• 약학회지
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• 제30권5호
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• pp.220-227
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• 1986

Polyphenol oxidase was purified from an extract of tea leaf by ammonium sulfate fractionation followed by Sephadex G-150 column chromatography, which resulted in a 67-fold increase in specific activity. The enzyme had optimum pH 6.5 and was relatively heat stable. The substrate specificity of the tea leaf PPO showed high affinity toward pyrogallol and catechol. Potassium cyanide, sodium diethyldithiocarbamate, L-cysteine, 2-mercaptoethanol and ascorbic acid were potent inhibitors.

• 생약학회지
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• 제27권4호
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• pp.328-335
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• 1996

Effects of hydrogen peroxide$(H_2O_2)$ on polyphenol oxidase (PPO) in Perillae Folium were investigated. The inactivation of this enzyme was dependent on $H_2O_2$ concentration. and the initial lag period was not shown. Preincubation of Perillae Folium PPO with $H_2O_2$ in the absence of a substrate resulted in rapid loss of enzymatic activity. The inactivation of PPO by $H_2O_2$ dependents temperature and pH. OH radical scavengers such as mannitol and sodium formate did not protect the enzyme against inactivation by $H_2O_2$. Substrate analogue such as phenylalanine protected the enzyme against inactivation by $H_2O_2$. and copper chelator such as sodium azide also protected the enzyme.

• 생약학회지
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• 제31권2호
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• pp.240-244
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• 2000

Antimutagenicity profiles of the enzymatic browning reaction products(EBRP) were investigated. The rec-assay with Bacillus subtilis strains $H17(rec^+)$ and $M45(rec^-)$ was carried out using their spores. The biological activities were evaluated for seven different enzymatic browning reaction products, which resulted from the reactions of seven polyphenols with polyphenol oxidase isolated from Ginkgo biloba leaves. In the spore $rec^-$ assay, most of the polyphenolic compounds tested were positive, whereas their enzymatic browning reaction products were tested negative. The mutagenicity of enzymic browning mixtures of the polyphenols and the enzymes obtained from Ginkgo biloba leaves showed negative results in the mutagenicity test using Bacillus subtilis strains $H17(rec^+)$ and $M45(rec^-)$. In the case where polyphenol oxidase inhibitors were added in the enzymatic reaction mixtures with polyphenols, the polyphenols showed mutagenic effect in the spore $rec^-$ assay. This suggests that the activity of polyphenol oxidase is decreased.

• 약학회지
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• 제43권6호
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• pp.709-715
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• 1999

Polyphenol oxidase (PPO) activity in 200×g (cell wall), 4,000×g (plastid), 100,000×g (mitochondrial) and soluble fractions of the perilla leaves was monitored in the upper, middle and lower sections of the plant. In the course of plant growth, PPO activities in plastid and mitochondrial fractions were decreased, while those in cell wall fraction were maintained. During growing process, specific activities and PPO activities of each fraction were decreased, while total phenol content were decreased in middle (middle) and then increased in later stage (lower). Cell wall, plastid, mitochondrial (pellet) and soluble fraction had slightly different pH optima and substrate specificities. Isoenzyme patterns were identical in two bands for PPO activity in different subcellular fractions. Their molecular weights were 37KD and 48KD respectively.

• 한국식품영양과학회지
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• 제16권2호
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• pp.110-117
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• 1987

