A plantlet regeneration protocol was developed on pot-grown mature plants of Elaeocarpus robustus Roxb. cv. Dwarf from nodal and leaf explants. The best yield of adventitious shoots was achieved from the leaf-derived calli in a modified MS ($MMS_1$, half strength of major salts, full strength of minor salts, and vitamins) medium containing $4.0{\mu}M$ BA + $4.0{\mu}M$ Kn + $0.5{\mu}M$ NAA + 15% coconut water (CW). The shoot multiplication rate was amplified about twofold per culture after the addition of 15% CW to the medium. The rate of shoot multiplication reached maximum at the 5th subculture, and it maintained this rate throughout the 3 subsequent subcultures. The best rooting in vitro was investigated by subculturing the microcuttings in an $MMS_2$ (half strength of both major salts and minor salts and full strength of vitamins) medium containing $1.0{\mu}M$ IBA in the dark for one initial week at $30^{\circ}C$, followed by subculturing them in a plant-growth regulator (PGR)-free medium in the light. The plantlets raised in vitro were successfully established under ex vitro conditions.
Buckwheat sprout is used as vegetable, and also flour for making noodles, and so on. Currently, information about tissue culture in buckwheat is limited and restricted to micro-propagation. We carried out somatic embryogenesis and plant regeneration using hypocotyl segments as explant of the cultivated buckwheat species, Fagopyrum esculentum which differs from existing studies in the growth regulator combinations used. Maximum callus regeneration was induced on MS medium containing 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) $2.0mg{\cdot}L^{-1}$, benzyladenine (BA) $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ and 3% sucrose. Friable callus was transferred to solidified MS media containing BA ($1.0mg{\cdot}L^{-1}$) with various concentrations of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid for the induction of embryogenesis. The optimum concentrations of growth regulators (for regeneration of plantlet) were indole-3-acetic acid ($2.0mg{\cdot}L^{-1}$), Kinetin ($1.0mg{\cdot}L^{-1}$), BA ($1.0mg{\cdot}L^{-1}$). Only 2,4-D did not show any significant effect on callus induction or embryogenesis. Regeneration of embryonic callus varied from 5% to 20%. Whole plants were obtained at high frequencies when the embryogenic calli with somatic embryos and organized shoot primordia were transferred to MS media with 3% sucrose. The main objective of this research was to develop an efficient protocol for plant regeneration for common buckwheat, and to apply in future for genetic transformation.
Callus culture initiation of strawberry (Fragaria${\times}$ananassa Duch.) was investigated at different Murashige and Skoog (MS) medium strengths, types and concentrations of plant growth regulators, and incorporating a cold pretreatment period to determine the optimal nutritional and environmental conditions. No high quality callus was induced on MS media without auxin regardless of medium strength. When 6-benzylaminopurine (BA) was combined with indole acetic acid (IAA), naphthalene acetic acid (NAA), and 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D), high quality callus were highly induced compared to medium supplemented with auxin alone. When $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ BA was combined with IAA, NAA, and 2,4-D, high quality callus induction was more effective than the medium supplemented with the other BA concentrations. The best combination of auxin and cytokinin for high quality callus induction was $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ NAA and $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ BA. Although the differences in callus induction were not significant, high quality callus induction at half strength MS medium was more effective than at full strength medium. When $30g{\cdot}L^{-1}$ sucrose was added to the half strength MS medium, the rate of high quality callus induction increased. The optimum cold pretreatment temperature and period for high quality callus induction were $4^{\circ}C$ and 72 h, respectively. Regeneration rate of high quality callus increased in MS medium supplemented with thidiazuron.
