• 제목/요약/키워드: Pectobacterium chrysanthemi

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Detection of Pectobacterium chrysanthemi Using Specific PCR Primers Designed from the 16S-23S rRNA Intergenic Spacer Region

  • Kwon, Soon-Wo;Myung, In-Sik;Go, Seung-Joo
    • The Plant Pathology Journal
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    • 제16권5호
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    • pp.252-256
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    • 2000
  • The 16S-23S rRNA intergenic spacer regions (ISRs) were sequenced and analyzed to design specific primer for identification of Pectobacterium chrysanthemi. Two types ISRs, large and small ISRs, were identified from three strains (ATCC 11663, KACC 10163 and KACC 10165) of P. chrysanthemi and Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum ATCC 15713.Large ISRs contained transfer RNA-Ile(tRNA$^{Ile}$)and tRNA$^{Ala}$, and small ISRs contained tRNA$^{Glu}$. Size of the small ISRs of P. chrysanthemi ranged on 354-356 bp, while it was 451 bp in small ISR of P. carotovorum subsp. carotovorum ATCC 15713. From hypervariable region of small ISRs, species-specific primer for P. chrysanthemi with 20 bp length (CHPG) was designed from hypervariable region of small ISRs, which was used as forward promer to detect P. chrysanthemi strains with R23-1R produced PCR product of about 260bp size (CHSF) only from P. chrysanthemi strains, not from other Pectobacterium spp. and Erwinia spp. Direct PCR from bacterial cell without extracting DNA successfully amplified a specific fragment, CHSF, from P. chrysanthemi ATCC 11663. The limit of PCR detection was 1${\pm}10^2$ cfu/ml.

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Analysis of cel and pel Genes from Pectobacterium chrysanthemi PY35 for Relatedness to Pathogenicity

  • Park, Sang-Ryeol;Lim, Woo-Jin;Kim, Min-Keun;Hong, Su-Young;Shin, Eun-Chule;Kim, Eun-Ju;Lee, Jong-Yeoul;Woo, Jong-Gyu;Kim, Hoon;Yun, Han-Dae
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제14권5호
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    • pp.1047-1051
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    • 2004
  • The phytopathogenic bacterium Pectobacterium chrysanthemi secretes multiple isozymes of plant cell wall disrupting enzyme such as pectate lyase and cellulase. The cel gene, existing in tandem with the pel gene, was isolated previously [10]. The role of Cel5Z and PelL1 in P. chrysanthemi PY35 pathogenicity on potato tissues was assessed by mutagenizing cloned cel gene and pel gene in tandem and recombining them with the chromosomal alleles. Strains with the Km cassette interposon in pelL1 or a double mutant showed a delay in the appearance of symptoms, suggesting that P. chrysanthemi PY35 pectate lyase PelL1 may playa minor role in soft-rot pathogenesis.

스트레스 관련 화합물 처리 및 병원균 감염에 의한 고구마 산성 퍼옥시다제 swpa2 발현 유도 (Induction of a Sweetpotato Anion Peroxidase swpa2 Gene Expression by Stress-related Chemicals and Pectobacterium chrysanthemi)

  • 김윤희;류선화;김기연;권석윤;방재욱;곽상수
    • Journal of Plant Biotechnology
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    • 제31권1호
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    • pp.83-88
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    • 2004
  • 스트레스 관련 화합물 및 병원균을 고구마 (Ipomoea batatas)잎에 처리하여 고구마 배양세포에서 분리한 산성 퍼옥시다제 swpa2 유전자의 발현을 RT-PCR로 분석하였다. Swpa2유전자는 건강한 식물체 조직에서는 발현되지 않았으나 각종 스트레스에 의해 발현이 유도되었다. Swpa2는 과산화수소 (440mM)처리에 의하여 강하게 발현이 유도되었고 NaCl (100mM), ABA (0.1mM), methyl jasmonate (MeJA, 0.1mM) 처리에 의하여도 발현이 유도되었다. 그러나 salicylic acid (SA)처리에 의해서는 발현이 유도되지 않아, 이 유전자는 SA와 MeJA의 신호전달에는 서로 다르게 관여함이 시사되었다. 또한 swpa2유전자는 무름병을 유발하는 박테리아(Pectobacterium chrysanthemii)의 감염에 의하여 강하게 발현되므로, 이 POD는 병저항성에 관여함을 알 수 있었다. 따라서 swpa2유전자는 각종 비생물학적 스트레스 뿐 아니라 생물학적 스트레스에 수반되는 산화 스트레스를 극복하는데 관여함이 강하게 제시되었다.

Phylogenetic Analysis of Pectobacterium Species Using the 16S-23S rRNA Intergenic Spacer Regions

  • Kwon, Soon-Wo;Cheun, Meung-Sook;Kim, Sang-Hee;Lim, Chun-Keun
    • The Plant Pathology Journal
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    • 제16권2호
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    • pp.98-104
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    • 2000
  • For the taxonomic evaluaition, 15 strains of the genus Pectobacterium and Erwinia were analyzed for 16S-23S rDNA intergenic spacer regions (ISRs). These species contained two types of ISRs, large and small ISRs. Large ISRs were on the range of 474-569 bp size, and coding transfer $\textrm{RNA}^{11e}$($\textrm{tRNA}^{11e}$) and $\textrm{tRNA}^{Ala}$. Small ISRs were 354-459 bp in length and coding $\textrm{tRNA}^{Glu}$. The sequence variations of two ISRs among species and strains were very high as compared with 16S rRNA gene sequences. By phylogenetic trees on the basis of two ISRs, Pectobacterium ere differentiated into P. carotovorum-P. cactiaidum group and P. chrysanthemi group. However, the taxonomic position of E. cypripedii and E. rhapontici, which were not clear on taxonomic delineation between Pectobacterium and Erwinia, were not clearly resolved on the basis of ISRs.

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Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum LY34에서 Lsoamylase 유전자 클로닝 및 효소 활성의 필수 잔기 확인 (Cloning of Isoamylase Gene of Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum LY34 and Identification of Essential Residues of Enzyme)

  • 조계만;김은주;레누카라디아마스;샤모허마드아스라풀;홍선주;김종옥;신기재;이영한;김훈;윤한대
    • 생명과학회지
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    • 제17권9호통권89호
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    • pp.1182-1190
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    • 2007
  • 연부균인 Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum LY34로부터 이소아밀라제 유전자 (glgX)를 클로닝한 후 대장균 숙주에서 발현시켰다. 이 효소는 ${\alpha}-1$,6-글루코시드 결합을 가수분해하였으나 ${\alpha}-1$,4-글루코시드 결합은 가수분해 하지 못하였다. 유전자는 658개의 아미노산을 암호화하는 1,977개의 DNA 염기서열로 이루어져 있었고 이 유전자에 의해 암호화되는 아미노산 서열을 다른 아밀라제 효소들과 비교한 결과 이소아밀라제 유전자와 유사하였으며 4개의 보존 지역을 확인하였다. SDS-PAGE에 의해 확인된 단백질의 크기는 약 74 kDa 이었다. 효소 활성은 pH 7.0, $40^{\circ}C$에서 가장 높은 활성을 나타났으며 $Ca^{2+}$ 첨가로 활성이 증가되었다. 이 효소의 보존되어 있는 아미노산 중에 글루탐산 370번, 아스파르트산 335번 및 442번 잔기를 알라닌으로 치환시킨 결과 활성이 약해졌다. 이 결과로부터 이들 잔기들이 효소활성에 중요한 역할을 하는 것으로 추정된다.