Objective: The objective of this study was to investigate the phylogenetic and expression analysis of the angiopoietin-like (ANGPTL) gene family and their role in lipid metabolism in pigs. Methods: In this study, the amino acid sequence analysis, phylogenetic analysis, and chromosome adjacent gene analysis were performed to identify the ANGPTL gene family in pigs. According to the body weight data from 60 Jinhua pigs, different tissues of 6 pigs with average body weight were used to determine the expression profile of ANGPTL1-8. The ileum, subcutaneous fat, and liver of 8 pigs with distinct fatness were selected to analyze the gene expression of ANGPTL3, ANGPTL4, and ANGPTL8. Results: The sequence length of ANGPTLs in pigs was between 1,186 and 1,991 bp, and the pig ANGPTL family members shared common features with human homologous genes, including the high similarity of the amino acid sequence and chromosome flanking genes. Amino acid sequence analysis showed that ANGPTL1-7 had a highly conserved domain except for ANGPTL8. Phylogenetic analysis showed that each ANGPTL homologous gene shared a common origin. Quantitative reverse-transcription polymerase chain reaction analysis showed that ANGPTL family members had different expression patterns in different tissues. ANGPTL3 and ANGPTL8 were mainly expressed in the liver, while ANGPTL4 was expressed in many other tissues, such as the intestine and subcutaneous fat. The expression levels of ANGPTL3 in the liver and ANGPTL4 in the liver, intestine and subcutaneous fat of Jinhua pigs with low propensity for adipogenesis were significantly higher than those of high propensity for adipogenesis. Conclusion: These results increase our knowledge about the biological role of the ANGPTL family in this important economic species, it will also help to better understand the role of ANGPTL3, ANGPTL4, and ANGPTL8 in lipid metabolism of pigs, and provide innovative ideas for developing strategies to improve meat quality of pigs.
In order to develop probiotics which may be a viable alternative of antibiotic use in pig industry, five bacterial strains (Lactobacillus sp. HN 52, 92, 98, 235 and AP 116) possessing antimicrobial properties were selected from 500 strains isolates of pig intestines. The bacteriocin produced by Lactobacillus sp. HN 235 displayed a relative broad spectrum of inhibitory activity against all Enterococcus strains, Pseudomonas aeruginosa, Listeria monocytogenes and Clostridium perfringens using the spot-on-lawn method. The production of antimicrobial substance started in the middle of the exponential growth phase, reached maximum levels (6,400 AU/mL) in the stationary phase, and then declined. Bacteriocin activity remained unchanged after 30 min of heat treatment at $95^{\circ}C$ and stable from pH 2.0 to 10 for 1 h, or exposure to organic solvents; however, it diminished after treatment with proteolytic enzymes. The molecular weight of the bacteriocin was about 5 kDa according to a tricine SDS-PAGE analysis.
Ku Hee-Jung;SEO Jung-Kil;KIM Eun-Hi;HUH Min-Do;CHUNG Joon-Ki;PARK Jang-Su;KANG Shin-Won;PARK Nam Gyu
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.30
no.2
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pp.244-251
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1997
The relationship between structure and biological activity was studied on the three neuropeptides (mammalian, trout- and goldfish-neuropeptide $\gamma$) that were syntheized by the solid-phase method. Circular dichroism spectra showed that mammalian, trout- and goldfish-neuropeptide $\gamma$ adopted an unordered structure in buffer solution. In the-presence of neutral and acidic liposomes, mammalian and trout-neuropeptioe $\gamma$ also took a random structure. However, goldfish-neuropeptide $\gamma$ took an $\alpha-helical$ structure in acidic liposomes. The intestinal motility response was investigated with carp intestines, guinea-pig ileums and rat duodenums. In case of carp intestine, contractile activity was as follows : goldfish-neuropeptide $\gamma\simeq$ trout-neuropeptide $\gamma>$ mammalian-neuropeptide $\gamma$, On the other hand, the contractile activity of mammalian-neuropeptide $\gamma$ was more potent than trout- and goldfish-neuropeptide $\gamma$ in the guinea-pig ileums and rat duodenums. These results suggest that neuropeptide $\gamma$ show the species-specific activity.
