The work reported here is an attempt to explore the possibility of DNA microsatellite loci transfer (cross-species amplification) to other economically important aquacultured catfish species other than its source species. A total of 25 new microsatellite loci developed for riverine catfish, Mystus nemurus were successfully cross-amplified in two distantly related catfish species within the suborder Siluroidei. Five out of the 19 loci that successfully cross-amplified in Pangasius micronemus were polymorphic, while for Clarias batrachus, cross-amplification was successful using 17 polymorphic loci. The observed heterozygosities were high for all the three catfishes. The results indicated that microsatellite loci could be as polymorphic in non-source species as in the source species.
Moniem, Hebatallah Abdel;Zong, Yang Yao;Abdallah, Alwasella;Chen, Guo-hong
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제32권11호
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pp.1664-1672
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2019
Objective: This study aimed to measure genetic diversity and to determine the relationships among fourteen goose breeds. Methods: Microsatellite markers were isolated from the genomic DNA of geese based on previous literature. The DNA segments, including short tandem repeats, were tested for their diversity among fourteen populations of geese. The diversity was tested on both breeds and loci level and by mean of unweighted pair group method with arithmetic mean and structure program, phylogenetic tree and population structure were tested. Results: A total of 108 distinct alleles (1%) were observed across the fourteen breeds, with 36 out of the 108 alleles (33.2%) being unique to only one breed. Genetic parameters were measured per the 14 breeds and the 9 loci. Medium to high heterozygosity was reported with high effective numbers of alleles (Ne). Polymorphic information contents (PIC) of the screened loci was found to be highly polymorphic for eleven breeds; while 3 breeds were reported moderately polymorphic. Breeding coefficient ($F_{IS}$) ranged from -0.033 to 0.358, and the pair wise genetic differentiation ($F_{ST}$) ranged from 0.01 to 0.36 across the fourteen breeds; for the 9 loci observed and expected heterozygosity, and Ne were same as the breeds parameters, PIC of the screened loci reported 6 loci highly polymorphic and 3 loci to be medium polymorphic, and $F_{IS}$ ranged from -0.113 to 0.368. In addition, genetic distance estimate revealed a close genetic distance between Canada goose and Hortobagy goose breeds by 0.04, and the highest distance was between Taihu goose and Graylag goose (anser anser) breed by 0.54. Conclusion: Cluster analyses were made, and they revealed that goose breeds had hybridized frequently, resulting in a loss of genetic distinctiveness for some breeds.
An enrichment library of GATA-repeats from genomic DNA was constructed in this study to isolate and characterize microsatellite loci in Tsaiya duck (Anas platyrhynchos). Thirty-three microsatellite markers were developed and used to detect polymorphisms in 30 Tsaiya ducks. A total of 177 alleles were observed and all loci except APT022 were polymorphic. The number of alleles ranged from 2 to 9 with an average of 5.5 per microsatellite locus. The observed and expected heterozygosity of these polymorphic markers ranged from 0.07 to 0.93 with an average number of 0.60 and 0.10 to 0.86 with an average number of 0.61, respectively. Among the polymorphic markers, the observed heterozygosities of 23 loci were higher than 0.50 (69.70%). The polymorphism information content (PIC) in the 32 loci ranged from 0.09 to 0.83 with an average of 0.57. Seven of the 33 duck microsatellite loci had orthologs in the chicken genome, but only APT004 had a similar core repeat to chickens. These microsatellite markers will be useful in constructing a genetic linkage map for the duck and a comparative mapping with the chicken can also provide a valuable tool for studies related to biodiversity and population genetics in this duck species.
