This study was carried out to produce antimicrobial peptides from casein using various proteases. To examine whether the hydrolysis of casein would produce antimicrobial substance and the application as natural antimicrobial material, casein was hydrolyzed by five different proteases. The casein hydrolysate was fractionated with regenerated membrane filter (molecular weight cut-off 30,000 10,000 and 3,000) and antimicrobial activity was measured for each fraction. Antimicrobial activity appeared great in the fraction below 3,000 molecular weight The fraction was re-fractionated by high performance liquid chromatography and substance of main peak (retention time: 13.2 min) collected was used as a sample to measure antimicrobial activity. Among the casein hydrolysates produced by protease, antimicrobial activity was observed the greatest in hydrolysate treated with Aspergillus oryzae protease. The minimum inhibition concentrations of the Asp. oryzae protease hydrolysate were 1.0-1.5 mg/mL. This hydrolysate was a heat stable peptide since antimicrobial activity was maintained after treating with heat for 20 min at $121^{\circ}C$.
To prepare soybean curd utilizing effectively bioactive component of soybean, ultra fine whole soybean flour(UFWSF) was used as a soybean curd material for preparation of uncompressed whole soybean flour curd(UWSFC) in this study. The UWSFC was made with treatment by proteinase and coagulant, and proximate composition, color, textural properties and sensory evaluation of that were analyzed. Protease produced from Aspergillus sojae, bromelain and papain showed soybean curd coagulation ability and the pretense produced from Aspergillus sojae showed the highest soybean curd coagulation ability. When, after first heating and homogenizing, the proteinase was added to soybean milt textural properties of UWSFC were the best. Hunter's L and b values and textural properties (hardness, fracturability springiness, gumminess and chewiness) of UWSFC using proteinase and coagulant were higher than commercial soft soybean curd and adhesiveness and cohesiveness showed contrary tendency.
As an alternative of yeast, various concentrations to prepare hypo-allergenic bread (HAB). Addition of sodium bicarbonate increased $CO_2$ emission, but at higher than 2.0% caused bitter taste compared to other mixtures. Addition of sucrose significantly increased $CO_2$ emission. HABs 7 ($NaHCO_3$ 2.0g+sucrose 0.63 g) and 8 ($NaHCO_3$ 2.0g+sucrose 1.0g) showed higher grain and color scores. HAB 5 ($NaHCO_3$ 1.5g+sucrose 1.0g) and 6 ($NaHCO_3$ 1.5g+sucrose 2.0g) gave higher aroma and taste scores. HAB 5 showed significantly higher overall acceptability (p<0.05) score than others, whereas HABs 7 and 8, regardless of high external sensory qualities, showed lower overall acceptabilities than HAB 5 due to bitter taste. Prototypical HAB was obtained using wheat flour (100g) and water (62mL) incubated at $37^{\circ}C$ for 4 hr for treatment of b.p pretense (100mg) before adding sodium bicarbonate (1.5%), sucrose (1.0%), NaCl (1.0%), and citric acid (1.0%).
Huh, Man Kyu;Choi, Jaewon;Lee, Jangseop;Jin, Bogye;Kim, Hyun Kyung
Journal of Life Science
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v.24
no.6
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pp.612-617
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2014
The phenetic relationships among six natural populations of Equisetum pratense in Korea were investigated at the population level by constructing a tree based on Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) markers. RAPD analysis was also conducted to estimate genetic diversity and the population structure of E. pratense. A mean of 26.7% at the six population levels indicated polymorphism. E. pratense was found to have fewer alleles per locus (1.267) and fewer effective alleles per locus (1.176). Genetic diversity (0.102) in E. pratense is lower than the average for species with similar life history traits. Total genetic diversity values (HT) varied between 0.112 (OPD-07) and 0.445 (OPD-16), for an average overall polymorphic locus of 0.141. Inter-locus variation in the within-population genetic diversity ($H_S$) was low (0.102). Asexual reproduction, small population size, and the colonization process are proposed as possible factors contributing to the observed low genetic diversity in E. pratense. On a per-locus basis, the proportion of total genetic variation due to differences among populations ($G_{ST}$) ranged from 0.129 for OPD-07 to 0.455 for OPD-09, with a mean of 0.277. This indicated that about 27.7% of the total variation was among populations. Thus, genetic variation (72.3%) resided within populations. This study contributes new information for research on the taxonomy and population genetics of E. pratense.
