for 24 hours thereafter, the ratio rapidly recovered from around 0.6 to 0.8 in 1 hr, to 1.0 in 24 hrs when the rabbits were sequentially treated with thrombin and the purified enzyme. The result showed that the serine protease from A. blomhoffi brevicoudus of 50,800 Da had a thrombolytic activity in vivo and the enzyme might be developed as a therapuetic agent for the treatment of thrombic disease.
토양시료로부터 높은 활성의 pretense를 생산하는 세균을 수십종 분리하였다. 분리된 세균중에서 protease활성과 성장속도면에서 가장 우수한 균주를 선별하여 WRD-2로 명명하였으며, 형태학적, 생화학적 및 생리학적 특성을 조사한 후 Bacillus sp로 동정되었다. WRD-2조효소액의 protease 최적 활성은 pH 6.0, 온도는 $40^{\circ}C$로 중성 protease임을 알 수 있었고, 온도 $20{\sim}40^{\circ}C$에서 높은 protease활성을 나타내었다. 또한, 초기 pH에 따른 protease 활성에서는 pH 6에서 가장 높은 활성을 나타내었고, 배양배지의 영향은 탄소원으로 maltose 3%, 질소원으로 yeast extract 4%에서 가장 높은 pretense활성을 나타내었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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