재래식(在來式) 적색(赤色)자두(Prunus salicina)로부터 효소(酵素)를 추출(抽出) 정제(精製)하여 그 성질(性質)을 조사(調査)한 결과(結果)는 다음과 같다. 1. 적색(赤色)자두의 PPO는 crude extract보다 $(NH_4)_2SO_4$로 포화(飽和)했을 예 15배(倍), 그리고 Sephadex G-100 column chromatograph를 행하였을 애 64배(倍)로 정제(精製)되었다. 2. 효소반응(酵素反應)의 최적조건(最適條件)은 최적온도(最適溫度) 및 pH가 $35^{\circ}C$ 6.5였으며 주요기질(主要基質) 은 o-diphenol인 catechol로 나타났다. 3. 적색(赤色)자두 PPO의 열안정성(熱安定性)은 $50^{\circ}C$에서 5분간(分間) 처리(處理)하였을 매 초기(初期) PPO의 활성중(活性中) 85%, 30분간(分間) 처리시(處理時)에는 75%의 잔존활성(殘存活性)을 나타내었다. 4. 본(本) 효소(酵素)의 K값은 2.58mM이었다. 5. 저해제(沮害劑)의 효과(效果) 중 L-cysteine, glutathione, ascorbic acid와 potassium cyanide는 1mM 농도(濃度)에서 완전히 효소활성(酵素活性)을 저해(沮害)하였으나 EDTA는 저해효과(沮害效果)가 대단히 약하게 나타났다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제15권2호
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• pp.158-164
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• 1986

골덴에서 polyphenol oxidase를 추출(抽出) 및 조정제(粗精製)하여 그 성질(性質)을 조사(調査)한 결과(結果)는 다음과 같다. 최적(最適) pH는 6.5, 최적온도(最適溫度)는 $30^{\circ}C$였으며 효소(酵素)의 기질특이성(基質特異性)은 o-diphenol에 높은 활성(活性)을 나타내었다. 저해제(沮害劑)의 효과(效果)는 Cysteine이 가장 효과(效果)가 좋았고 ascorbate와 sodium metabisulfite는 거의 비슷하였으며 EDTA는 아주 낮은 저해효과(沮害效果)를 보였다. 골덴 PPO를 $20^{\circ}C$ 및 $4^{\circ}C$에서 저장(貯藏)했을때 효소활성(酵素活性)의 변화(變化)는 $20^{\circ}C$에서는 초기(初期) 4일(日)째까지 활성(活性)이 급격히 감소(減少)되었으며 $4^{\circ}C$에서는 초기(初期) 2일(日)까지는 활성(活性)의 변화(變化)가 거의 없었으나 3일(日)째 부터는 급격히 감소(減少)하기 시작(始作)하였다. Polyacrylamide disc gel로 전기영동(電氣泳動)한 결과(結果) 4개(個)의 활성(活性) band가 확인(確認)되었고 열(熱) 처리(處理)한 후(後)에는 각각(各各) 3개(個) 및 1개(個)의 활성(活性) band가 관찰(觀察)되었다. 그리고 효소(酵素)의 열(熱) 안정성(安定性)에 있어서 동일(同一) 처리후(處理後)에 잔존활성(殘存活性)이 40% 및 5% 정도(程度)였으므로 각(各) band의 열(熱) 안정성(安定性)은 효소(酵素)의 열(熱) 안정성(安定性)과 거의 일치(一致)하였다.

• 한국작물학회:학술대회논문집
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• 한국작물학회 2005년도 춘계학술발표회 요지
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• pp.112-113
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• 2005

• 한국식품영양과학회지
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• 제45권9호
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• pp.1385-1390
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• 2016