한국의 예산과 당진에서 각각 채취된 붕어 (Carassius auratus)와 떡붕어 (Carassius cuvieri)로부터 genomic DNA를 분리 추출하여 반복해서 PCR로 증폭시켰다. 선택된 7개의 RAPD primer를 이용하여 primer 당 total loci, shared loci by each species, polymorphic 및 specific loci를 얻어냈다. 2종의 붕어로부터 primer와 2지역간에 banding patterns의 복잡성이 두드러지게 나타났다. DNA fragment의 분자적 크기는 150bp에서부터 1,600bp까지 커다란 차이를 나타내었다. 본 연구에서 CCY 붕어 종에서는 458개의 loci가 나타났고, CCD 떡붕어 종에서는 358개의 loci가 확인되었다. 또한 CCY 붕어 종에서는 84개의 polymorphic loci (18.3%)가 확인되었고, CCD떡붕어 종에서는 48개의 polymorphic loci (13.4%)가 확인되었다. CCY 붕어 종에서는 154개의 shared loci가 나타났으며, 이는 primer당 평균적으로 22개의 loci로 확인되었다. 또한 CCD떡붕어 종에서는 187개의 shared loci가 확인되었고, 평균해서 primer 당 26.7개의 loci가 나타났다. CCY붕어 종과 CCD 떡붕어 종의 polymorphic loci는 각각 84개와 48개로 확인되었다. 모든 붕어와 떡붕어 시료의 평균적인 BS value를 기초로 해서 CCY 붕어 종의 similarity matrix를 조사해 본 결과 0.434로부터 0.868까지 나타났고, CCD 떡붕어 종의 값은 0.449로부터 0.924까지 확인되었다. CCY 붕어 종내의 평균적인 BS value는 0.641±0.013이고, CCD 떡붕어 종내의 BS value의 평균값은 0.684±0.013을 나타내었다. 결과적으로 CCD 떡붕어 종내의 개체의 BS value 평균값이 CCY 붕어 종내의 평균값보다 높게 나타났다. 2 붕어와 떡붕어간의 평균적인 BS value은 0.484±0.007 (0.307~0.682)를 나타내었다. 7개의 primer를 사용하여 얻어진 dendrogram은 cluster 1 (AURATUS no. 01~AURATUS no. 11), cluster 2 (CUVIERI no. 12~CUVIERI no. 21) 및cluster 3 (CUVIERI no. 22)와 같이 3개의 유전적 클러스터로 나뉘어졌다. CCY 붕어 종내의 8번째 개체 (AURATUS no. 08)와 9번째 개체 (AURATUS no. 09) 사이가 가장 가까운 유전적 관계 (0.064)를 나타내었다. 또한 CCY붕어 종의 11번째(AURATUS no. 11)와 CCD떡붕어 종의 17번째 (CUVIERI no. 17) 사이가 가장 먼 유전적 거리 (0.477)를 나타내었다. 결과적으로 볼 때 한국 및 대서양산 lobster (0.612), 갈치 (0.708), 동자개(0.714)에 비해서 상대적으로 낮은 유전적 거리를 나타내었다.
This study was carried out to clarify the genetic constitution of biochemical polymorphic loci controlling blood protein and enzymes as genetic rnarkers in Korean native chicken(KNG) population Blood samples were collected from 230 KNG representing three colored-lines(reddish-, yellowish- and blackish- brown) raised in Daejeon branch of National Livestock Research Institute. Eight blood marker loci, transferrin(Tf), post-albumin(Pas), albumin(Alb), amylase-1(Arny-1), es-terase-1(Es-1), alkaline phosphatase(Akp), catalase(Cat) and hemoglobin(Hh) were analyzed by using starch, agarose and polyacrylamide gel electrophoresis. Based on the gene frequencies of polymorphic marker loci, the genetic characteristics of KNF population was analyzed, and the genetic ariability within population was quantified. The genetic relationships between KNC and other native fowls or improved breeds were also estimated. The gene frequencies of Tf, Pas and AIb loci were similar to those of improved breeds among the seven biochemical polymorphic loci, while gene frequencies of Cat and Es-i loci were remarkably different between KNC and improved breeds. Gene frequencies of amy-i and Akp loci were similar to those of New Hampshire and Rhode Island Red and White Leghorn, respectively. However in comparison with other improved breeds, great differences were observed in gene frequencies of these loci The average heterozygosity, effective number of alleles and homogeneity index for the seven loci combined were estimated to be .334, 1.639 and .373, respectively. Based on the dendrogram and genetic distances, the KNC was genetically closer to New Hampshire, Plymouth Rock and Rhode Island Red breeds than to the White Leghorn breed.
RAPD 분석을 하기 위해서 우리나라 내륙의 충주지역과 서해에 인접한 당진지역에서 빙어 (Hypomesus nipponensis)의 두 지리적 집단으로부터 genomic DNA 를 분리 추출하였다. OPB-06, OPB-10, OPB-13, OPB-17, OPC-09, OPC-17 및 OPC-20의 7개 primer를 사용하여 shared loci, polymorphic 및 specific loci를 확인하였다. 충주 빙어집단에서는 한 primer 당 383개의 loci가 관찰되었고, 당진 집단에서는 287개의 loci가 확인되었다. 관찰된 loci 중에 23.8%에 해당되는 91개의 polymorphic loci가 충주 집단에서 확인되었고, 당진 집단에서는 47 (16.4%)개가 확인되었다. 각 집단에서 공유하는 loci의 수는 각각 충주 빙어집단에서 198개 그리고 당진 집단에서는 176개로 관찰되었다. 충주 빙어집단과 당진 집단에서는 각각 44개와 75개의 specific loci가 나타났다. 특히 두 집단이 공유하는 loci의 수는 99개로서 primer 당 평균 14.1개로 확인되었다. 두 빙어 집단의 bandsharing value의 평균값은 $0.700{\pm}0.008$로서 0.600에서 0.846의 범위를 나타내었다. 각각을 비교해 보면, 충주 집단에 속한 개체의 bandsharing value의 평균값이 당진 집단에서의 값보다 높게 나타났다. 7개의 primer를 사용하여 얻어진 dendrogram은 cluster 1 (CJ 01, 02, 03, 04, 05, 06, 07, 08, 09, 10 및 11), cluster 2 (DJ 01, 02, 03, 04, 05, 06, 07, 08 및 09) 및 cluster 3 (DJ 10 및 11)와 같이 3개의 유전적 클러스터로 나뉘어졌다. 두 집단의 유전적 거리는 0.040에서 0.545 사이로 나타났다. 따라서 RAPD-PCR 분석을 통해서 빙어 두 집단의 유의성이 있는 유전적 거리를 확인하였다.
