• 제목/요약/키워드: Phase-control

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인체 락토페린 생산 형질전환 가시오갈피 배양세포 (Transgenic Siberian Ginseng Cultured Cells That Produce High Levels of Human Lactoferrin)

  • 조승현;권석윤;김재훈;이기택;곽상수;이행순
    • Journal of Plant Biotechnology
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    • 제32권3호
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    • pp.209-215
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    • 2005
  • 락토페린은 철 결합 당단백질로서 항 미생물활성과 면역강화와 같은 생리활성 기능을 가지고 있다. 본 연구는 배양 세포 고 발현 SWPA2 promoter를 이용하여 인체락토페린(hLf)을 생산하는 형질전환 가시오갈피 배양세포주 개발에 관한 것이다. 형질전환에 이용된 벡터는 산화스트레스 유도성 SWPA2 promoter의 조절 하에서 hLf이 소포체로 targeting되도록 제작된 SWPA2pro::ER-hLf/pCAMBIA이다. hLf을 생산하는 각 형질전환 배양세포들은 PCR과 Southern분석을 통해 hLf 유전자가 가시오갈피 게놈내로 성공적으로 도입되었음을 확인하였으며, western blot과 ELISA를 통해 형질전환 가시오갈피 배양 세포주에서 hLf 단백질이 활성이 있음을 확인하였다. 형질전환 가시오갈피 배양세포에서 hLf 단백질의 함량은 세포배양이 진행될수록 증가하여 정지기 때 가장 높았으며 전체 수용성 단백질의 약 3%를 차지하였다. 따라서 본 연구에서 개발된 인체락토페린을 고생산하는 약용식물 가시오갈피 배양 세포주는 산업적으로 이용될 수 있을 것으로 기대된다.

고속도로 영업소지역의 강우유출수내 중금속 유출 특성 (Characteristics of Wash-off Metal Pollutants from Highway Toll-Gate Area)

  • 이소영;이은주;김철민;손현근;;손영규;강희만;김지형;김이형
    • 한국물환경학회지
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    • 제23권6호
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    • pp.945-950
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    • 2007
  • The stormwater runoff from paved area are highly polluted because of particulate materials as well as metals from various vehicular activities. The Division of Road Maintenance in Ministry of Construction and Transportation was recently developed the Guidelines of Environment-kindly Road Maintenance. It is actually requiring the BMP construction to control the nonpoint source pollution as based on the TMDL program. This research is carried out in order to define the characteristics of stormwater runoff from the toll-gate of highways since 2006, which is actually one of the main pollutant sources of paved areas. This monitoring is the first phase work for establishing the treatment facilities in the toll-gates. The one of the main characteristics from toll-gate runoff is the first flush phenomenon containing lots of sediments and metal compounds at the beginning of a storm event. Usually it is used to determine the size of treatment facilities and to calculate the reduced pollutant mass in the facility. The research results shows that the mean EMC vaules for heavy metals are determined to $274.3{\mu}g/L$ for Cd, $1,273.4{\mu}g/L$ for Cr, $1,822.0{\mu}g/L$ for Cu, $6,504.9{\mu}g/L$ for Fe, $14,930.3{\mu}g/L$ for Pb, and $714.1{\mu}g/L$ for Zn. Also the metal mass loadings from the toll-gates are calculated using EMC, watershed area and storm duration.

어류신경괴사증바이러스(nervous necrosis virus, NNV) 감염에 따른 숙주의 방어기전관련 세포신호전달 (Intracellular Signaling Pathway for Host Defense Mechanisms against Piscine Nervous Necrosis Virus (NNV))

  • 김종오
    • 생명과학회지
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    • 제30권4호
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    • pp.402-409
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    • 2020
  • 신경괴사증바이러스(NNV)는 25 nm의 작은 입자 크기에 RNA1 (3.4 kb, RdRp), RNA2 (1.4 kb, capsid protein) 두 가닥의 RNA를 유전정보를 가진다. NNV는 1980년대 말 처음 보고된 이후 전 세계적으로 120여종의 어류에 감염을 일으키며 심각한 피해를 일으키고 있는 바이러스이다. NNV 감염에 의한 피해를 최소화하고 효율적인 백신들을 개발하기 위해서는 무엇보다 NNV 감염에 따른 세포내 신호전달체계를 이해할 필요가 있다. NNV는 세포내 감염 이후 숙주가 가진 바이러스 복제에 필요한 요소들을 이용할 수 있도록 숙주세포의 cell cycle arrest 등의 기작을 이용하는 것으로 알려졌다. 반면에 숙주 세포는 NNV와 감염된 세포를 제어하기 위해 RIG-1-like receptor signaling pathway 등을 통해 NNV 감염을 인지한 다음 IFN signaling pathway를 통해 항바이러스 작용에 필요한 ISG들을 발현시킨다. 또한 감염된 세포들을 사멸시키기 위해 ER stress를 통한 unfolded protein response (UPR), mitochondria-mediated cell death 작용을 통해 감염된 세포의 apoptosis를 유발한다. NNV 감염 기작에 대한 세포신호전달연구는 아직 초기단계이며 검증해야 할 pathway들이 아직도 많이 남아있는 상황이다. 따라서 NNV 감염과 연관된 다양한 세포신호전달체계를 탐색하고 질병 특이적인 세포신호전달체계를 이해함으로써 신속하고 정확한 진단법 및 백신 개발에 많은 도움이 될 것으로 생각된다.

