In this study, we report genetic characterization of Orobanche cumana, the causal agent of sunflower wilting in Serbia. The genetic diversity of this parasitic plant in Serbia was not studied before. Random amplified polymorphic DNA (RAPD) markers and partial rbcL gene sequences analysis were used to characterize the O. cumana populations at the molecular level. While phylogenetic analyses of RAPD-PCR amplicons were performed using unweighted pair-group Method analyses, rbcL gene sequences were analyzed using neigbor joining method and minimum spanning tree. Molecular analyses of RAPD-PCR analysis revealed high genetic diversity of O. cumana populations which indicated high adaptive potential of this parasitic weed in Serbia. Further analyses of rbcL gene using minimum spanning tree revealed clear differences among diverse sections of Orobanche genus. Although this molecular marker lacked the resolution to display intrapopulation diversity it could be a useful tool for understanding the evolution of this parasitic plant. Our results suggested that O. cumana has great genetic potential which can lead to differentiation of more virulent races which is important for determining crop breeding strategies for their control.
Kim, Jong-Rae;Jung, Chang-Ho;Kim, Yong-Ho;Yoon, Jong-Man
Development and Reproduction
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v.10
no.4
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pp.227-238
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2006
Genomic DNAs(gDNAs) were isolated from the venus clam(Gomphina aequilatera) from Samcheok(venus clam from Samcheok; VCS) and Wonsan(venus clam from Wonsan; VCW) located in the East Sea of the Korean Peninsula. The amplified products were generated by agarose gel electrophoresis(AGE) with oligonucleotides primer, detected by staining with ethidium bromide and viewed by ultraviolet ray. The seven arbitrarily selected primers BION-21, BION-23, BION-25, BION-27, BION-29, BION-31 and BION-33 generated the shared loci, polymorphic, and specific loci, with the molecular sizes ranging from 150 bp to 2,400 bp. In this study, 147 polymorphic loci(147/954 loci, 15.41%) in VCS population and 274(274/996 loci, 27.51%) in VCW population were generated with seven primers. These results suggest the genetic variation in VCW population is higher than in VCS population. Especially, the 700 bp bands generated by the primer BION-21 were identified commonly in two Gomphina populations, which identified populations and/or species. This specific primer was found to be useful in the identification of individuals and/or population, resulting from the different DNA polymorphism among individuals/species/population. Two Gomphina populations between the individual SAMCHEOK no. 03 and WONSAN no. 22 showed the longest genetic distance(0.696) in comparison with other individuals used. The complete linkage cluster analysis indicating three genetic groupings and dendrogram revealed close relationships among individual identities within two geographical populations of venus clam(G. aequilatera) from the Samcheok and Wonsan. The intra-species classification and clustering analyses inferred from molecular markers supported the traditional taxonomy of the species based on morphological characters such as shell size, shape and color. Accordingly, as mentioned above, RAPD analysis showed that VCS population was more or less separated from VCW population.
This study was conducted to find a useful marker for gene polymorphism analysis using Microsatellite marker (MS marker) in Gyeongju Donggyeong dog. Twenty three MS marker analyzed the genetic features of DNA using 100 Gyeongju Donggyeong dogs in Gyeongju area. It was performed multiplex PCR with 3 set primer divided 9, 10 and 4 by analysis of conditions among MS markers. The results were calculated heterozygosity, polymorphic information content (PIC), allele frequency and number of allele at each locus using Microsatellite Toolkit software and Cervus 3.0 program. Total 148 alleles were genotyped to determine and average 6.43 alleles was detected. FH3381 had the highest of 15 alleles and FH2834 had the lowest of 2 alleles. Expected heterozygosity had a wide range from 0.282 to 0.876 and had average value of 0.6496. Also, Observed heterozygosity had a more wide range from 0.200 to 0.950 and had average value of 0.6404. PIC had range from 0.262 to 0.859 and average PIC was calculated 0.606. Especially, FH2998 represented the highest rate of observed heterozygosity of 0.950 and FH3381 represented the highest rate of expected heterozygosity of 0.876 and PIC of 0.859. The use of these markers was considered to be useful to study genetic traits of Gyeongju Donggyeong dog.
Carthamus tinctorius L. (Compositae) is an herb primarily distributed throughout in the world. The species is regarded as ecologically important in the world. Safflower was used for medicines, as well as making red (carthamin) and yellow dyes. We have used the RAPD technique to investigate the phylogenetic relationships and genetic diversity of C. tinctorius. We obtained 123 bands from all the 26 cultivars. The average number of bands was 9.5 per primer. The genetic diversity of safflower is found among cultivars and there is a high among-cultivar differentiation. The OPC18-01 band is the specific marker for Syria cultivar, whereas no products were detected in individuals from other country cultivars. We found seven phenetic bands for determining the specific marker of cultivars with SCAR markers. Though the number of individuals sampled for analysis was small and probably not fully representative of the total available diversity in C. tinctorius, this study demonstrates that the regions (Morocco, Syria, and Turkey) of the Mediterranean Sea were more variable than other regions with the exception of India. In this result, although only simple result of RAPD is difficult to assert the center of species diversity of C. tinctorius, the regions of the Mediterranean Sea may be the most probable candidate for the origin of safflower. India was also the candidate of the center or secondary center of species diversity of C. tinctorius. RAPD markers were effective in classifying cultivar levels of safflower.