폴리페놀 화합물은 천연에 광범위하게 존재하는 천연 화합물로 과일, 주스, 야채 등에 존재하여 일상생활에서 쉽게 섭취할 수 있으며, 이들 화합물의 건강증진 및 질병 예방 효과로 오랫동안 주목을 받고 있다. 천연물 유래의 항산화 및 항당뇨 개발과 관련하여 많은 연구가 효소 저해, 세포 및 동물실험을 통하여 다양하게 이루어져 왔다. 본 연구는 배유래의 polyphenol oxidase를 이용하여 천연에 존재하는 단순 페놀성 화합물인 gallic acid의 산화 축합반응을 실온에서 1, 3, 5, 7, 10시간 동안 유도하여 얻어진 결과물에 대하여 DPPH 및 $ABTS^+$ 라디칼을 활용한 항산화 활성 및 ${\alpha}$-glucosidase 저해능을 통해 항당뇨 활성을 평가하였다. 먼저 DPPH 라디칼 소거 활성은 gallic acid의 5시간 반응물의 경우, $100{\mu}g/mL$의 농도에서 84.9%의 활성을 나타내어, 양성대조군인 (+)-catechin보다 우수한 활성을 나타내었으며 7시간 및 10시간 반응물의 경우 라디칼 소거 활성이 점차 감소하는 경향을 확인하였다. 또한, $ABTS^+$ 라디칼 소거 활성은 반응 1, 3, 5시간 반응물에서 양성대조군인 (+)-catechin보다 강한 라디칼 소거능을 확인하였으며 7시간 반응물부터는 라디칼 소거 활성이 감소함을 확인하였다. ${\alpha}$-Glucosidase 저해능은 5시간 반응물의 $250{\mu}g/mL$ 농도에서 87.4%의 가장 강한 저해 활성을 나타내었으며, 이 활성은 같은 농도에서 양성대조군인 acarbose의 81.8%보다 강한 활성이었다. 향후 이들 반응을 통하여 생성된 화합물의 대량생산을 통한 물질 분리 및 구조 동정을 통하여 항산화 및 항당뇨 활성과 추가적인 메커니즘 검증을 수행할 필요성이 있다고 생각한다.

• 생약학회지
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• 제20권2호
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• pp.101-109
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• 1989

Purification of polyphenol oxidase(PPO) from Korean native tobacco variety leaves was carried out through the procedure of acetone preciptation, ammonium sulfate fractionation, and Sephadex G-150 gel filtration, resulting in a 84-fold increase in specific activity. The enzyme was stable in a range of pH 7.5 to 8.0 with an optimum of pH 7.5. The optimum temperature for the enzymic reaction was about $60^{\circ}$. It was thermostable with a half-life equal to 20 min at $70^{\circ}$. Km values for (+)-catechin and pyrogallol were $1.6{\times}10^{-3}$ and $0.5{\times}10^{-3}M$, respectively. It possesses high catecholase activity but little or no cresolase activity. Lineweaver-Burk analysis of inhibition data revealed that the inhibition of (+)-catechin oxidation by potassium cyanide, 4-nitrocatechol, cystein and 2-mercaptoethanol was competitive with Ki values of $1.1{\times}10^{-6}$, $1.8{\times}10^{-6}$, $8.9{\times}10^{-6}$ and $1.3{\times}10^{-5}$, respectively.

• Applied Biological Chemistry
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• 제46권1호
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• pp.7-11
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• 2003

감자 polyphenol oxidase의 구리결합지역 DNA와 histidine 다량 함유 인공 펩타이드를 암호화하는 DNA를 대장균 벡터에 각각 클로닝하여 발현시킨 후 대장균 내의 구리함량 증감을 조사하였다. Polyphenol oxidase의 구리결합지역 DNA를 포함하는 PPOCBpET32 벡터를 함유하는 균주의 경우는 벡터를 함유하지 않는 대장균 대조구보다 오히려 구리 함량이 약간 감소하여 약 600ppm의 간을 보여주어, 감자 polyphenol oxidase 구리결합지역의 대장균 내에서의 발현이 구리 함량 증가에 기여하지 못함을 알 수 있었다. 반면에 한 개의 hexahistidine 단위 DNA를 포함하는 pET28a 벡터 함유 대장균 균주를 knamycin 미첨가 배지에서 배양한 경우에는 구리 함량이 약 2,500ppm으로 높게 나타났다. 한편 hexahistidine 9개로 구성된 polyhistidine을 암호화하는 DNA를 포함하는 pET-his 벡터 함유 균주를 kanamycin 미첨가 배지에서 배양한 경우에 구리함량이 약 3,200ppm으로 나타나, 하나의 hexahistidine 단위만 발현하는 균주와 비교하여 구리함량이 약 30% 증가됨을 알 수 있었다.