Using 200 porcine colon tissues, the efficiencies of three isolation methods of Campylobacter from porcine intestines were compared: Method 1, direct streaking of colon mucosa; Method 2, direct inoculation of intestinal contents with a swab; Method 3, inoculation of pre-enriched medium. A total of 460 Campylobacter isolates were obtained from 178 samples (89%) by direct streaking of colon mucosa, 142 samples (71%) by direct streaking of a swab, and 94 samples (47%) by pre-enrichment of intestinal contents in Preston broth. Direct streaking of colon mucosa was superior to the other two isolation methods, in terms of rapidity and higher efficiency. When isolates were identified with various biochemical tests and PCRs specific to 16s rRNA, mapA, and ceuE, C. coli was the predominant species (87%) in porcine, whereas the rest of the isolates were identified as C. lanienae.
There is emerging interest in using xenotransplantation of porcine cells, tissues and organs for treatment of human illness. This article reviews the current status of xenotransplantation, with particular emphasis on the physiological and immunological barriers to xenotransplantation and genetic manipulations to overcome xenograft rejection. Preliminary success in xenotransplantation therapy for human Parkinson's disease using porcine foetal brain cells is described. Finally the zoonotic dangers of porcine xenotransplantation, most particularly porcine endogenous retroviruses (PERVs), are discussed.
This study carried out to investigate the effects of cryoprotectants in the medium on the survival rate of rapidly frozen porcine bisected demi-embryos. The porcine bisected demi-embryos following dehydration by cryoprotectants containing sucrose were directly plunged into liquid nitrogen and thawed in 3$0^{\circ}C$ water bath. Survival rate was defined as development rate on in vitro culture or FDA-test. The results are summarized as follows : 1. The survival rates of without-zona pellucida embryos and 2 blastomeres porcine embryos were 10.0 and 7.1%, respectively. The rate of unfrozen blastomeres (20.00%) was significantly higher than that of non-frozen oocytes. 2. The survival rates of with and without-zona pellucida of bisected porcine embryos by micromanipulator were 20.0 and 14.3%, respectively. 3. The developmental rates of with and without-zona pellucida of bisected poricine embryos by micromanipulator were 13.3 and 7.1%, respectively.
The prevalence of potentially xenozoonotic viruses in the reproductive tract of female pigs in Korea was investigated by polymerase chain reaction (PCR). These viruses include porcine endogenous retrovirus (PERV), porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV), swine hepatitis E virus (SHEV), porcine lymphotropic herpesvirus (PLHV), and porcine circovirus type 2 (PCV-2). Histopathological examination and PCR analysis were conducted using the ovaries of 70 slaughtered pigs that were collected from 14 farms in Jeju. Histopathologically, infiltrations of mononuclear inflammatory cells around the thick-walled coiled vessels in the ovarian medulla were observed in 15 cases. Based on the PCR method, PERV, PLHV, PRRSV, SHEV, and PCV-2 were detected in 69 (98.6%), 35 (50%), 5 (7.1%), 4 (5.7%), and 1 sample (1.4%), respectively. These results suggest that PERV and PLHV are the major xenozoonotic viruses in the porcine ovary. This study should aid in the development of a monitoring protocol for potential xenozoonotic agents and in the production of germ-free pigs for xenotransplantation.
The porcine reproductive and respiratory syndrome Virus (PRRSV) is an infectious disease that causes abortions and respiratory disorders in swine. In this study, the interaction between PRRSV and porcine dendritic cells generated from $CD14^{+}$ monocytes in the presence of GM-CSF and IL-4 was examined. As a result, it was shown that immature and mature dendritic cells can be productively infected with PRRSV. When the expression of surface MHC molecules on infected dendritic cells was determined, MHC classes I and II were found to be downregulated when compared with un infected dendritic cells. With the exception of the IL-4 and IFN-$\gamma$ cytokines, the induction of the IL-10, IL-12, and TNF-$\alpha$ cytokines all increased in dendritic cells infected with PRRSV. A mixed lymphocyte reaction showed that peripheral blood mononuclear cells cocultured with PRRSV-infected dendritic cells were less stimulated than peripheral blood mononuclear cells cocultured with dendritic cells treated with PBS, LPS, or UV-inactivated PRRSV. Therefore, these results suggest that PRRSV would appear to modulate the immune stimulatory function of porcine dendritic cells.
