Twenty isolates of Bacillus spp. obtained from livestock manure composts and cotton-waste composts were tested for in vitro antagonistic effects against soilborne plant pathogenic fungi, Fusarium oxysporum, Phytophthora capsici, Rhizoctonia solani AG-4, and Sclerotinia sclerotiorum. Seven isolates of Bacillus spp. had antagonistic effects on mycelial growth of all the isolates of F. oxysporum tested. The bacterial isolate RM43 was the most effective to inhibit the mycelial growth of the fungal isolates. Twelve isolates of Bacillus spp. had antagonistic effects on mycelial growth of all the isolates of P. capsici tested. The bacterial isolates M34 and M47 were very effective to inhibit the mycelial growth of the fungal isolates. Thirteen isolates of Bacillus spp. had antagonistic effects on mycelial growth of all the isolates of R. solani AG-4 tested. The bacterial isolates M27 and M75 were very effective to inhibit the mycelial growth of the fungal isolates. Fourteen isolates of Bacillus sp. had antagonistic effects on mycelial growth of all the isolates of S. sclerotiorum tested. The bacterial isolates M49 and M75 were very effective to inhibit the mycelial growth of the fungal isolates. The antagonistic effects of most Bacillus spp. isolates against the isolates of the four fungi differed depending on the fungal species and the isolates of each fungus. The bacterial isolates M27 and M75 were the most effective to inhibit the mycelial growth of all four fungi.
Sopheareth, Mao;Chan, Sarun;Naing, Kyaw Wai;Lee, Yong Seong;Hyun, Hae Nam;Kim, Young Cheol;Kim, Kil Yong
The Plant Pathology Journal
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제29권1호
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pp.67-76
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2013
A chitinolytic bacterial strain having strong antifungal activity was isolated and identified as Burkholderia cepacia MPC-7 based on 16S rRNA gene analysis. MPC-7 solubilized insoluble phosphorous in hydroxyapatite agar media. It produced gluconic acid and 2-keto-gluconic acid related to the decrease in pH of broth culture. The antagonist produced benzoic acid (BA) and phenylacetic acid (PA). The authentic compounds, BA and PA, showed a broad spectrum of antimicrobial activity against yeast, several bacterial and fungal pathogens in vitro. To demonstrate the biocontrol efficiency of MPC-7 on late blight disease caused by Phyto-phthora capsici, pepper plants in pot trials were treated with modified medium only (M), M plus zoospore inoculation (MP), MPC-7 cultured broth (B) and B plus zoospore inoculation (BP). With the sudden increase in root mortality, plants in MP wilted as early as five days after pathogen inoculation. However, plant in BP did not show any symptom of wilting until five days. Root mortality in BP was markedly reduced for as much as 50%. Plants in B had higher dry weight, P concentration in root, and larger leaf area compared to those in M and MP. These results suggested that B. cepacia MPC-7 should be considered as a candidate for the biological fertilizer as well as antimicrobial agent for pepper plants.
BACKGROUND: Some microorganisms extant in nature have ability to suppress various plant pathogens, and also can promote plant growth. Thus microorganisms are such great source of antimicrobial agents to develop antagonistic microorganism production and eco-friendly crop management. We isolated the microorganisms in various eco-friendly formulations. The suppressive abilities against plant pathogens have been characterized in vitro level. METHODS AND RESULTS: The indigenous microorganisms have been isolated from Cooked rice, Black sugar, Rice Bran, and Red clay using dilution plating method. Population of bacteria and fungi were above 107 in the all formulations. We isolated and pure cultured the microorganisms based on morphological characteristics. Three major plant pathogens (Fusarium oxysporum, Rhizoctonia solani, Phytophthora capsici) have been used to select antagonistic microorganisms. Total 20 bacteria and 9 fungi showed the pathogen growth suppression ability in vitro condition. The selected microorganisms were identified by ITS sequence similarity. CONCLUSION: All tested eco-friendly formulations contained high-density of the microorganisms. Among the isolated microorganisms, Bacillus spp. and Streptomyces spp. showed the most effective antifungal activity against the plant pathogens such as F. oxysporum, R. solani, and P. capsici. Among the selected fungi Trichoderma sp. demonstrated antifungal activity. Our results suggest that the currently adapted eco-friendly formulations might useful for sustain agricultural system.
