An in silico approach was developed to survey the genes expressed in four internal organs of pig: liver, kidney, spleen and small intestine. The major procedures of the approach included: (1) BLAST searching against GenBank "est_others" database using human cDNA sequences as queries to screen the porcine orthologous expressed sequence tags (ESTs), (2) classifying the porcine ESTs records by resources according to certain criteria and (3) analyzing data for ESTs specifically expressed in each organ. In order to do so, four Java programs were developed. Based on the ESTs available in the GenBank database, it was found that there were at least 2,100 genes expressed in these four organs, including 128 in the liver, 81 in the kidney, 780 in the spleen, and 1,423 in the small intestine respectively (a few genes co-expressed in these tissues). Gene expression patterns, such as co-expressed genes, preferentially expressed genes and basic active genes were also compared and characterized among these organs. This study provides a comprehensive model on how to use the bioinformatics approach and Genbank databases to facilitate the discovery of new genes in livestock species.
To further investigate the regions on porcine chromosome 7 that are responsible for economically important traits, phenotypic data from a total of 287 F2 individuals were collected and analyzed from 1998 to 2000. All animals were genotyped for eight microsatellite loci spanning the length of chromosome 7. QTL analysis was performed using interval mapping under the line-cross model. A permutation test was used to establish significance levels associated with QTL effects. Observed QTL effects were (chromosomewide significance, position of maximum significance in centimorgans): Birth weight (<0.01, 3); Carcass length (<0.05, 80); Longissimus muscle area (<0.01, 69); Skin percentage (<0.01, 69); Bone percentage (<0.01, 74); Fat depths at shoulder (<0.05, 54);Mean fat depth (<0.05, 81); Moisture in m. Longissimus Dorsi (<0.05, 88). Additional evidence was also found which suggested QTL for dressing percentage and fat depths at buttock. This study offers confirmation of several QTL affecting growth and carcass traits on SSC7 and provides an important step in the search for the actual major genes involved in the traits of economic interest.
Helicobacter suis is a gram negative bacterium and colonizes in porcine stomach. It causes gastric diseases in the stomach and plays a significant role in daily weight gains in pigs. Recent studies about one of potential sources of human gastric diseases. Therefore, this study was conducted to compare histopathological lesions and molecular detection of Helicobacter suis in the pyloric mucosa of porcine stomachs transferred from slaughterhouses, based on gross and histological examinations and a PCR assay. A total 90 stomach samples were investigated to record gastric lesion scores by characteristic gastric lesions, followed by routine H & E and Warthin-Starry silver staining to detect Helicobacter-like organisms. For PCR assay, H. suis specific primers and conditions are used. Sixty-one samples (67.8%) showed gross gastric lesions, of which 38 samples (40.2%) presented grade 1, 12 samples (13.3%) presented grade 2, and 11 samples (12.2%) presented grade 3, respectively. In Warthin-Starry silver stain, Helicobacter-like organisms were detected from 11 samples (12.2%) with 4 samples (4.4%) for grade 0, 5 samples (5.6%) for grade 1, 1 sample (1.1%) for grade 2 and 1 sample (1.1%) for grade 3, respectively. The PCR resulted positive in 37 samples (41.1%) with 14 samples (15.6%) for grade 0, 14 samples (15.6%) for grade 1, 3 samples (3.3%) for grade 2 and 6 samples (6.7%) for grade 3, respectively. Positive samples for both examinations were 5 samples (5.6%). The result suggested that it should be considered as one of factors causing a gastric disease in pigs. Also, it could be acknowledged to research fundamental aspects of Helicobacter-induced gastritis in human as an animal model.