For the study of the effects of low gamma-irradiation on malt enrymes, barley seeds were irradiated by Co-60, with 10, 100, 1,000 and 10,000 rads respectively. The experiments on the germinated green malt were resulted as follows. (1) By the low doses below 1,000 rads the fresh weights of green malts increased but at the hgih doses of 10,000 rads they decreased. (2) In all doses ${\alpha}$-amylase activity and saccharifying ability were expedited, showing the increased effects of 23-69% and 87-178% respectively and their peaks at 100 rads. (3) Protease activity showed almost no changes ein the low doses below 1,000 rads and decreased remarkably at the high doses of 10,000 rads. (4) Reducing sugar contents of green malts were decreased, particularly in 100 and 1,000 rads. (5) Soluble protein contents of green malts were increased in all doses and had their highest value at 100 rads.
Chi Won-Jae;Kim Mi-Soon;Kim Jong-Hee;Kang Dae-Kyung;Hong Soon-Kwang
Korean Journal of Microbiology
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v.41
no.4
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pp.255-261
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2005
A 6.7kb DNA fragment containing the sprT gene encoding Streptomyces griseus trypsin (SGT) was cloned from Streptomyces griseus ATCC 10137, and the complete nucleotide sequence was determined. Nucleotide sequence and deduced amino acid or the EcoRI-HindIII fragment revealed the presence or the six complete ORFs containing the sprT gene and one incomplete ORF, which were named ORF1, SGT, ORF2, ORF3, ORF4, ORF5, and ORF6, respectively. ORF1 has homology with the oxidoreductases from several organisms. ORF2 and ORF3 show similarity with unknown proteins and transcription regulator that belongs to the ArsR family, respectively. ORF4 and ORF5 show homology with the peptidoglycan bound protein with LPXTG motif from Listeria monocytogenes and the membrane protein with transmembrane helix from several organisms, respectively. The last ORF, ORF6, shows homology with the lipoprotein from Streptomyces avermitilis.
Insulin-like growth factor-I(IGF-I) has significant insulin-like anabolic effects which include the stimulation of glucose and amino acid uptake, as well as protein and glycogen synthesis. IGFs exist in serum and other biological fluids as complexes bound to a family of structurally related insulin-like growth factor binding proteins(IGFBPs). Six human IGFBPs can modulate the effects of IGFs on target tissues by several mechanisms, including altering the serum's half-life and the transcapillary transport of IGFs, as well as changing the availability of IGFs to specific cell surface receptors. Human fibroblasts secrete IGFBPs that can modify IGF-I action. Previous to our study using either Northern blotting, and Western blotting have shown that fibroblasts express mRNA IGFBP-3, -4, and -5, and synthesize these proteins. In addition, fibroblast cell lysates revealed that the IGFBP-3 was most abundant. For these reasons, we undertook to gain further insight into the effects of high and low glucose incubation condition on metabolism and IGFBP-3 expression. In results of metabolites and IGFBP-3 expression in GM10 cells cultivated with various glucose concentration, the consumption of glucose and accumulation of triglyceride were increased in condition of high glucose, and total protein level was decreased. in the course of time. After 5 days incubation, levels of free amino acid in medium containing glucose of high concentration glucose were higher than in conditions of low glucose. Although the levels of IGFBP-3 protein and mRNA levels were increased in low glucose, and IGFBP-3 was not affected by any pretense. Taken together, we suggest that the study of growth factors, like IGFs, might be a possible model of diabetes militus in cell, although the results in cell models were not in accord with in vivo.