Ficus deltoidea Jack is an important and popular medicinal plant species found in the Malaysia. Plants are being collected and used based on morphology and authentication to prevent adulteration is not in practice. In this study, twenty-six accessions of F. deltoidea Jack were collected from Kelantan and Terengganu states of Peninsular Malaysia to examine their genetic similarities and differences using randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) technique. Out of 20 arbitrary primers, two primers (D-10 and D-11) were selected which produced reliable DNA polymorphism. D-10 and D-11 primers generated 138 RAPD bands ranging from 250 bp to 3000 bp. Ninety-nine of them were polymorphic loci (72%) and thirty-nine were nonpolymorphic loci (28%). A total of 56 bands with polymorphic loci were amplified with primer D-10 and analyzed by cluster analysis and UPGMA to present a dendrogram depicting the degree of genetic relationship among 26 accessions. Eight RAPD markers were sequenced to determine their identity. RAPD analysis showed the genetic diversity among 26 accessions of F. deltoidea Jack. The RAPD profile and RAPD marker sequences reported in this paper could be used in plant and/or plant material authentication. This study also suggested that RAPD can be a useful technique to study DNA polymorphism in F. deltoidea Jack.
Kim, Woo-Jin;Kim, Kyung-Kil;Lee, Jeong-Ho;Park, Doo-Won;Park, Jung-Youn;Lee, Jong-Yun
한국양식학회:학술대회논문집
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한국양식학회 2003년도 추계학술발표대회 논문요약집
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pp.20-20
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2003
We described the isolation, characterization and inheritance of twenty-seven microsatellite loci from olive flounder, Paralichthys olivaceus. All loci were found to be polymorphic, and had between five and 22 alleles with observed heterozygosity ranging from 0.161 to 1.0 in 31 individuals examined. Allele segregation patterns of all loci in controlled crosses of flounder were studied to assess the inheritability. Allele of all but 3 loci were segregated according to Mendelian transmission. However, 3 loci had a possibility of scoring errors of heterozygous individuals caused by unreproducible PCR amplification of a particular allele. 24 microsatellite loci are likely to be useful for studies of genome mapping, mating systems and population genetics in this species.
In an attempt to reveal the interrelationship between fowls of jungle and native origin, their gene constitutions were compared using gene frequencies at the 16 loci controlling blood protein variations. Of the 16 loci analysed by electrophoresis, polymorphism was detected at following seven loci: Es-1, Amy-1, Akp-akp, Akp-2, Alb, Tf and 6-PGD. The other nine loci: Amy-3, Es-D, PGM, PHI, MDH, To, LDH, Hb-1 and Hb-2, were noted to be monomorphic. Genetic distance between pairs of native fowl and jungle fowls was estimated by a numerical taxonomic method. The Indonesian native fowl was genetically close to the Indonesian red jungle fowl, and the grey jungle fowl was genetically similar to the Ceylonese jungle fowl. It was also suggested that the green jungle fowl was genetically remote from the other jungle fowls and from the Indonesian native flow. The proportion of polymorphic loci (Ppoly), the expected average heterozygosity per individual $\bar{H}$, and the effective number of alleles per locus (Ne) were calculated to evaluate the genetic variabilities in the native and jungle fowls. The Indonesian native fowl exhibited slightly higher the proportion of polymorphic loci than the jungle fowls.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제45권2호
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pp.49-55
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2022
A total of 20 mulberry varieties preserved in Korea were typed for eight polymorphic microsatellite loci. We obtained 6 to 15 alleles per locus with an average value of 10.6, per-locus observed heterozygosity ranging from 0.35 to 1.00, and per-locus polymorphic information content (PIC) ranging from 0.61 to 0.87, indicating that most loci are highly variable. Phylogenetic analysis using the eight microsatellite loci was sufficiently suitable for classifying 20 mulberry varieties preserved in Korea. A total of 160 variety-specific apomorphic alleles were obtained from eight loci discriminated 20 mulberry varieties. These variety-specific alleles from this analysis are expected to be useful for the discrimination of other mulberry varieties. Furthermore, a substantial number of homozygote loci, represented by 60 among 180 alleles in eight loci were found. These results collectively suggest that these microsatellite locus primers are potentially crucial molecular markers for the eventual classification of mulberry varieties that are preserved as hundreds in Korea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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