Lettuce, a typical light-induced seed germination type, exhibits different germination responses according to cultivars, light quality, and plant growth regulator (PGR) treatments. Germination rates in most tested cultivars were over 85% under both white and red light, and were slightly decreased by blue light. Although photo-inhibition in germination was observed from most cultivars by far-red light, 'Cheongguangcheongchima', 'Okdol', and 'Manchudaecheongchima' could be classified as photo-insensitive lettuce cultivars by exhibiting the germination rates as 78,63, and 48% under for-red light, respectively. 6-Benzylamino purine (BAP) and kinetin promoted seed germination and normal seedling production under far-red light, but ethephon did not show any positive effects. Cytokinins such as BAP, kinetin, thidiazuron (TDZ), and zeatin overcame photo-inhibition of seed germination even the concentration of below $50\;mg{\cdot}L^{-1}$. However, auxins such as IBA, 2,4-D, and NAA failed to overcome the far-red light-induced photo-inhibition.
The twin-scale segments of nerine (Nerine bowdenii) were cultured to investigate the influence of NAA, BA and sucrose concentrations on in vitro bulblet formation. The formation of bulblets from twin-scale segments showed a good response both the percentage of bulblet formation and the number of bulblets per explant on MS medium supplemented with 1mg/L NAA and 2 mg/L BA. Formation of bulblet showed the highest efficiency on medium containing 30g/L, and the formation of bulblets was strongly inhibited on medium containing over 90g/L. When the twin-scale segments formed bulblets were subcultured three times to the same medium by 60 day subculture interval, the number of bulblets per explant was 6.5, 7.3 and 8.2 in order of first, second and third. The bulblets over 3mm in diameter were hypertrophied and rooted after transferring to the hormone-free MS medium. The plantlets over 50mm in height were successfully acclimatized in the soil mixed with the same volume of vermiculite and perlite, and the survival rate was over 95%.
A plant-specific B3 domain and AP2 domain-containing transcription factor, RAV1 acts as a negative regulator of growth in many plant species and its transcription was down-regulated by BR and ABA. In this study, we found that RAV1-overexpressing transgenic plants showed abnormally developed ovules, resulting in reduced seed size, weight, and number in a silique. Interestingly, the endogenous expression of RAV1 fluctuated during seed development; it remained low during the early stage of seed development and sharply increased in the seed maturation stage. In plants, seed development is a complex process that requires coordinated growth of the embryo, endosperm, and maternal integuments. Among many genes that are associated with endosperm proliferation and embryo development, three genes consisting of SHB1, MINI3, and IKU2 form a small unit positively regulating this process, and their expression was regulated by BR and ABA. Using the floral stage-specific RNAs, we found that the expression of MINI3 and IKU2, the two downstream genes of the SHB1-MINI3-IKU2 cascade in the seed development pathway, were particularly reduced in the RAV1-overexpressing transgenic plants. We further determined that RAV1 directly binds to the promoter of MINI3 and IKU2, resulting in their repression. Direct treatment with brassinolide (BL) improved seed development of RAV1-overexpressing plants, but treatment with ABA severely worsened it. Overall, these results suggest that RAV1 is an additional negative player in the early stages of seed development, during which ABA and BR signaling are coordinated.
CHAI, Youn Kyung;KIM, Kyong Ho;YEO, Up Dong;SAKURAI Naoki
Korean Journal of Plant Tissue Culture
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v.25
no.6
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pp.477-485
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1998
To underatand in vitro regulation of differentiation, the effects of growth regulators and nitrogen source on metabolism of cell wall polysaccharides in suspension culture of kidney bean (Phaseolus vulgaris L.) were investigated. The suspension cells (cell clusters) were directly induced from the epicotyl segments of the seedlings, which were cultivated in MS medium supplemented with 1.0mg/L of 2,4-D and 0.5 mg/L of kinetin. When compared with cell wall sugar contents of the epicotyl segments, the cellulose content of the suspension-cultured cells decreased; while the pectin and hemicellulose content increased; suggesting increases of rhamnogalacturonan I and arabinogalactan IIduring the dedifferentiation, respectively, The effects of growth regulators(2,4-D, 1.0mg/L and kinetin, 0.5mg/L) and nitrogen source (potasium nitrate, 19.0mg/L and ammonium nitrate, 16.5 g/L) in the medium on the proliferation and the turnover of the cell wall polysaccharides were investigated for 30 days. In the medium with growth regulators and without nitrogen source, the proliferation rate was extremely high (16 folds). Growth regulators and nitrogen source increased the pectin content. Analysis of neutral sugar composition of pectin fraction showed that nitrogen source enhanced rhamnose level remarkably, suggesting that rhamnogalacturonan I was the one most likely synthesized. In hemicellulose fraction, growth regulators reduced arabinose level, suggesting that arabinogalactan II was degraded. And nitrogen source reduced galactose level, suggesting that xyloglucan was also degraded.