To develop multifunctional microbial inoculant, microorganisms with antagonistic activity and biofertilizing activity were screened. Pantoea agglomerans and Bacillus megaterium from our laboratory culture collection, and strain MF12 from soil near poultry farm in Miryang were selected. On the basis of morphological, physiological studies and 16S rDNA sequence analysis, isolate MF12 was identified as the Bacillus pumilis. Three strains were studied for insoluble phosphate solubilization, indole-3-acetic acid (IAA) and siderophore production, ammonification ability, hydrolytic enzyme production and antifungal activity against phytopathogenic fungi. P. agglomerans did not produce any visible clear zone on agar plate containing 0.5% $Ca_3(PO_4){_2}$ as a sole phosphorus source. However, this strain could solubilize insoluble phosphate in liquid medium. All strains produced IAA ranged from $3{\sim}639{\mu}g/ml$ depending on culture time and had ammonification ability. Among three strains, only P. agglomerans produced siderophore. P. agglomerans produced pectinase and lipase, B. megaterium produced amylase, protease and lipase while B. pumilis produced protease and lipase. P. agglomerans showed antifungal activities against phytopathogenic fungi, Fusarium oxysporum and Colletotrichum gloeosporioides. B. pumilis showed antifungal activities against Botrytis cinerea, Sclerotinia sclerotiorum and Phythium ultimum.
To investigate bacteria with algal Iytic activities against Anabaena cylindrica when water blooming occurs and to study enzyme profiles of alga-Iytic bacteria, various bacterial strains were isolated from surface waters and sediments in eutrophic lakes or reservoirs in Korea. Abacterial strain AK-07 was characterized and identified as Acinetobacter johnsonii based on its16S rDNA base sequence. When AK-07 was co-cultivated with A. cylindrica, bacterial cells propagated to $8\;{\times}\;10^8$ cfu $ml^{-1}$ and Iyses algal cells. However, culture filtrates of AK-07 did not exhibit algal Iytic activities. That suggesting the enzymes on the surfaces of the bacterium might be effective algal Iytic agents to cause Iyses of cells. Acinetobacter johnsonii AK-07 exhibited high degradation activities against A. cylindrica, and formed alginase, caseinase, lipase, fucodian hydrolase, and laminarinase. Moreover, glycosidases for example ${\beta}$-galatosidase, ${\beta}$-glucosidase, ${\beta}$-glucosaminidase, and ${\beta}$-xylosidase, which hydrolyzed ${\beta}$-0-glycosidic bonds, were found in cell-free extracts of A. johnsonii AK-07. Other glycosidase such as ${\alpha}$-galctosidases, ${\alpha}$-N-Ac-galctosidases, ${\alpha}$-mannosidases, and ${\alpha}$- L-fuco-sidases, which cleavage ${\alpha}$-0-glycosidic bondsare not detected. In the results, enzyme systemsof A. johnsonii AK-07 were very complex to do-grade cell walls of cyanobacteria. The polysaccharides or peptidoglycans of A. cylindrica maybe hydrolyzed and metabolized to a range of easily utilizable monosaccharides or other low molecular weight organic substances by strain AK-07 of A. johnsonii.
Nam Min-Kyung;Park Hye-Min;Choi Ju-Youn;Park Hyo-Jin;Chung Kwang Chul;Kang Seong man;Rhim Hyangshuk
Journal of Life Science
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v.15
no.6
s.73
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pp.916-922
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2005
Parkin, known as an E3 ubiquitin ligase, has essential role in protein quality control, and its severe dysfunction leads to neurodegenerative disorders. Human Parkin was excessively degraded when expressed in Escherichia coli under the conventional induction condition ($37^{\circ}C$ culture condition with 0.5 mM IPTG). To optimize the induction and culture conditions for recombinant human Parkin and develop a rapid method for the Parkin purification, we expressed Parkin by using PCEX system at the different culture temperatures and IPTC concentrations. The intact Parkin protein was purified to approximately $90\%$ purity with suitable amounts of protein under the optimal culture condition ($25^{\circ}C$E with 0.01 mM IPTG). Additionally, we constructed various parkin plasmids with different tagging systems and investigated their expression patterns in HEK293 cells. We found that the proteolytically sensitive site is localized within a ubiquitin-like domain of Parkin. This study developes a method for generating useful reagents to investigate biochemical properties of Parkin.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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