T24 인체방광암 세포에서 pachymic acid에 의한 apoptosis 유발 (Induction of Apoptosis by Pachymic Acid in T24 Human Bladder Cancer Cells)

  • 정진우;백준영;김광동;최영현;이재동
    • 생명과학회지
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    • 제25권1호
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    • pp.93-100
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    • 2015
  • Pachymic acid는 복령에서 분리된 lanostane-type인 triterpenoid의 일종이다. 최근 pachymic acid가 항암 및 항염증 효능과 산화적 스트레스에 대한 항산화 효능 등과 같은 약리적인 효능이 있는 것으로 밝혀지고 있으나, 그에 대한 구체적인 분자생물학적 기전 연구는 매우 미비한 실정이다. 본 연구에서는 pachymic acid의 항암활성 및 관련 기전 조사의 일환으로 T24 인체 방광암세포 모델을 이용하여 pachymic acid에 의한 apoptosis 유발 여부를 검증하였다. 본 연구의 결과에 의하면 pachymic acid는 T24 세포의 증식을 유의적으로 억제시켰으며, 이는 apoptosis 유발과 연관성이 있음을 다양한 방법으로 확인하였다. Pachymic acid에 의한 apoptosis 유도에는 pro-apoptotic 인자들의 발현 증가와 anti-apoptotic 유전자 산물들의 발현 감소가 동반되었으며, MMP의 소실과 tBid의 발현 증가가 관찰되었다. 아울러 pachymic acid는 extrinsic 및 intrinsic apoptosis 경로의 개시에 관여하는 caspase-8 및 -9의 활성뿐 만 아니라, caspase-3의 활성도 증가시킴으로서 PARP와 같은 기질 단백질의 단편화를 초래하였다. 따라서 pachymic acid는 항암활성을 지니는 천연생리활성 물질로서의 잠재력이 매우 높음을 알 수 있었다.

동충하초 열수 추출물에 의한 인체 간암세포 성장억제 및 apoptosis 유발에 관한 연구 (Induction of Apaopotis by Water Extract of Cordyceps militaris (WECM) in Human Hepatocellular Carcinoma HepG2 Cells.)

  • 김경미;박철;최영현;이원호
    • 생명과학회지
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    • 제18권6호
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    • pp.804-813
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    • 2008
  • 본 연구에서는 전통 민간의학에서 많이 사용되는 동충하초(C. militaris)의 항암 작용에 관한 근거 자료의 제시를 위하여 동충하초 열수 추출물(WECM)의 항암 기전 해석을 시도하였다. 이를 위하여 HepG2 인체 간암세포를 사용하였으며, WECM의 처리에 의하여 HepG2 세포의 증식은 처리 농도의 증가에 따라 매우 억제되었다. WECM 처리에 의한 HepG2 세포의 증식 억제는 암세포의 심한 형태적 변형을 수반하였고, 이는 apoptosis 유도와 연관성이 있음을 DAPI 염색을 통한 apoptotic body 출현의 증가 및 flow cytometry 분석에 의한 sub-G1 기에 속하는 세포 빈도의 증가로 확인하였다. WECM 처리에 의한 HepG2 세포의 증식 억제는 또한 종양 억제 유전자 p53 및 CDKI p21의 발현 증가와도 연관성이 있음을 알 수 있었다. WECM 처리에 의한 apopotosis 유도에서 pro-apoptotic 인자인 Bax의 발현이 전사 및 번역 수준에서 매우 증가하였으며, caspase-3의 활성이 매우 높게 증가되었다. 특히 caspase-3 특이적 억제제인 z-DEVD-fmk로 caspase-3의 활성을 인위적으로 차단시켰을 경우, WECM에 의한 HepG2 세포의 apoptosis 유발에 caspase-3이 중심적인 역할을 하고 있음을 알 수 있었다. 본 연구 결과는 WECM의 생화학적 항암기전 해석을 이해하고 향후 수행될 추가 실험을 위한 기초 자료로서 그 가치가 매우 높은 것으로 생각된다.