To study the effects of temperature, day length, and various plant growth regulator treatments on the tuber formation of Irish cobbler, this experiment was carried out with 2 combinations of day-length and temperature and 11 kinds of growth regulator, including GA, and their combinations. For the tuber formation, low temperature-short day condition played decisive role, and exceeded the effects of growth regulators. 4 times foliar application of 10 ppm GA resulted marked elongation of stolon but did not inhibit the tuber formation even under high temperature longday condition.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.18
no.4
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pp.291-302
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1998
The purpose of this study is to clarify the effect of plant growth regulator "Uniconazole-P" on the control of growth and seed producrtion of pasture plants under grown in sward conditions. Four species examined were orchard grass, timothy, red clover and alfalfa. Uniconazole-P concentrations were control(0), 20ppm and 40ppm, and foliar sprayed on canopy structures at the floral differentiation stages of grasses and at the begining of flowering stages of legumes, respectively. 1. Yield components and seed yield components of grasses and legumes were responded differently between Uniconazole-P concentrations, species and the stages of growth. 2. At early heading stages, the plant length and culm length of grasses were reduced by Uniconazole-P treatments. On the contrary, the dry weight of ears per area and chlorophyll concentrations were increased by Uniconazole-P treatments. 3. At seed ripening stages, the number of ears, dry weight of a tiller, dry weight of a ear, dry weight of ears per area and dry weight of seeds in orchardgrass, and the number of ears, dry weight of a ear, dry weight of ears per area, dry weight of seeds and harvest index in timothy were increased by Uniconazole-P treatments. 4. At early flowering stages, the plant length and total length of internodes were reduced by Uniconazole-P treatments. On the contrary, total length of branches and chlorophyll concentrations of red clover and alfalfa were increased by Uniconazole-P treatments. Particularly, the number of inflorescences and dry weight of inflorescences of red clover was increased greatly by Uniconazole-P treatments. 5. At seed ripening stages, the plant length of both of legumes were reduced by Uniconazole-P treatments. On the contrary, the dry weight of a inflorescence, dry weight of inflorescences per area, dry weight of seeds and harvest index of alfalfa was increased by Uniconazole-P treatments. 6. Seed production of grasses by Uniconazole-P treatments can be explained as following processes at each stage of growth. 1) reduced in plant length and culm lengths at early heading stages, 2) increased in number of ears and dry weight of a ear at both of stages, and 3) increased in dry weight of ears per area, dry weight of seeds and harvest index at seed ripening stages. 7. Seed production of legumes by Uniconazole-P treatments can be explained as following processes at each stage of growth. 1) reduced in plant length and total length of internodes and increased in number of branches and total length of branches at early flowering stages, 2) increased in number of inflorescences and dry weight of inflorescences at both of stages, and 3) increased in dry weight of seeds and harvest index at seed ripening stages.
This study was carried out to investigate the effect of TDZ (thidiazuron) treatment on Propagation in vivo through scale cultures of Narcissus pseudonarcissus. Scales with disk (5 to 7 m in size) were cultured on MS medium containing NAA, BA and TDZ. Bulbs and shoots were directly formed when scales were cultured on medium containing 5 mg/L NAA and 1 mg/L BA. In addition, combination of 3 mg/L NAA and 0.02 mg/L TDZ promoted effectively the direct formation of bulbs and shoots. The shoots were rooted when cultured on medium containing 5 mg/L NAA and 0.02 mg/L TDZ. non scales obtained from regenerates were cultured on medium containing 1.0 mg/L NAA and 0.5 mg/L TDZ, they gave rise to numerous bulbs and shoots . The overall results suggest that TDZ is an effective plant growth regulator in vitro propagation of N. pseudonarcissus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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