Three kinds of serine protease inhibitors, members of the Bowman-Birk trypsin inhibitor, were purified from Dolichos lablab seeds and named Dolichos protease inhibitor 1, 2 and 3 (DI-1, DI-2 and DI-3), respectively. Each inhibitor showed a single band with gel mobility at around 15.9, 12.1 and 14.6 kDa on 20% SDS-PAGE under reducing conditions. To characterize inhibitory specificity, the inhibition constant (Ki) for these inhibitors was measured against several known serine proteases. All three Dolichos protease inhibitors (DI-1, DI-2 and DI-3) inhibited the activity of trypsin and plasmin, but had no effect on thrombin and kallikrein (either for human plasma kallikrein or for porcine pancreas kallikrein). DI-1 inhibited chymotrypsin most effectively (Ki = $3.6{\times}10^{-9}\;M$), while DI-2 displayed inhibitory activity for porcine pancreatic elastase (Ki = $6.2{\times}10^{-8}\;M$). Pre-treatment of the 33 mg/kg of DI-mixture (active fractions from $C_{18}$ open column chromatography that included DI-1, DI-2 and DI-3) inhibited the induction of pseudomonal elastase-induced septic hypotension and prevented an increase in bradykinin generation in pseudomonal elastase-treated guinea pig plasma. Also, the increase of kallikrein activity, by injection of pseudomonal elastase, was inhibited by the pretreatment of the DI-mixture in a guinea pig. Since the DI-mixture had no inhibitory effect on kallikrein activity when Z-Phe-Arg-MCA was used as a substrate in vitro, its inhibitory activity in the pseudomonal elastase-induced septic hypotension model might not be due to a direct inhibition of plasma kallikrein in the activation cascade of the Hageman factor and prekallikrein system. These results suggest that the Dolichos DI-mixture might be used as an inhibitor in pathogenic bacterial protease-induced septic shock.
The purpose of this study is to evaluate histologically the resorption and tissue response of various resorbable collagen membranes used for guided tissue regeneration and guided bone regeneration, using a subcutaneous model on the dorsal surface of the rat. In this study, 10 Sprague-Dawley male rats (mean BW 150gm) were used and the commercially available materials included acellular dermal matrix allograft, porcine collagen membrane, freeze-dried bovine dura mater. Animals were sacrificed at 2,6 and 8 weeks after implantation of various resorbable collagen membranes. Specimens were prepared with Hematoxylin-Eosin stain for light microscopic evaluation. The results of this study were as follows: 1. Resorption : Inner portion of porcine collagen membrane was resorbed a lot at 6 weeks, but its function was being kept for infiltration of another tissues were not observed. Freeze-dried bovine dura mater and acellular dermal allograft were rarely resorbed and kept their structure of outer portion for 8 weeks. 2. Inflammatory reactions : Inflammatory reaction was so mild and foreign body reaction didn't happen in all of resorbable collagen membranes, which showed their biocompatibility. 3. In all of resorbable collagen membranes, multinuclcated giant cells by foreign body reactions were not observed. Barrier membranes have to maintain their function for 4-6 weeks in guided tissue regeneration and at least 8 weeks in guided bone regeneration. According to present study, we can find all of the resorbable collagen membranes kept their function and structure for 8 weeks and were rarely resorbed. Foreign body reaction didn't happen and inflammatory reaction was so mild histologically. Therefore, all of collagen membranes used in this experiment were considered proper resorbable membranes for guided tissue regeneration and guided bone regeneration.
Background: Porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) is a swine enteropathogenic coronavirus that has devastated the swine industry in South Korea over the last 30 years. The lack of an effective method to control the endemics has led to a surge in PEDV recurrences in affected farms throughout the country. Objectives: In the first step toward establishing systematic monitoring of and active control measures over the swine populations, we constructed an assessment model that evaluates the status of (1) biosecurity, (2) herd immunity, and (3) virus circulation in each of the PEDV-infected farms. Methods: A total of 13 farrow-to-finish pig farms with a history of acute PEDV infection on Jeju Island were chosen for this study. The potential risk of the recurrence in these farms was estimated through on-site data collection and laboratory examination. Results: Overall, the data indicated that a considerable number of the PEDV-infected farms had lax biosecurity, achieved incomplete protective immunity in the sows despite multi-dose vaccination, and served as incubators of the circulating virus; thus, they face an increased risk of recurrent outbreaks. Intriguingly, our results suggest that after an outbreak, a farm requires proactive tasks, including reinforcing biosecurity, conducting serological and virus monitoring to check the sows' immunity and to identify the animals exposed to PEDV, and improving the vaccination scheme and disinfection practices if needed. Conclusions: The present study highlights the significance of coordinated PEDV management in infected farms to reduce the risk of recurrence and further contribute towards the national eradication of PEDV.