Fitriana, Yuyun;Tampubolon, Desi Apriani Teresa;Suharjo, Radix;Lestari, Puji;Swibawa, I Gede
The Plant Pathology Journal
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제38권5호
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pp.449-460
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2022
This study was performed to reveal phenotypic characters and identity of symbiont bacteria of Nasutitermes as well as investigate their potential as antagonist of plant pathogenic fungi. Isolation of the symbiont bacteria was carried out from inside the heads and the bodies of soldier and worker termite which were collected from 3 locations of nests. Identification was performed using phenotypic test and sequence of 16S ribosomal DNA (16S rDNA). Antagonistic capability was investigated in the laboratory against 3 phytopathogenic fungi i.e., Phytophthora capsici, Ganoderma boninense, and Rigidoporus microporus. Totally, 39 bacterial isolates were obtained from inside the heads and the bodies of Nasutitermes. All the isolates showed capability to inhibit growth of P. capsici, however, 34 isolates showed capability to inhibit growth of G. boninense and 32 isolates showed capability to inhibit growth of R. microporus. Two bacterial strains (IK3.1P and 1B1.2P) which showed the highest percentage of inhibition were further identified based on their sequence of 16S rDNA. The result showed that 1K3.1P strain was placed in the group of type strain and reference strains of Lysinibacillus fusiformis meanwhile 1B1.2P strain was grouped within type strain and reference strains Paenibacillus alvei. The result of this study supply valuable information on the role of symbiont bacteria of Nasutitermes, which may support the development of the control method of the three above-mentioned phytopathogenic fungi.
황련의 식물병원성 곰팡이에 대한 항진균 활성을 평가하기 위해 황련 메탄올 추출물 및 유기용매 분획물들을 조제하여 Colletotrichum gloeosporioides(고추탄저 병), Phytohpthora capsici(고추역병), Pyricularia grisea(벼도열병), Rhizoctonia solani(잎집무늬마름병), Botryosphaeri dothidea(겹무늬썩음 병), Glomerella cingulata(사과과실 탄저병) 및 Botrytis cinerea(잿빛곰팡이병)의 7종에 대해 $0{\sim}1,000{\mu}g/mL$ 농도로 처리한 후, 포자발아억제 활성 및 균사체 생육억제 활성을 평가하였다. 그 결과 황련 메탄올 추출물은 $500{\mu}g/mL$ 농도에서 B. dothidea를 제외한 6종의 곰팡이의 포자발아를 억제하였으며, P. grisea 및 B. cinerea에 대해 $300{\mu}g/mL$의 MIC를, P. capsici에 대해서는 $500{\mu}g/mL$의 MIC를 나타내었고, 다른 4종에 곰팡이에 대해서는 균사체 성장억제 활성이 나타나지 않았다. 고추 재배지의 실제적 적용을 위해 대량 추출조건을 선정한 후, 상업적 시설에서 열수 추출물($1,000{\mu}g/mL$)을 조제하고, 이를 6월부터 한달 간격으로 3회에 걸쳐 엽면살포한 결과 병해와 약해가 전혀 나타나지 않았다. 황련 살포에 의해 고추의 전반적인 생육, 잎, 뿌리 발육이 촉진되었으며, 고추는 평균중량이 119%, 과육의 두께가 평균 117% 증가되어 생육촉진 및 수확량 증가효과를 확인하였다. 본 연구결과는 황련 추출물이 고추 관련 질병 방제에 유용하며, 고추생육 촉진효과를 가짐을 시사하고 있다.
An antagonistic bacterium, KJ1R5,, to Phytophthora capsici was obtained from root interior of a healthy pepper plant. To identify the bacterial antagonist, 16S rDNA sequence analysis, Biolog system, fatty acid methyl-esters (FAMEs), and physiological and biochemical characterization were conducted. The determined 165 rDNA sequence of KJ1R5, showed higher similarities to those of a group consisting of several Chryseobacterium strains with 95.2, 95.2, and 95,1% similarity to C. defluvii, Chryseobacterium sp. FR2, and C. scophthalmum, respectively, In addition, Halounella gailinarum, Bergeyella zoohelcum, and Riemerella anatipestifer are another group for KJ1R5, with 94.1, 89.7, and 87.2% similarities, respectively When identification of the antagonistic bacterium, KJ1R5, was conducted using BIOLOG system, the strain KJ1R5, was identified as Flavobacterium tirrenicum (similarity; 0.75%). Fatty acid profiles of the strain KJ1R5, were composed mainly of iso-17:0 w9c and iso-15:0 and identified as Chryseobacterium balustinum (similarity 0.524%). KJ1R5, was Gram-negative, regular short rods ranging from 0.8 $\mu\textrm{m}$ to 1.0 $\mu\textrm{m}$ and had no flagella. Phenotypic characterization of the antagonistic bacterium indicated that KJ1R5, were included in the genus Chreseobacterium, which belongs to the family Flavobacteriaceae. The strain was distinguished from these six existing species. These results indicated that strain might be placed as a new species in the genus Chryseobacterium.