The study was performed to investigate the effect of dietary supplementation of a lipid-encapsulated Zinc oxide on growth parameters and intestinal mucosal morphology piglets born to Duroc-sired Landrace ${\times}$ Yorkshire dams. Twenty-four 30-day-old piglets weaned at 25 days of age were orally challenged with $5{\times}10^8$ colony forming units of enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) K88 and fed one of the four diets for 7 days: (i) a nursery basal diet containing 100-ppm ZnO (referred to as BASAL), (ii) BASAL supplemented with 120-ppm apramycin (referred to as ANTIBIO), (iii) BASAL with 2,400-ppm ZnO (referred to as HIGH), and BASAL containing 100-ppm lipid-encapsulated ZnO (referred to as LE). All piglets were killed at the end of the experiment for histological examination on the intestine. The results showed that the average daily gain (ADG), the villus height: crypt depth (CD) ratio in the ileum, and the goblet cell density of the villus and crypt in the duodenum, jejunum, and colon were greater in the LE-fed group that those of the BASAL (p < 0.05). Fecal consistency score (FCS) and the CD ratio in the ileum were less in the LE-fed group, compared to the BASAL-fed one (p < 0.05). The effects observed in the LE-fed group were almost equal to those of the HIGH-fed group as well as even superior to those of the ANTIBIO-fed group. Taken together, our results imply that dietary supplementation of 100-ppm lipid-encapsulated ZnO is as effective as that of 2,400-ppm ZnO for promoting growth diarrhea and intestinal morphology caused by ETEC infection.
In this study, we cloned, sequenced and characterized porcine y+L Amino Acid Transporter-1 (y+LAT1). By screening a translated EST database with the protein sequence of the human $y^{+}$LAT1 and by using rapid amplification of cDNA ends (RACE), the full-length cDNA encoding porcine $y^{+}$LAT1 was isolated from porcine intestine RNA. It was 2,111 bp long, encoding a 511 amino acid trans-membrane glycoprotein composed of 12 transmembrane domains. The predicted amino acid sequence was found to be 91%, 90%, 87% and 87% identical to those of cattle, human, mouse and rat $y^{+}$LAT1 respectively. Real-time RT-PCR results indicated that the small intestine had the highest $y^{+}$LAT1 mRNA abundance and the lung had the lowest $y^{+}$LAT1 mRNA abundance. Baby hamster kidney (BHK) cells transfected with green fluorescent protein (GFP) tagged porcine $y^{+}$LAT1 cDNA indicated that the cellular localization of the gene product in BHK was on the plasma membrane.
This study was conducted to investigate the effects of Chinese medicine granule (CMG, including Cortex Phellodendron, Atractylodes Rhizome, Agastache Rugosa and Gypsum Fibrosum) on absorption and transport of glucose in porcine small intestinal brush border membrane vesicles (BBMVs) under heat stress. Forty-eight 2-month-old Chinese experimental barrows were screened according to weight and litter origin, and then allotted to three groups and treated as follows: Normal temperature control group (NTCG; $23^{\circ}C$), high temperature control group (HTCG; $26^{\circ}C$ for 19 h, $40^{\circ}C$ for 5 h); Chinese medicine granule anti-stress group (CMGG; $26^{\circ}C$ for 19 h, $40^{\circ}C$ for 5 h) (n = 16 per group). The results showed that high temperature treatment decreased (p<0.05) the growth performance and intestinal glucose absorption but there was no change (p>0.05) in the expression of SGLT1 and GLUT2 genes in the small intestine of pigs compared with the NTCG. Dietary supplementation with CMG improved the growth performance, and increased the activity of disaccharidases in duodenum and jejunum of heat stressed pigs (p<0.05). CMG treatment increased (p<0.05) the protein levels of SGLT1 and GLUT2 in the small intestine, and up-regulated (p<0.05) the expression of SGLT1 and GLUT2 genes in the duodenum and jejunum but without changing (p>0.05) them in the ileum compared with the HTCG. These results indicated that CMG treatment significantly improved porcine growth performance, and increased intestinal glucose absorption and transport by BBMVs under heat stress, in addition to up-regulating the expression of SGLT1 and GLUT2 genes in porcine duodenum and jejunum.
The purpose of this study was to isolate bacteriocin-producing bacteria with antagonistic activities against pathogens from the intestines of pigs for probiotic use. Lactobacillus sp. AP 116 possessing antimicrobial property was selected from a total of 500 isolates. The AP 116 strain showed a relatively broad spectrum of inhibitory activity against Listeria monocytogenes, Clostridium perfringens, Pediococcus dextrinicus, and Enterococcus strains using the spot-on-lawn method. Bacteriocin activity remained unchanged after 15 min of heat treatment at $121^{\circ}C$ and exposure to organic solvents; however, it diminished after treatment with proteolytic enzymes. Maximum production of bacteriocin occurred at $34^{\circ}C$ when a pH of 6.0 was maintained throughout the culture during fermentation. According to a tricine SDS-PAGE analysis, the molecular weight of the bacteriocin was approximately 5 kDa. The isolate tolerated bile salts and low pH, and also induced nitric oxide (NO) in mouse peritoneal macrophages. Bacteriocin and bacteriocin-producing bacteria, such as Lactobacillus sp. AP 116, could be potential candidates for use as probiotics as an alternative to antibiotics in the pig industry.