N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine에 의한 인체백혈병세포의 G2/M arrest 유발에서 Cdk inhibitor p21(WIP1/CIP1)의 관련성 (Involvement of Cdk Inhibitor p21(WIP1/CIP1) in G2/M Arrest of Human Myeloid Leukemia U937 Cells by N-Methyl-N'-Nitro-N-Nitrosoguanidine)

  • 최영현
    • 생명과학회지
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    • 제19권1호
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    • pp.1-8
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    • 2009
  • 본 연구에서는 monofunctional alkylating agent인 N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) 에 의한 인체 백혈병 U937 세포의 증식억제에 관한 기전 확인하였다. MNNG에 의한 U937 세포의 증식억제는 세포주기 G2/M arrest 및 apoptosis 유방과 연관이 있었으며, MNNG 는 G2/M기 조절에 관여하는 주요 cyclin 및 Cdk들의 발현 수준에는 큰 영향이 없었으나 cyclin B1 및 Cdk2-associated kinase의 활성을 매우 저하시켰다. MNNG 처리로 Cdk inhibit p2l(WAF1/CIP1)이 전사 및 번역 수준에서 발연이 증가되었으며, p21 promoter 의 활성도 증가되었다. p21 promoter deletion constructs을 이용한 연구에서 MNNG의 responsive element 부위는 전사 개시 부위 113-61 부근임을 확인하였다. 이 결과들은 MNNG에 의한 cyclin/Cdk 복합체의 kinase 활성 저하가 p53 비의존적인 p21의 활성 증가에 기인한 것임을 보여주는 것이며, 이는 MNNG의 암세포에서의 항암기전을 이해하는 귀중한 자료로서 제공될 것으로 기대된다.

Factors affecting Pig Farmers' Adoption of the HACCP System

  • Jung, Gu-Hyun;Ahn, Kyeong Ah;Kim, Han-Eul;Jo, Hye Bin;Choe, Young-Chan
    • Agribusiness and Information Management
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    • 제3권2호
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    • pp.43-62
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    • 2011
  • The goal of this study is to determine, based on survey results, the underlying factors that affect the intention of the farmers who have not adopted the Hazard Analysis and Critical Control Points (HACCP) system for the rearing phase of pig production to adopt this system in the future. The research model for this study was con structed based on strategic contingency theory, the theory of the diffusion of innovation, and the technology acceptance model (TAM). Using structural equation modeling with partial least squares (PLS), this study analyzes the effects of the intensity of competition, the environmental uncertainty, the innovativeness and self-efficacy of the individual farmers, and the impact of the credibility of the Agricultural Technology Service Center (ATSC), which acts as the principal agent of technology dissemination and as a leader of change, on the perceived usefulness of technology and the farmers' intention to adopt the system. The results of the analysis are as follows. First, with regard to the underlying factors affecting the intention to adopt the new system, the intensity of competition within the industry and the institutional credibility of the ATSC were inferred to underlie the perceived usefulness. Second, institutional credibility has a positive impact on the perceived usefulness of the system, and the perceived usefulness, in turn, has a positive impact on the intention to adopt. The perceived ease of use also has a positive impact on the intention to adopt. Because the factor that has the biggest impact on the intention of a farm to adopt is the credibility of the ATSC, it is crucial for extension organizations, such as the ATSC, to make greater efforts to promote the expansion of the HACCP system. Because farmers feel that the implementation of the HACCP system is an instrumental strategy for coping with the high intensity of competition within the industry, they attempt to gain a competitive edge through the production of safe livestock products.

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약용식물 유래 정유성분 분석 및 산화 스트레스로부터 PC12 신경세포 보호 효과 (Chemical Composition and Protective Effect of Essential Oils Derived from Medicinal Plant on PC12 Neuro-cells Induced by Oxidative Stress)

  • 이지연;박정용;김동휘;최수지;장귀영;서경혜
    • 한국식품영양학회지
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    • 제33권2호
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    • pp.215-221
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    • 2020
  • The purpose of this study was to investigate the protective effect on oxidative stress induced PC12 cells, and volatile flavor composition of essential oils derived from medicinal plant seeds- Gossypium hirsutum L. (G. hirsutum), Coix lachryma-jobi (C. lachryma-jobi) and Oenothera biennis (O. biennis). The essential oils were obtained by the solvent (hexane) extraction method from the seeds. The essential oils of the seeds were analyzed by the solid-phase micro-extraction gas chromatography mass spectrometry (SPME-GC/MS). The major compounds of G. hirsutum, C. lachryma-jobi and O. biennis were cyclonexanol (16.65%), β-asarone (14.29%) and ylangene (50.01%). The DPPH radical scavenging activity (IC50) was the highest value of 8.52 mg/mL in the O. biennis. Additionally, IC50 values of G. hirsutum and C. lachryma-jobi were 26.76 mg/mL and 36.81 mg/mL. For the oxidative stress on PC12 cells, we treated with hydrogen peroxide (H2O2). The pretreatment of oxidative stress induced PC12 cells with all the essential oils preserved or increased their cell viability and G. hirsutum and O. biennis attenuated the ROS generation (by 68.75% and 56.25% vs. H2O2 control). The results of this study suggest that the essential oils derived from medicinal plant seeds could be used as valuable back data as a natural essential oil material to prevent neurodegenerative diseases by protecting neuro-cells.