Endophytic bacterial communities of tidal flat plants antagonistic to oomycete plant pathogens were studied by the isolation of 256 root colonizing endophytic bacteria from surface-disinfected root tissues of six plants ($Rosa$$rugosa$, $Suaeda$$maritima$, $Vitex$$rotundifolia$, $Carex$$scabrifolia$, $Glehnia$$littoralis$ and $Elymus$$mollis$) growing in a tidal flat area of Namhae Island, Korea. To understand the antagonistic potential, an $in$$vitro$ antagonistic assay was performed to characterize and identify strains that were antagonistic to the oomycete plant pathogens $Phytophthora$$capsici$ and $Pythium$$ultimum$ from the total population. Nine percent of the total number of isolated bacteria exhibited in vitro inhibitory activity against target plant pathogenic oomycetes. Taxonomic and phylogenetic placement of the antagonistic bacteria was investigated by analysis of the 16S rRNA gene sequences. The sequence analysis classified the antagonistic strains into four major classes of the domain bacteria ($Firmicutes$, ${\alpha}-Proteobacteria$, ${\gamma}-Proteobacteria$ and $Actinomycetes$) and 10 different genera. Further production of secondary metabolites, hydrolytic enzymes and plant growth promoting traits were determined for the putative new species of antagonistic endophytic bacteria. These new strains could not be identified as known species of ${\alpha}-Proteobacteria$, and so may represent novel bacterial taxa. The unexpected high antagonistic bacterial diversity associated with the tidal flat plants may be indicative of their importance in tidal flat plants as a promising source of novel antimicrobial compounds and biocontrol agents.
작물의 생육촉진과 식물 진균병의 생물방제능 효과를 동시에 나타내는 다기능 유기농업용 미생물제제를 개발하고자 경북지역 저병해 경작지 토양으로부터 옥신생산성 균주들을 분리하였다. 그 중 auxin, siderophore, 그리고 항진균성 cellulase를 동시에 생산하는 K11 균주를 선발하였으며, 선발된 K11 균주는 형태 및 생화학적 test 후 Biolog사의 동정시스템(Microlog$^{TM}$ 4.0)과 16s rDNA 상동성을 조사한 결과 Bacillus licheniformis로 동정되었으며, 이를 Bacillus licheniformis K11로 명명하였다. B. licheniformis K11은 고추역병의 원인균인 Phytophthora capsici에 대하여 in vitro 상에서 63%의 길항능을 보였으며, in vivo pot test에서도 뛰어난 방제능을 나타내었다. 또한 B. licheniformis K11의 배양액을 10ml/l로 처리한 녹두발근생검법에서 시판중인 IAA(0.1 mg/l)보다 발근율이 15% 증가됨을 확인 할 수 있었다. 또한 배추, 완두, 녹두를 대상으로 B. licheniformis K11에 의한 식물 생장촉진을 조사한 결과 녹두, 완두 그리고 배추의 뿌리 생육을 각각 160, 150, 130% 증가시켰다. 상기 연구 결과들로 미루어 볼 때 다기능 생물방제균인 B. licheniformis K11을 경작지에 관주하거나 적합한 미생물제제로 제제화한다면 토양전염성 질병의 방제와 함께 옥신 생산성에 의한 작물생육의 촉진으로 수확시기를 조기화 함으로 농가에 수익 증대 효과를 줄 수 있을 것이므로 친환경 농업용 미생물제제로 개발 가능성이 있음을 확인 할 수 있었다.
2000년도에 검정에서 역병에 살아남은 개체들로부터 채종하여 육성한 Capsicum chinense 31계통에 대하여 역병 저항성을 검정한 결과 고도의 저항성을 나타내는 것은 발견되지 않았다. 2001년도의 검정에서 역병에 살아남은 개체로부터 채종한 재래종 26계통에 대하여 다시 역병 저항성 검정을 실시한 결과 KC180, KC230, KC195, KC194에서 다수의 개체가 살아남아 저항성을 나타내었다 그러나 KC180과 KC230은 각각 AC2258과 CM334와 혼종된 것으로 관찰되었다. KC195와 KC194는 재래종의 형질을 유지하고 있는 것으로 관찰되었다. CM334의 보존 증식과정에 자연교잡이 일어난 것으로 보여 이의 순도향상을 위하여 채종년도별로 시료를 꺼내어 역병 저항성 검정을 실시한 결과 가장 오래된 1992년도 채종종자에서부터 약간의 이형주가 관찰되기 시작하여 1995년부터 2001년도까지 시간이 경과함에 따라 많이 변형되어 있는 것을 알 수 있었다. 1992년도 종자에서 이형주를 제거하고 원형의 개체로부터 자식종자를 대량 채종하였다. 함께 공시한 AC2258은 순수한 것으로 확인되었다. 1995년도 채종 CM334 종자에서는 비록 혼종은 되었으나 측지발생이 적은 개체들이 발견되어 이들을 개체 선발하여 역병에 저항성이며 측지발생이 적은 계통으로 육성하고 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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