Transgenic plants with the herbicide-resistance gene (bar gene) were obtained via organogenesis from isolated mesophyll protoplasts of Nierembergia repens after applying electroporation. Transient ${\beta}-glucuronidase$ (GUS) activity of electroporated protoplasts assayed 2 days after applying an electric pulse showed that optimum condition (transient GUS activity 319 pmol 4 MU/mg per min and plating efficiency 2.43%) for electroporation was 0.5 kV/cm in field strength and $100{\mu}F$ in capacitance. The protoplasts electroporated with the bar gene at this condition initiated formation of microcolonies on medium after 2 weeks. After 4 weeks of culture, equal volume of fresh 1/2-strength Murashige and Skoog (MS) medium containing 0.2 mg/l bialaphos was added for selection of transformed colonies. After 6 weeks of culture, growing colonies were transferred onto regeneration medium containing 1.0 mg/l bialaphos, on which they formed adventitious shoots 1-2 months after electroporation. The adventitious shoots rooted easily after transfer onto MS medium with bialaphos lacking plant-growth regulators. Transformation of these regenerants with the bar gene was confirmed by Southern analysis. Some of the transformants showed strong resistance to the application of bialaphos solution at 10.0 mg/l.
Levels of genetic diversity, population genetic structure, and gene flow in Hosta yingeri, a herbaceous perennial endemic to Taehuksan, Sohuksan, and Hong Islands, were investigated. Starch gel electrophoresis was conducted on leaves for 101 plants collected from three populations. Although the distribution of thespecies is restricted in the islands, it maintains high levels of genetic variatin; 64% of polymorphic loci in at least one population (Ps), the mean number of alleles per locus (Ap) of 1.92, and the mean effective number of alleles per locus (Aep) of 1.52. Overall, mean genetic diversity (Hep=0.250) was substantially higher than mean estimate for species with very similarlife history traits (0.102). Large populaton size, the persistence of multiple generations within populations, high fecundity, predominantly outcrossing breeding system, large size of pollinator visitation areas may be explanatory factors contributing the higher level of genetic diversity maintained within populations. Analysis of fixation indices showed an overall slight excess of heterozygotes (mean FIS=-0.066) relative to Hardy-Weinberg expectations, which may in part be due to the near self-incompatible breeding system in the species. Significant differences in allele frequencies among populaitns were found for 14 out of 16 polymorphic loci (P<0.05). Slightly more than 80% of the total variation in the species was common to all populations (GST=0.198). As expected, indirect estimate of the number of migrants per generation (Nm=0.45, calculated from mean GST) and nine private alleles found in the three populations indicate that gene movement among three isolated island populations was low.
The polymorphism of the locus FSHRB in intron6-Exon7 of FSHR gene was investigated by PCR-RFLPs in Erhualian, Large White and Landrace${\times}$Large White; The association of polymorphism and litter size was analyzed by using SAS. The results showed that 1) the polymorphism of the locus FSHRB was significantly associated with litter size; 2) the total born number (TBN) and number born alive (NBA) of the sows with BB genotype were increased (p<0.05) with additive effects of 1.02-1.42 and 1.04-1.27 pigs per litter, respectively; 3) among the sows with genotype AA, AB or BB, there was an insignificant difference in born weight and weaning weight. This gene may be an effective potential tool used in conjunction with traditional selection methods.
Eating quality of rice attracts more and more attention from rice-eating consumers in the recent years. Thus, improvement of eating quality of cooked rice has become one of the most important breeding goals in japonica rice. Here, the generation of transgenic japonica rice with improved eating quality and grain yield are reported. Overexpression of OsSbe1 gene encoding rice starch branching enzyme 1 was driven by 35S promoter. Eleven independent homozygous $T_3$ transgenic lines were characterized and had shown higher palatability (71.2 ~ 72.6) than wild type Gopum (70.4). Moreover, transgenic rice lines showed an increase in 1000-grain weight and number of spikelets per panicle compared with the wild type. The yield of milled rice was 562.8 ~ 596.7 kg/10a in eight $T_3$ lines, but 542.1 kg/10a in wild type. Gene expression analyses in mRNA transcription and enzyme activity levels suggest that improved eating quality is due to the up-regulation of OsSbe1 gene.
