Polyphenol oxidase (PPO) activity in 200×g (cell wall), 4,000×g (plastid), 100,000×g (mitochondrial) and soluble fractions of the perilla leaves was monitored in the upper, middle and lower sections of the plant. In the course of plant growth, PPO activities in plastid and mitochondrial fractions were decreased, while those in cell wall fraction were maintained. During growing process, specific activities and PPO activities of each fraction were decreased, while total phenol content were decreased in middle (middle) and then increased in later stage (lower). Cell wall, plastid, mitochondrial (pellet) and soluble fraction had slightly different pH optima and substrate specificities. Isoenzyme patterns were identical in two bands for PPO activity in different subcellular fractions. Their molecular weights were 37KD and 48KD respectively.
The plastid inclusion has long been known to exist in leaves of numerous plant species, especially in those of flowering plants. Among the inclusions, crystalline bodies are the most frequently distinguished structures of the foliar plastids, however, microtubules and phytoferritins are also reported occasionally. The crystalline inclusions vary in shape, and are located either in the stroma or within intrathylakoidal spaces, whereas microtubules and phytoferritins are more uniform in shape and are formed in the stroma. In crystalline structures, the composing elements exhibit a lattice pattern and/or paralleled tubules that are either bounded by membranes or exist without membrane enclosing. Other types of inclusions have not been shown to be enclosed by any membranous structures. According to the current survey, the plastid inclusion, with the exception of phytoferritins, has been shown to exhibit a crystalline or tubular pattern, and has been reported in more than 56 species of various families. Their occurrence is not restricted to any photosynthetic pathway, but is found to be randomly distributed among C-3, C-4 and CAM species, without phylogenetic relationships. The progress in plastid inclusion research reveals more information about the function and complexity, but the need for characterizing the 3-D structure of the crystalline inclusions also has been acknowledged in previous studies. A 3-D characterization would utilize tilting and tomography of serial sections with appropriate image processing that would provide valuable information on the sub-structures of the crystalline inclusions. In fact, recent studies performed on 3-D reconstruction of the plastid inclusions revealed important information about their comprising elements. In this article, the crystals and microtubules that have been reported in various types of plastids have been reviewed, with special consideration given to their possible sub-cellular function within the plastids.
CHAI, Youn Kyung;KIM, Kyong Ho;YEO, Up Dong;SAKURAI Naoki
Korean Journal of Plant Tissue Culture
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v.25
no.6
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pp.477-485
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1998
To underatand in vitro regulation of differentiation, the effects of growth regulators and nitrogen source on metabolism of cell wall polysaccharides in suspension culture of kidney bean (Phaseolus vulgaris L.) were investigated. The suspension cells (cell clusters) were directly induced from the epicotyl segments of the seedlings, which were cultivated in MS medium supplemented with 1.0mg/L of 2,4-D and 0.5 mg/L of kinetin. When compared with cell wall sugar contents of the epicotyl segments, the cellulose content of the suspension-cultured cells decreased; while the pectin and hemicellulose content increased; suggesting increases of rhamnogalacturonan I and arabinogalactan IIduring the dedifferentiation, respectively, The effects of growth regulators(2,4-D, 1.0mg/L and kinetin, 0.5mg/L) and nitrogen source (potasium nitrate, 19.0mg/L and ammonium nitrate, 16.5 g/L) in the medium on the proliferation and the turnover of the cell wall polysaccharides were investigated for 30 days. In the medium with growth regulators and without nitrogen source, the proliferation rate was extremely high (16 folds). Growth regulators and nitrogen source increased the pectin content. Analysis of neutral sugar composition of pectin fraction showed that nitrogen source enhanced rhamnose level remarkably, suggesting that rhamnogalacturonan I was the one most likely synthesized. In hemicellulose fraction, growth regulators reduced arabinose level, suggesting that arabinogalactan II was degraded. And nitrogen source reduced galactose level, suggesting that xyloglucan was also degraded.
To investigate the gene rearrangement via short repeated sequences in chloroplast DNA, the pattern of heterologous gene clusters containing the 151 bp repeated sequence with the development of plastid was compared in rice and the homologous gene clusters from various plant sources were searched for comparative analysis. Southern blot analysis of rice DNA using rp12 gene containing 151 bp repeated sequence as a probe showed the presence of heterologous gene clusters. Such heterologous gene clusters varied with the development of plastid. Also it was observed that the heterologous gene clusters were observed in all of the rice cultivars used in this work. Finally the comparative analysis of DNA sequence of the homologous gene clusters from various plants showed the evolutionary gene rearragngement via short repeated sequence among plants. These results suggest the possible relationship between the plastid development and gene rearrangement through short repeated sequences.
Developmental changes of chlorophyll-protein complexes (CPs) and plastid membrane proteins in greening mung bean cotyledons and the effect of spermine therein were examined by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The changes in the amounts of CPs became larger with the progress of greening and light-harvesting chlorophyll a/b protein (LHCP) was the main CP in the early greening stage up to f h. As the greening proceeded, chlorophyll-protein of the photosystem I (CPI) accumulated. Application of spermine were effective in accumulating CPs of the thylakoid membrane in the early phase of greening. In the profiles of the plastid membrane proteins, quantitative and qualitative changes were observed with the onset of greening up to 72 h. 56 kD protein of major intensity was observed in all greened chloroplasts and 24 kD protein increased remarkablly in both control and spermine-treated cotyledons. The thylakoids from spermine-treated cotyledons showed hither amounts of thylakoid proteins as compared to the controls. The results suggest that spermine may play a role in the regulation of plastid development and stabilizes the membrane function during greening.
