• 미생물학회지
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• 제32권3호
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• pp.186-191
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• 1994

Staphylococcus aureus로부터 분리한 R-plasmid pSBK203의 복제개시 단백질인 Rep의 작용부위인 ori 및 dsDNA로의 전환을 위해 요구되는 minus origin부위를 밝히고자 시도하였다. Escherichia coli vecotr를 이용하여 pSBK203의 복제관련 부위를 최소한도로 포함하는 재조합 E.coli-Bacillus subtilis shuttle vector를 구성, 분리하고 여기에 포함된 pSBK203부위의 염기 서열을 분석함으로써 ori를 확인하였다. pSBK203의 복제개시 부위 ori는 rep의 구조 유전자 ORF내에서 약 50bp의 크기로 발견되었으며 지금까지 알려진 staphylococcal plasmid들중에서 pT181족 plasmid들의 ori와 높은 상동성을 갖는 것으로 분석되었다. 복제 과정에서 ssDNA로 먼저 만들어진 (+)쇄가 dsDNA로 전환되기 위해 필요한 신호로 작용하는 것으로 알려저 있는 minus origin (M-O)인 긴 palindrome 구조, 즉 pal 부위가 rep 우전자의 상류에서 2개 연이어 존재하는 것이 발견되었다. 이중에서 pOX6, pC194, 및 pE194 등과 같은 다른 staphylococcal plasmid들의 pal 부위와 비교적 높은 상동성을 갖는 paLA 는 plasmid 유지에 별 영향을 미치지 못하는 반면 다른 plasmid에서 유사 서열이 보고되지 않은 palA는 plasmid 유지에 필수적이라는 사실이 밝혀졌다.

• 한국생물공학회:학술대회논문집
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• 한국생물공학회 2003년도 생물공학의 동향(XII)
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• pp.582-586
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• 2003

There has been interest in developing gene therapy based on naked plasmid DNA for treating serum protein deficiencies and human erythropoietin (hEPO) is one of the candidate for gene therapy being Investigated most enthusiastically. We constructed novel plasmid DNA vectors pVAC-hEPOI/II/III which contain one, two, three hEPO gene(s) respectively for producing high level expression and secretion of hEPO in vitro and in vivo. NIH3T3 and COS7 cells were transfected transiently with these vectors and increase in hEPO expression in medium reached 2-5 fold in comparison with pSecTagB-hEPO. Intra muscular administrations of pVAC-hEPOI/II/III vectors into mice resulted in high level secretion of hEPO in the serum and corresponding increases in hematocrit level. In conclusion the transduction efficiency of naked plasmid vectors is one of the critical factors of a gene delivery system and these novel plasmid vectors will contribute to various gene therapy based on naked plasmid DNA.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제13권3호
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• pp.297-302
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• 1985

미생물중 urease생성능이 아주 강한 B. pasteurii의 Hind III partial digest 된 chromosomal DNA를 E. coli-B. subtilis bifunctional plasmid vector pGR 71으로 E. coli RR1 균주에 cloning 하므로써 그 urease gene을 expression시킬 수 있었다. 그러나 B. subtilis에서는 insertion DNA fragment의 deletion으로 expression되지 않았다. Cloning된 E.coli RR1 균주로부터 분리 정제한 urease gene함유 Plasmid(pGU66)의 restriction map을 작성하여 본 결과 7.1 Mdal의 insertion fragment가 삽입된 12.6Mdal의 plasmid에 Hind III, Bgl II, Xba I, Sal I등 몇 개의 cleavage site 위치를 찾을 수 있었다. Cloning된 E. coli의 urease는 periplasmic space에 많은 비율로 축적되며, 그 효소학적 성질은 donor인 B.pasteurii의 그것과 매우 유사하였다.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제26권6호
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• pp.493-498
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• 2003