Kang, Lyeongin;Kim, Jin Seon;Lee, Sung Sill;Chu, Gyo-Moon;Kim, Jin Wook
Journal of agriculture & life science
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v.53
no.2
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pp.15-26
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2019
An in vitro digestibility methods have been developed to mimic an in vivo system in the past decades. Because the in vivo techniques cause high cost, intensive labor, longer research periods and ethnical problems. In this review, the digestive systems from stomach to large intestine of pig as a monogastric animal were addressed to understand an in vivo digestion. The innovative in vitro technique using the Daisy II incubator was performed and the in vitro ileal and fecal dry matter (DM) digestibility of corn, rice, wheat and barley was determined.
Se-A Lee;Hye Jeong Lee;Na-Yeon Gu;Yu-Ri Park;Eun-Ju Kim;Seok-Jin Kang;Bang-Hun Hyun;Dong-Kun Yang
Journal of Veterinary Science
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v.24
no.4
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pp.53.1-53.12
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2023
Background: Mammalian orthoreovirus type 3 (MRV3), which is responsible for gastroenteritis in many mammalian species including pigs, has been isolated from piglets with severe diarrhea. However, the use of pig-derived cells as an infection model for swine-MRV3 has rarely been studied. Objectives: This study aims to establish porcine intestinal organoids (PIOs) and examine their susceptibility as an in vitro model for intestinal MRV3 infection. Methods: PIOs were isolated and established from the jejunum of a miniature pig. Established PIOs were characterized using polymerase chain reaction (PCR) and immunofluorescence assays (IFAs) to confirm the expression of small intestine-specific genes and proteins, such as Lgr5, LYZI, Mucin-2, ChgA, and Villin. The monolayered PIOs and three-dimensional (3D) PIOs, obtained through their distribution to expose the apical surface, were infected with MRV3 for 2 h, washed with Dulbecco's phosphate-buffered saline, and observed. Viral infection was confirmed using PCR and IFA. We performed quantitative real-time reverse transcription-PCR to assess changes in viral copy numbers and gene expressions linked to intestinal epithelial genes and antiviral activity. Results: The established PIOs have molecular characteristics of intestinal organoids. Infected PIOs showed delayed proliferation with disruption of structures. In addition, infection with MRV3 altered the gene expression linked to intestinal epithelial cells and antiviral activity, and these effects were observed in both 2D and 3D models. Furthermore, viral copy numbers in the supernatant of both models increased in a time-dependent manner. Conclusions: We suggest that PIOs can be an in vitro model to study the infection mechanism of MRV3 in detail, facilitating pharmaceutical development.
Jun Hyung Lee;San Kim;Eun Sol Kim;Gi Beom Keum;Hyunok Doo;Jinok Kwak;Sriniwas Pandey;Jae Hyoung Cho;Sumin Ryu;Minho Song;Jin Ho Cho;Sheena Kim;Hyeun Bum Kim
Journal of Animal Science and Technology
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v.65
no.4
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pp.856-864
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2023
There are a variety of microorganisms in the animal intestine, and it has been known that they play important roles in the host such as suppression of potentially pathogenic microorganisms, modulation of the gut immunity. In addition, the gut microbiota and the livestock growth performance have long been known to be related. Therefore, we evaluated the interrelation between the growth performance and the gut microbiome of the pigs from 3 different farms, with pigs of varied ages ready to be supplied to the market. When pigs reached average market weight of 118 kg, the average age of pigs in three different farms were < 180 days, about 190 days, and > 200 days, respectively. Fecal samples were collected from pigs of age of 70 days, 100 days, 130 days, and 160 days. The output data of the 16S rRNA gene sequencing by the Illumina Miseq platform was filtered and analyzed using Quantitative Insights into Microbial Ecology (QIIME)2, and the statistical analysis was performed using Statistical Analysis of Metagenomic Profiles (STAMP). The results of this study showed that the gut microbial communities shifted as pigs aged along with significant difference in the relative abundance of different phyla and genera in different age groups of pigs from each farm. Even though, there was no statistical differences among groups in terms of Chao1, the number of observed operational taxonomic units (OTUs), and the Shannon index, our results showed higher abundances of Bifidobacterium, Clostridium and Lactobacillus in the feces of pigs with rapid growth rate. These results will help us to elucidate important gut microbiota that can affect the growth performance of pigs.
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