Developmental changes of chlorophyll-protein complexes (CPs) and plastid membrane proteins in greening mung bean cotyledons and the effect of spermine therein were examined by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The changes in the amounts of CPs became larger with the progress of greening and light-harvesting chlorophyll a/b protein (LHCP) was the main CP in the early greening stage up to f h. As the greening proceeded, chlorophyll-protein of the photosystem I (CPI) accumulated. Application of spermine were effective in accumulating CPs of the thylakoid membrane in the early phase of greening. In the profiles of the plastid membrane proteins, quantitative and qualitative changes were observed with the onset of greening up to 72 h. 56 kD protein of major intensity was observed in all greened chloroplasts and 24 kD protein increased remarkablly in both control and spermine-treated cotyledons. The thylakoids from spermine-treated cotyledons showed hither amounts of thylakoid proteins as compared to the controls. The results suggest that spermine may play a role in the regulation of plastid development and stabilizes the membrane function during greening.
Field experiment was conducted to get the basic information about the difference in color and plastid pigments at the different stage of harvest of flue-cured tobacco cultivated in paddy field, and compared to upland ones. All tested crops were primed in lots of 3 to 4 at each priming, beginning at the bottom of the plant. Leaf pigments and chromatic values of tobacco leaves were determined in samples collected at weekly intervals, and according to analyses obtained from 4 stalk positions. By the degree of maturity, leaves harvested were separated with visual characters into four classes of immature, mature, ripe and mellow. regardless of stalk position, chlorophyll contents was higher in the order of immature > mature > ripe > mellow, respectively. In fresh leaves, chlorophyll levels was higher with ascending stalk position. chlorophyll a and b in cured leaves were less than 10% of the amount present at harvest, and it was estimated that maturity condition also influenced the rates of degradation of plastid pigments. Fully mature leaves of upland diverted from paddy field showed slightly higher in chlorophyll contents than in those of upland tobacco ones but somewhat lowered in $L^*$ and $b^*$ values, and there was no difference in $a^*$ value.
Proceedings of the Botanical Society of Korea Conference
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1985.08b
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pp.35-48
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1985
Plastids, which are organelles unique to plant cells, bear their own genome that is organized into DNA-protein complexes (nucleoids). Regulation of gene expression in the plastid has been extensively investigated because this organelle plays an important role in photosynthesis. Few attempts, however, have been made to characterize the regulation of plastid gene expression at the chromosomal structure, using plastid nucleoids. In this report, we summarize the recent progress in the characterization of DNA-binding proteins in plastids, with special emphasis on CND41, a DNA binding protein, which we recently identified in the choloroplast nucleoids from photomixotrophically cultured tobacco cells. CND41 is a protein of 502 amino acids which consisted of a transit peptide of 120 amino acids and a mature protein of 382 amino acids. The N-terminal of the 'mature' protein has lysine-rich region which is essential for DNA-binding. CNA41 also showed significant identities to some aspartyl proteases. Protease activity of purified CND41 has been recently confirmed and characterized. On the other hand, characterization of accumulation of CND41 both in wild type and transgenic tobacco with reduced amount of CND41 suggests that CND41 is a negative regulator in chloroplast gene expression. Further investigation indicated that gene expression of CND41 is cell-specifically and developmentally regulated as well as sugar-induced expression. The reduction of CND41 expression in transgenic tobacco also brought the stunted plant growth due to the reduced cell length in stem. GA3 treatment on apical meristem reversed the dwarf phenotype in the transformants. Effects of CND41 expression on GA biosynthesis will be discussed
Kim, Il Ryong;Yoon, A-Mi;Lim, Hye Song;Lee, Sunghyeon;Lee, Jung Ro;Choi, Wonkyun
Proceedings of the National Institute of Ecology of the Republic of Korea
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v.3
no.4
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pp.212-220
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2022
DNA markers have been studied and used intensively to identify plant species based on molecular approaches. The genus Medicago belongs to the family Fabaceae and contains 87 species distributed from the Mediterranean to central Asia. Five species of Medicago are known to be distributed in South Korea; however, their morphological characteristics alone cannot distinguish the species. In this study, we analyzed the phylogenetic relationships using collected five species of Medicago from South Korea and 44 taxa nucleotide information from NCBI. The constructed phylogenetic tree using gibberellin 3-oxidase 1 and tRNALys (UUU) to maturase K gene sequences showed the monophyly of the genus Medicago, with five species each forming a single clade. These results suggest that there are five species of Medicago distributed in South Korea. In addition, we designed polymerase chain reaction primers for species-specific detection of Medicago by comparing the plastid sequences. The accuracy of the designed primer pairs was confirmed for each Medicago species. The findings of this study provide efficient and novel species identification methods for Medicago, which will assist in the identification of wild plants for the management of alien species and living modified organisms.
Eighteen cultivars of tomato were tested for their regeneration response. Lycopersicon esculentum cv. 2001-58 showed a very high frequency of regeneration (93%). We evaluated the effect of two compounds with known antioxidant activity (ascorbic acid and cystein). The use of ascorbic acid ($200\;-\;300\;{\mu}M/L$) has a positive effect on shoot regeneration. To develope a system for plastid transformation in tomato via homologous recombination, we constructed the tomato plastid expression vector (pKRT22-AG) harboring 2.2 kb flanking sequences cloned from intact plastid genome and gfp gene. To investigate the factors affecting the delivery system of the pKRT22-AG into chloroplast using bombardment, We assessed the optimal DNA concentration, gold particle volume and target distance. Expression of the GFP protein was observed within chloroplast on protoplast of cotyledon explant by confocal laser scanning microscopy, which indicates that the protocol developed in this study be useful for the production of plastid transgenic plants in tomato.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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