In this study we have investigated the pharmacokinetics and tissue distribution of GX-12, a multiple plasmid DNA vaccine for the treatment of HIV-1 infection. Plasmid DNA was rapidly degraded in blood with a half-life of 1.34 min and was no longer detectable at 90 min after intravenous injection in mice. After intramuscular injection, plasmid DNA concentration in the injection site rapidly declined to less than 1 ％ of the initial concentration by 90 min post-injection. However, sub-picogram levels (per mg tissue) were occasionally detected for several days after injection. The relative proportions of the individual plasm ids of GX-12 remained relatively constant at the injection site until 90 min post-injection. The concentration of plasmid DNA in tissues other than the injection site peaked at 90 min post-injection and decreased to undetectable levels at 8 h post-injection. The rapid in vivo degradation of GX-12 and absence of persistence in non-target tissues suggest that the risk of potential gene-related toxicities by GX-12 administration, such as expression in non-target tissues, insertional mutagenesis and germline transmission, is minimal.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제14권3호
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• pp.209-212
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• 1986

YEp 13 plasmid에 B. amyloliquefaciens의 $\alpha$-amylase gene을 cloning시켜서 얻은 hybrid plasmid를 E. coli C 600으로 형질전환시켜서 amylase 활성을 나타내는 균주를 선별하였다. 선별된 E. coli C 600균주를 plasmid추출하여 전기영동해 본 결과 plasmid가 매우 불안정하였으며, 그중 가장 단순한 plasmid band를 지니고 있으며 amylase활성이 강한 E. coli균주를 선별하였다. 선별된 균주의 균체내에 있는 2개의 plasmid DNA를 분리하여 각각의 plasmid를 pTG 17-1, pTG 17-2로 명명하였으며 S. cerevisiae MC 16에서 형질전환이 가능한 pTG 17-2 DNA를 제한효소 EcoRI과 Pst I으로 restriction한 결과 EcoRI으로 처리한 경우는 7.3, 4.8, 2.4 kb인 3개의 분획으로 나타났으며 Pst I으로 처리한 경우는 linear로 14.5kb임을 알았으며 이로써 pTG 17-2 plasmid의 size가 약 14kb임을 알았다. 또한 E.coli균체내에서의 ampicillin sensitive로써 이 plasmid의 ampicillin resistance site가 결실되었음을 알았고 효모의 형진전환체로 부터의 $\alpha$-amylase는 균체외로 분비되지 않았고 효모균체내의 $\alpha$-amylase는 Somogyi-Nelson방법과 Agar diffusion 방법으로 확인하였다.

• 대한약학회:학술대회논문집
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• 대한약학회 2002년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2
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• pp.236.1-236.1
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• 2002

Mucosal administration of drug or therapeutic gene is emerging as a new route of delivery for systemic and local therapeutics. Previously. in situ gelling system has been applied to chemical drug such as acetaminophen. insulin. prostaglandin E1. and clotrimazole. Plasmid DNA has not been delivered in form of in situ gelling vehicles. To improve the intranasal absorption of plasmid DNA. we designed delivery systems composed of provide of in 냐셔 gelling and mucoadhesive polymers. (omitted)

• 한국어병학회지
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• 제6권1호
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• pp.57-64
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• 1993