본 연구는 생쥐의 난소 및 정소 조직에서 발달 단계에 따라 나타나는 일주기성 clock유전자의 발현과 단백질의 발현 양상을 알아보고자 하였다. 생쥐의 난소 및 정소에서 일주기성 변화와 연관된 유전자(Period1(Per1), Period2(Per2), Period3(Per3), Cryptochromel(Cry1), Cryptochrome2 (Cry2), Clock, Bmall)와 시교차 상핵에서 분비되어 표적 조직 또는 기관으로 전달되는 물질로 알려진 Prokineticin (Prok2)에 대 한 수용체들 (Prok1r과 Prok2r), PERI 단백질의 발현 양상을 발달 단계에 따라 (post partum day; ppd 1, 7, 10, 21, 35) 확인하였다. 주요 clock 유전자들은 생후 발달 단계에 따라 각각 다양한 발현양상을 보였다. 난소의 경우 많은 난포가 성장을 시작하는 시기인 생후 7일과 10일을 전후하여 발현량이 대부분 증가하는 것을 볼 수 있었으며, 정소의 경우에도 발달 단계에 따라 7일에서 발현이 증가하는 양상을 보였다. 특히 clock유전자들은 생후 7일과 10일에서 상대적으로 높은 발현 양상을 보였다 시교차 상핵에서 분비되어 표적기관으로 분비되는 것으로 알려진 Prok2의 수용체의 경우에도 주요 주기성 유전자들의 발현이 증가하는 것과 같은 시기에 발현이 높아지는 것을 확인할 수 있었고, 생식소 발달 초기에 강하게 발현되나 차후 점진적으로 감소하는 것을 확인할 수 있었다. 또한 PER1의 발현양상을 면역조직화학적 방법으로 확인한 결과, 난포의 각 발달 단계에서 난소 내 정상적인 난포의 과립세포와 난자에서 높게 발현되는 것을 알 수 있었고, 상기의 결과는 Perl 유전자의 발현 양상과 일치함을 확인할 수 있었다 또한 정소 내 Per1 유전자와 PER1 단백질의 발현은 모두 생후 10일과 21일에서 감소하는 경향을 보이나 성적으로 성숙됨에 따라 다시 증가하는 것을 확인할 수 있어, PER1 단백질은 생식소의 발생 단계별로 다양한 발현 양상의 차이를 보이며, 정자와 난자의 정상적인 발달에 밀접한 연관이 있음을 추론할 수 있었다. 본 연구의 결과, 일주기성 clock유전자들 중 특히 Per1이 생식소의 정상 발달에 중요하게 작용할 수 있음을 시사하여 차후 이에 대한 다양한 연구가 진행되어야 할 것으로 생각된다.
남조류의 독성 잠재력을 확인하기 위해 microcystins 합성 유전자인 mcyB에 특이적으로 작용하는 TOX2P/TOX2M primer쌍을 이용한 whole-cell PCR을 실시하였다. 환경시료를 대상으로 한 실험 결과에서 TOX2P/TOX2M primer쌍은 약 1,000 $cells{\cdot}mL^{-1}$의 낮은 밀도에서 효과적으로 mcyB 유전자의 증폭에 성공하였으며, mcyB유전자를 지닌 종들은 모두 ELISA분석에 의해 microcystins의 생성이 확인되었다. 따라서, TOX2P/TOX2M primer쌍은 국내의 수체에서 독성 남조류의 신속하고 효과적인 검출을 위한 유용한 probe로 판단되었다.
In an attempt to reveal the interrelationship between fowls of jungle and native origin, their gene constitutions were compared using gene frequencies at the 16 loci controlling blood protein variations. Of the 16 loci analysed by electrophoresis, polymorphism was detected at following seven loci: Es-1, Amy-1, Akp-akp, Akp-2, Alb, Tf and 6-PGD. The other nine loci: Amy-3, Es-D, PGM, PHI, MDH, To, LDH, Hb-1 and Hb-2, were noted to be monomorphic. Genetic distance between pairs of native fowl and jungle fowls was estimated by a numerical taxonomic method. The Indonesian native fowl was genetically close to the Indonesian red jungle fowl, and the grey jungle fowl was genetically similar to the Ceylonese jungle fowl. It was also suggested that the green jungle fowl was genetically remote from the other jungle fowls and from the Indonesian native flow. The proportion of polymorphic loci (Ppoly), the expected average heterozygosity per individual $\bar{H}$, and the effective number of alleles per locus (Ne) were calculated to evaluate the genetic variabilities in the native and jungle fowls. The Indonesian native fowl exhibited slightly higher the proportion of polymorphic loci than the jungle fowls.