Background: Pre-lifting of the sternum marked a major turning point in pectus excavatum repair. The author developed the crane technique in 2002 and successfully applied it to more than 2,000 cases using sternal wire stitching. However, blind sternal suturing limited the use of the wire-stitch crane. We propose a novel screw for sternal lifting as a new tool for the crane technique. Methods: We developed a screw system strong enough to withstand the pressure needed for sternum lifting. The screw was designed to have a broader thread to hold the bony tissue securely. The screw's sustaining power was tested using the torsion, driving torque, and axial pull-out tests in a polyurethane block and ex-vivo porcine sternum. Results: The screws were easily driven into the sternum, and the head of the screw was connectable to the table-mounted retractor. In the torsion test, the 2° offset torsional yield was 4.53 N·m (reference value, 1 N·m). In the polyurethane block driving torque test, the maximum torque was 0.98 N·m (reference value, 0.70 N·m). The axial pull-out test was 446 N (reference value, 100 N). The maximum pull-out resistance in the ex-vivo porcine sternum model was 1,516 N. Conclusion: The screw crane was strong enough to sustain the chest wall weight to be lifted. Thus, the screws could effectively replace the sternal wire stitching in crane pre-lifting of the sternum. We expect that application of the screw-crane will be easy and that it will improve the safety and success rate of pectus repair surgery.
Background: Co-infections of the porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) and the Haemophilus parasuis (HPS) are severe in Chinese pigs, but the immune response genes against co-infected with 2 pathogens in the lungs have not been reported. Objectives: To understand the effect of PRRSV and/or HPS infection on the genes expression associated with lung immune function. Methods: The expression of the immune-related genes was analyzed using RNA-sequencing and bioinformatics. Differentially expressed genes (DEGs) were detected and identified by quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR), immunohistochemistry (IHC) and western blotting assays. Results: All experimental pigs showed clinical symptoms and lung lesions. RNA-seq analysis showed that 922 DEGs in co-challenged pigs were more than in the HPS group (709 DEGs) and the PRRSV group (676 DEGs). Eleven DEGs validated by qRT-PCR were consistent with the RNA sequencing results. Eleven common Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes pathways related to infection and immune were found in single-infected and co-challenged pigs, including autophagy, cytokine-cytokine receptor interaction, and antigen processing and presentation, involving different DEGs. A model of immune response to infection with PRRSV and HPS was predicted among the DEGs in the co-challenged pigs. Dual oxidase 1 (DUOX1) and interleukin-21 (IL21) were detected by IHC and western blot and showed significant differences between the co-challenged pigs and the controls. Conclusions: These findings elucidated the transcriptome changes in the lungs after PRRSV and/or HPS infections, providing ideas for further study to inhibit ROS production and promote pulmonary fibrosis caused by co-challenging with PRRSV and HPS.
More than 20 years after the first report of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) in Korea, the disease is still having major impact on domestic pig health and relevant industries. Although ELISA tests are commonly used by veterinarians to guide herd management, data on diagnostic performance of the test in field settings are very limited. The objective of this study was to evaluate two commercially available PRRSV ELISA (IDEXX PRRS X3 ELISA and Bionote PRRSV ELISA 4.0) to detect antibodies against PRRSV on serum samples. To this end, a total of 1,108 sera were recruited from 35 swine farms located in Gyeonggi province and tested at the Gyeonggi Province Veterinary Service Center. All tests were performed according to the manufacturer's instructions, by laboratory technicians who routinely perform PRRS testing on blood samples. Samples were collected from two sources of swine populations with different PRRS prevalence; 60 samples (5.4%) were originated from breeding farms and the remaining 1,048 samples (94.6%) were from farrow-to-finish farms. We applied Bayesian latent class model (LCM) for two-tests in the two-population when the accuracy of the gold standard is not available. The model estimated that Bionote ELISA was a bit more specific but slightly less sensitive. The estimated sensitivity and specificity of the IDEXX ELISA were 99.8% (95% CI 98.1-100%) and 86.4% (95% CI 81.4-96.5%), respectively. Sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value for Bionote kit were 98.7% (95% CI 92.8-100%), 89.8% (95% CI 86.2-93.1%), 93.8% (95% CI 91.5-96.0%), and 97.8% (95% CI 87.1-100%), respectively. Based on the Bayesian 95% credible intervals, the sensitivity and specificity of the two ELISAs were not significantly different each other when assuming that two kits were imperfect, indicating that two kits performed equally well in terms of sensitivity and specificity in our filed setting.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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