어병 세균으로부터 분리된 R-plasmid의 특성과 그 DNA 구조는 Aeromonas hydrophila, A. salmonicida, Edwardsiella tarda, Enterococcus seriolicida, Pasteurella piscicida, Vibrio onguillarum등 세균의 종류에 따라 다르다. 그러나 A. hydrophila와 E. tarda로부터 그리고 A. hydrophila와 A. salmonicida로부터 분리된 몇몇 R-plasmid는 같은 내성형을 가지면서 유사한 DNA 구조를 보였다, V. anguillarum에서 분리된 R-plasmid는 1977년 이전, 1980년과 1983년 사이 그리고 1989년과 1991년 사이에 분리된 것이 그 DNA 구조에 차이를 보여 각각 그룹 1, 2, 3으로 구분되어졌다. P. piscicida의 경우에는 연도와 지역에 관계없이 동일한 DNA 구조를 갖는 R-plasmid가 분리되었다. Macrolide계 항생제(MLs), lincomycin(LM), tetracycline(TC) 그리고 MLs, LIM, chloramphenicol(CP) 내성을 나타내는 R-plasmid를 갖는 E. seriolicida가 각 지역의 Yellowtail 어장에 분포되어 있었다. P. piscicida의 R-plasmid에는 type I의 chloramphenicol acetyltransferase(CAT)에 의하여 CP 내성을 나타내는 유전자(cat)가, 그리고 E. tarda, A. salmonicida와 1980년 이후에 분리된 V. anguillarum의 R-plasmid에는 CAT type II에 해당하는 car 유전자가 분포되어 있었다. TC 내성 유전자(tet)의 경우에는 1977년 이전과 1980년 이후에 분리된 V. anguillarum으로부터 class B, G의 tet 유전자가 확인되었으나, E. tarda, P. piscicida, A. hydrophila 그리고 1989년 이후에 분리된 V. anguillarum등 어병세균의 R-plasmid에는 class D의 tet 유전자가 널리 분포하고 있는 것으로 나타났다.

• Genomics & Informatics
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• 제1권1호
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• pp.55-60
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• 2003

The nucleotide sequence of pZMO1, a small cryptic plasmid of Zymomonas mobilis ATCC10988 was determined. Analysis of 1,680 bp of sequence revealed $69\%$ identity with Shigella sonnei plasmid, pKYM and $61\%$ identity with Nostoc sp. ss DNA replicating plasmid. Analysis of a deduced amino acid sequence of an orf of pZMO1 revealed $75\%$ identity and $90\%$ similarity with the repA gene of Synechocystis sp. plasmid pCA2.4. The upstream region of the repA gene of pZMO1 possesses six directed repeat sequences and two inverted repeat sequences at downstream of the IR consensus sequence of nick region of rolling circle replication (RCR) plasmid. A typical terminator hairpin structure was found at the downstream region of repA gene. Degradation of single-stranded plasmid DNA by S1 nuclease was detected by Southern hybridization. It suggests that pZMO1 replicates by a rolling circle mechanism in Z. mobilis ATCC10988 cells.

• 한국미생물생명공학회:학술대회논문집
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• 한국미생물생명공학회 1986년도 추계학술대회
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• pp.529.1-529
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• 1986

For isolation of the CMCase gene of the alkalophilic Bacillus sp. strain N-4 to analyze their genetic information for the multicomponents of the cellulase, Bscherichia coli K12 and plasmid DNA pBR322 was used as host-vector system. After the digestion of purified chromosomal DNA and plasmid DNA pBR322 with HindIII, these were ligated. The ligated DND were transformed into Escherichia coli, and recombinant plasmid 107 carried the gene coding for CMCase was constructed. The CMCase produced by Escherichia coli cells containing plasmid DNA pYBC107 was found in the cells as intracellular enzyme and nearly 60% of the total CMCase activity was localized in cellular fraction. Also, the optimum pH for the reaction of CMCase produced by Escherichia coli was appeared at pH .8.0 and the enzyme was stable between pH 7.0 and pH 8.0.

• Applied Biological Chemistry
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• 제31권1호
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• pp.33-37
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• 1988

김치에서 분리한 Pediococci를 동정한 결과 Pediococcus pentosaceus, Pediococcus acidilactici 및 Pediococcus halophilus의 세종으로 밝혀졌다. 이 Pediococci의 미생물 생육저해 작용을 조사한 결과 P. pentosaceus는 모두 Streptococcus faecalis와 Pseudomonas sp., P20에 대하여 생육저해작용을 나타내었다. P. acidilatici는 S. faecalis와 Vibrio parahaemolyticus의 생육을 저해하였으나 P. halophilus는 4종의 test organism에 대하여 저해작용이 없었다. 이들 Pedicocci는 균주에 따라 한개로 부터 일곱개의 plasmid DNA를 가지고 있으며 그 분자량은 약 1 Mdal에서부터 약 60 Mdal 사이의 여러 크기의 plasmid DNA가 존재함이 밝혀졌다.