Kim, Ho Bang;Lim, Sanghyun;Kim, Jae Joon;Park, Young Cheol;Yun, Su-Hyun;Song, Kwan Jeong
Journal of Plant Biotechnology
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v.42
no.4
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pp.326-335
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2015
Citrus is an economically important fruit tree with the largest amount of fruit production in the world. It provides important nutrition such as vitamin C and other health-promoting compounds including its unique flavonoids for human health. However, it is classified into the most difficult crops to develop new cultivars through conventional breeding approaches due to its long juvenility and some unique reproductive biological features such as gamete sterility, nucellar embryony, and high level of heterozygosity. Due to global warming and changes in consumer trends, establishing a systematic and efficient breeding programs is highly required for sustainable production of high quality fruits and diversification of cultivars. Recently, reference genome sequences of sweet orange and clementine mandarin have been released. Based on the reference whole-genome sequences, comparative genomics, reference-guided resequencing, and genotyping-by-sequencing for various citrus cultivars and crosses could be performed for the advance of functional genomics and development of traits-related molecular markers. In addition, a full understanding of gene function and gene co-expression networks can be provided through combined analysis of various transcriptome data. Analytic information on whole-genome and transcriptome will provide massive data on polymorphic molecular markers such as SNP, INDEL, and SSR, suggesting that it is possible to construct integrated maps and high-density genetic maps as well as physical maps. In the near future, integrated maps will be useful for map-based precise cloning of genes that are specific to citrus with major agronomic traits to facilitate rapid and efficient marker-assisted selection.
Ryu, Jaihyunk;Kwon, Soon-Jae;Kim, Dong-Gun;Lee, Min-Kyu;Kim, Jung Min;Jo, Yeong Deuk;Kim, Sang Hoon;Jeong, Sang Wook;Kang, Kyung-Yun;Kim, Se Won;Kim, Jin-Baek;Kang, Si-Yong
Journal of Plant Biotechnology
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v.44
no.4
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pp.416-430
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2017
The kenaf plant is used widely as food and in traditional folk medicine. This study evaluated the morphological characteristics, functional compounds, and genetic diversity of 32 kenaf cultivars from a worldwide collection. We found significant differences in the functional compounds of leaves from all cultivars, including differences in levels of chlorogenic acid isomer (CAI), chlorogenic acid (CA), kaempferol glucosyl rhamnoside isomer (KGRI), kaempferol rhamnosyl xyloside (KRX), kaemperitrin (KAPT) and total phenols (TPC). The highest TPC, KAPT, CA, and KRX contents were observed in the C22 cultivars. A significant correlation was observed between flowering time and DM yield, seed yield, and four phenolic compounds (KGRI, KRX, CAI, and TPC) (P < 0.01). To assess genetic diversity, we used 80 simple sequence repeats (SSR) primer sets and identified 225 polymorphic loci in the kenaf cultivars. The polymorphism information content and genetic diversity values ranged from 0.11 to 0.79 and 12 to 0.83, with average values of 0.39 and 0.43, respectively. The cluster analysis of the SSR markers showed that the kenaf genotypes could be clearly divided into three clusters based on flowering time. Correlations analysis was conducted for the 80 SSR markers; morphological, chemical and growth traits were found for 15 marker traits (corolla, vein, petal, leaf, stem color, leaf shape, and KGRI content) with significant marker-trait correlations. These results could be used for the selection of kenaf cultivars with improved yield and functional compounds.