This study was carried out to examine the influence of minimum essential medium (MEM) vitamins supplementation to in vitro maturation medium and in vitro culture medium on the development of porcine embryos. Porcine embryo development was investigated following cultivation in both in vitro maturation and culture medium with the supplementation of MEM vitamins (0, 0.1, 0.2 and 0.4%) using immature oocytes collected from the ovary of prepubertal gilts. Embryo development was observed and the total cell number in each blastocyst generated under the culture conditions was quantified following supplementation of the medium. The embryonic development rate of the blastocyst and hatched blastocyst was higher, but not significantly so, when 0.4% MEM vitamins were supplemented to the in vitro maturation medium of the porcine oocyte. Interestingly, the total number of cells in the blastocyst was significantly higher in the in vitro maturation MEM vitamins supplemented group compared to either the untreated group or the group which had MEM vitamins supplemented to both in vitro maturation and in vitro culture medium simultaneously (p<0.05). Therefore, the supplementation of 0.4% MEM vitamins to the in vitro mature medium has a beneficial effect on the embryonic development of in vitro produced blastocysts derived from the immature porcine oocytes.
Porcine pancreas development is not well studied at the molecular level despite being a therapeutic resource for diabetic patients. In this study, we investigated expression of lineage markers and performed proteomic analysis. Expression of the early lineage markers Pdx1 and Ptf1a was developmentally conserved between mice and pigs, whereas expression of the islet differentiation marker Pax4 was delayed in porcine compared with murine pancreas development. Proteomic analysis found that expression levels of chymotrypsinogen were down-regulated during porcine pancreas development while those of digestive enzymes like lipases, elastase and serine protease were up-regulated. In addition, specific isoforms of protein folding assistants such as protein disulfide isomerase and prefoldin were expressed at specific stages during the maturation of digestive enzymes. Taken together, these results show that development of the porcine pancreas is regulated by a concerted interplay of pancreas lineage marker proteins and other specified proteins, resulting in a functional endocrine and exocrine organ.
Presently, the effect of 0.5 mM dibutyryl cAMP (dbcAMP)-supplemented maturation medium during different incubation time on meiotic arrest (germinal vesicle) and resumption (metaphase II) of porcine oocytes and embryonic development of porcine oocytes following in vitro fertilization (IVF) or parthenogenetic activation (PA) was determined. Porcine cumulus oocyte complexes (COCs) were cultured in 0.5 mM dbcAMP for 17, 22, 27, or 42 h, and an additional 22 h without 0.5 mM dbcAMP. The nuclear status was examined at each time point. Oocytes cultured from 39~49 h displayed more than 80% meiotic resumption. More than 85 % of meiotic arrest was presented at 17~22 h. Oocytes were cultured for 22 h with 0.5 mM dbcAMP and additional 22 h without dbcAMP to assess developmental potential following IVF or PA. There were no significant differences in blastocyst rates among the dbcAMPIVF, IVF, dbcAMP-PA, and PA groups, although cleavage rate of IVF group was significantly higher than those of dbcAMP-PA, and PA groups. In conclusion, 0.5 mM dbcAMP influenced meiotic maturation of porcine oocytes depending on incubation time of oocyte, although embryonic development was not improved in both IVF and PA.
Nanotechnology is currently receiving considerable attention in various fields of biotechnology. The uptake of nanoparticles by cells for labeling and tracking is a critical process for many biomedical therapeutic applications. However, nanoparticle labeling of porcine hematopoietic cells has not been demonstrated so far. In the present study, silica-coated nanoparticles conjugated with rhodamine B isothiocyanate (SR-RITC) were used to investigate the uptake of nanoparticles by porcine hematopoietic cells. Flow cytometric and confocal microscopic analyses reveled that the cells were efficiently internalized by the silica-coated nanoparticles. Furthermore, biocompatibility tests demonstrated that the SR nanoparticles were not cytotoxic, and they had no impact on proliferation. Our study demonstrates that silica-coated nanoparticles are taken up very rapidly and with high efficiency into porcine hematopoietic cells, with no apparent deleterious effects. Therefore, silica-coated nanoparticles appear to be a promising tool for tracking porcine hematopoietic cells.
Park, Mi-Ryung;Im, Ji-Hyun;Chung, Hak-Jae;Kim, Kyong-Woon;Byun, Sung June;Hwang, Seongsoo;Im, Gi-Sun
Journal of Embryo Transfer
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v.31
no.4
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pp.319-322
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2016
CD26, also known as Dipeptidyl peptidase IV (DPP-4), is a cell surface glycoprotein that belongs to the serine protease family and has wide spread organ distribution throughout the body. CD26 was previously characterized in immune cells but also has important metabolic functions which are not yet fully understood. Thus, we investigated the effect of CD26 in porcine parthenogenetic embryos. We attempted CD26 downregulation of porcine embryos by siRNA, and evaluated CD26 suppression of developmental competencies. Although the porcine embryos injected with CD26 siRNA were able to develop to the early stage, these embryos were decreased to form blastocysts. Our results indicated that CD26 is one of factors for the regulation of development of porcine embryos.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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