In a line X tester crossing programme (24 lines 2 testers) the general combining ability (GCA) and specific combining ability (SCA) effects were analyzed for five economic characters in the bivoltine silkworm, Bombyx mori L. The results showed desired GCA effects in 934D1 (9500), 934B (9789) and 934A1 (9855) for cocoon yield per 10,000 larvae brushed by number. Likewise, the lines found to be superior based on GCA effects for other characters were as follows; 931D (14.040 Kgs), 935E (17.023 Kga.), 934D1 (15.643 Kgs.) and 934B (15.687 Kgs.) for cocoon yield by weight: 931D (1.717 g) and 930E (1.796 g) for single cocoon weight; 932B (0.330 g) for single shell weight: 931D (1.717 g) and 930e (1.796 g) for single cocoon weight; 932B (0.330 g) for single shell weight; 932B (18.7%), 933A (18.86%) and 935A (19.89%) for shell ratio. SCA effects showed the superiority of 932D$\times$KA (9822 cocoon yield per 10,000 larvae brushed by number); 932A$\times$NB4D2 (16.933 Kgs. cocoon yield per 10,000 larvae brushed by weight); 931C$\times$KA (1.911 g single cocoon weight); 934$\times$NB4D2 (0.371 g single shell weight and 21.0% shell ratio). The analysis indicated non-additive gene action for all the five characters.
A multiplex polymerase chain reaction (PCR) assay was developed for the identification of two Candida species-albicans and dubliniensis. Three sets of primers were selected from different genomic sequences to specifically amplify a 516 bp fragment within the tops gene, specific for several species of the genus Candida (CCL primers); a 239 bp fragment within the $\alpha$INT1 gene, specific for Candida albicans (CAL primers); and a 175 bp fragment within the ALSD1 gene, specific for Candida dubliniensis (CDL primers). Using the primers in conjunction (multiplex PCR), we were able to detect both C. albicans and C. dubliniensis and to differentiate between them. The detection limit of the PCR assay was approximately 10 cells per milliliter of saline. Thus, this multiplex PCR assay can be applied for differentiation of C. albicans and C. dubliniensis from clinical specimens.
ByeongYong Jeong;Muhyun Kim;Tae-Ho Ham;Seong-Gyu Jang;Ah-Rim Lee;Min young Song;Soon-Wook Kwon;Joohyun Lee
한국작물학회:학술대회논문집
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한국작물학회 2022년도 추계학술대회
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pp.17-17
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2022
Leaves are an important organism for photosynthesis and transpiration. The shape of leaf is crucial factor affecting plant architecture. V-shape leaf rolling is enhancing canopy photosynthesis by increasing the CO2 penetration and the light capture by reducing the shadow between the leaves. Therefore, moderate leaf rolling is thought to more high grain yield per area than flat leaf. We investigated 278 KRICE_CORE accession's Adaxial Leaf Rolling Index (LRI) in first heading using the following equation. For each accession, genomic DNA was used for sequencing. We sequenced the genomics with ~8 X coverage to detect SNPS. Raw reads were aligned against the rice reference (IRGSP 1.0) for SNP identification and genotype calling. To generate genotype data for GWAS, SNPs were filtered with minor allele frequency 0.05. Finally, 841,134 high-quality SNPs were used for our GWAS. The significant threshold was -log10(P)>7.23. From the results, 2 significance SNP were detected. Considering the LD block of 250kbp, 60 candidate gene were selected including Hypothetical gene and Conserved gene. In this poster, we analyzed candidate gene affecting adaxial Leaf Rolling through single-trait GWAS.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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