Proceedings of the Korean Society of Crop Science Conference
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2017.06a
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pp.92-92
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2017
Bakanae disease is one of the most serious and oldest problems of rice production, which was first described in 1828 in Japan. This disease has also been identified in Asia, Africa, North America, and Italy. Germinating rice seeds in seed boxes for mechanical transplantation has caused many problems associated with diseases, including bakanae disease. Bakanae disease has become a serious problem in the breeding of hybrid rice, which involves the increased use of raising plants in seed beds. The indica rice variety Shingwang was selected as resistant donor to bakanae disease. One hundred sixty nine NILs, YR28297 ($BC_6F_4$) generated by five backcrosses of Shingwang with the genetic background of susceptible japonica variety, Ilpum were used for QTL analysis. Rice bakanae disease pathogen, CF283, was mainly used in this study and inoculation and evaluation of bakanae disease was performed with the method of the large-scale screening method developed by Kim et al. (2014). SSR markers evenly distributed in the entire rice chromosomes were selected from the Gramene database (http://www.gramene.org), and the polymorphic markers were used for frame mapping of a $BC_5F_5$ resistant line. Here, we developed 168 near-isogenic rice lines (NILs, $BC_6F_4$) to locate a QTL for resistance against bakanae disease. The lines were derived from a cross between Shingwang, a highly resistant variety (indica), and Ilpum, a highly susceptible variety (japonica). The 24 markers representing the Shingwang allele in a bakanae disease-resistant NIL, YR24982-9-1 (parental line of the $BC_6F_4$ NILs), were located on chromosome 1, 2, 7, 8, 10, 11, and 12. Single marker analysis using an SSR marker, RM9, showed that a major QTL was located on chromosome 1. The QTL explained 65 % of the total phenotype variation in $BC_6F_4$ NILs. The major QTL designated qBK1 was mapped in 91 kb region between InDel15 and InDel21. The identification of qBK1 and the closely linked SSR marker, InDel18, could be useful for improving rice bakanae disease resistance in marker-assisted breeding.
Yi, Jae-Seon;Cheong, Eun-Ju;Moon, Heung-Kyu;Dale, Glenn T.;Teasdale, Robert D.
Journal of Forest and Environmental Science
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v.11
no.1
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pp.81-101
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1995
Random amplified polymorphic DNA (RAPD) technology, a recent approach in molecular genetics, is much usable to select the elite trees and to maximize the genetic gain in forest tree breeding program, providing a clue to determine the genetic marker-trait correlation. This review intorduces research on bark thickness and breeding strategy in Pinus elliottii, Pinus caribaea and their hybrid by Queensland Forest Service and ForBio Research Pty Ltd, University of Queensland, which employ RAPD technology. Genetic linkage map of $F_1$ hybrids includes 186 RAPD markers and 16 linkage groups (1641 cM long in total) and 6 quantitative trait loci are located putatively for bark thickness. Following recent research results and experiences in pine breeding programs, the forseeable stages in the application and development are proposed for marker assisted selectin; stage 1-determination of species specific markers for genes controlling traits of commercial interest, and stage 2-determination of marker-allele association for specific allelic variants within pure species. As pines inherit their megagametophytes from the seed parent and zygotic embryos from both male and female parents, the determination of marker-trait correlation is possible even in embryo stage, eventually making ways for the early selection of elite individuals.
The objective of this study was carried out to evaluate the suitability of simple sequence repeat (SSR) markers for genetic diversity assessment and identification of rice varieties. The 23 primers selected from 50 SSR primers showed polymorphisms in the 21 rice varieties. The 2 to 9 SSR alleles were detected for each locus with an average of 3.00 alleles per locus. The polymorphism information content (PIC) ranged form 0.091 to 0.839. Based on band patterns, UPGMA cluster analysis was conducted. These varieties were separate into 4 groups corresponding to rice ecotype and pedigree information and genetic distance of cluster ranging from 0.59 to 0.92. The 4 SSR primer sets (RM206, RM225, RM418, RM478) selected form 23 polymorphic primers were differentiated all the rice variety from each other by markers genotypes. These markers may be used wide range of practical application in variety identification of rice.
Rice blast (Magnaporthe oryza B.) is one of the most important diseases in rice that causing great yield losses every year around the world. It is important to screen valuable genetic resources for improving blast resistance. This study was conducted to identify the blast resistance in 279 Korean rice landraces using blast nursery tests and isolate inoculum screening. The results showed that 11 landrace accessions found to be resistant to rice blast in blast nursery and inoculation screening tests and the degree of lesions in most accessions showed that they were susceptible to reactions. In order to find the distribution of blast resistant genes, a molecular survey was conducted to identify the presence of major blast resistance (R) gene in 279 Korean landraces. The results revealed that their frequency distribution was Pik-m (36.2%), Piz (25.4%), Pit (13.6%), and Pik (10%). Besides, the frequency distribution of Piz-t, Pii, Pik-m/Pik-p, Pi-39(t), Pib, Pi-d(t)2, Pita/Pita-2 and Pi-ta genes were identified as less than 10%. The results did not consist with the reactions against blast diseases between genotypes and phenotypic part of the nursery tests and isolate inoculation. For concluding these results, we used genome-wide SSR markers that have closely been located with resistance genes. The PCoA analysis showed that the landrace accessions formed largely two distinct groups according to their degree of blast resistance. By comparing genetic diversities using polymorphic information contents (PIC) value among the resistant, total and susceptible landraces, we found that PIC values decreased in four SSR markers and increased in six markers in the resistant accessions, which showed contrary to total and susceptible groups. These regions might be linked to resistance alleles. In this study, we evaluated the degree of blast resistance and the information about the distribution of rice blast resistant genes in Korean rice landraces. This study might be the basis for association analysis of blast resistance in rice.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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