튀긴 마늘 flake 제조조건의 최적화 및 이화학적 특성 (Optimization of Manufacturing Condition for Fried Garlic Flake and the Physicochemical Properties)

  • 김경이;이은경
    • 한국식품조리과학회지
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    • 제28권6호
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    • pp.805-811
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    • 2012
  • This study was carried out in order to optimize the manufacturing condition of fried garlic flakes as well as to investigate the physicochemical properties of the flakes. Fried garlic flake samples were prepared as follows: garlic was sliced by a thickness of 1.5 mm, 2.0 mm, 2.5 mm, which were measured by a thickness gage. The samples were fried in vegetable oil under different temperatures of $140{\sim}150^{\circ}C$, $160{\sim}170^{\circ}C$ and $180{\sim}185^{\circ}C$. The compression strength depending on the height (h) was measured in order to find the thickness effect by the rheometer (force control: 50 N, h: 3.25 mm). Moreover, the sample with 1.5 mm thickness showed crisp phenomena of the split compared with the crush shape of the 2.0 mm and 2.5 mm thick samples. The result of strength for time dependence showed a sample with a thickness of 1.5 mm, which was measured 5~9 times more than the 2.0 mm and 2.5 mm thick samples. We thought the reason that the 1.5 mm sample had less response power equivalent to compression force than the other samples. Alliin has been found to affect the immune responses in the blood, it is a derivative of the amino acid cysteine and is also quite heat stable. The LC system with a UV detection at 210 nm consists of a separation on a Zorbax TMS column and isocratic elution with water and ACN as a mobile phase. The alliin contents of raw and fried garlic flake under $140{\sim}150^{\circ}C$, $160{\sim}170^{\circ}C$ and $180{\sim}185^{\circ}C$ were 18.10 mg/mL, 14.0 mg/mL, 11.6 mg/mL and 11.1 mg/mL, respectively. The decrement of alliin content under different temperature was a small quantity hence, we confirmed that the increasing manufacturing temperature was not affected by the alliin content. Examining for the particle structure of fried garlic flakes by a polarization microscope, the color of the sample treated at $160{\sim}170^{\circ}C$ was pure yellow. Furder, the fiber shaped particle, which has an effect on the tough texture, almost did not appear compared to the different temperature conditions. Finally, the sensory test for the preference of fried garlic flake under different conditions was carried out and the scores for various sensory characteristics were surveyed. According to the physicochemical measurements and sensory evaluation, we confirmed that the optimum manufacturing condition of fried garlic flake was 1.5 mm thick at a temperature of $160{\sim}170^{\circ}C$.

Escherichia coli O157:H7을 오염시킨 우육의 감마선 조사에 의한 살균효과 (Sterilization of Escherichia coli O157:H7 Contaminated Beef by Gamma Irradiation)

  • 김성;육홍선;이주운;최청;변명우
    • 한국식품과학회지
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    • 제30권5호
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    • pp.1209-1213
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    • 1998
  • 4종류의 Escherichia coli O157:H7을 tryptic soy broth에 배양한 후 0.1 M phosphate buffer에 동결시킨 균체와 우육에 접종한 균체의 감마선 조사에 의한 방사선 감수성을 조사하였다. 균체의 증식은 tryptic soy broth에서 $37^{\circ}C$ 배양으로 24시간대에 최대균수를 나타내었다. 대수기때의 동결균체의 $D_{10}$ 값은 $0.09{\sim}0.15\;kGy$, $12D_{10}$값은 $1.08{\sim}1.80\;kGy$, 2와 3 kGy에서 불활성화 계수는 $13.33{\sim}33.33$이었다. 한편, 우육에 접종한 균체의 $D_{10}$값은 $0.30{\sim}0.47\;kGy$, $12D_{10}$값은 $3.60{\sim}5.64\;kGy$, 2와 3 kGy 선량에서의 불활성화계수는 $4.26{\sim}10.00$으로 동결균체가 우육접종균체보다 더 높은 방사선 감수성을 나타내었다.

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