Avian influenza (AI) virus (AIV) is distributed worldwide and it has been isolated from various species of wild and domestic birds. AI transfers with high speed and shows diverse pathogenicity syndroms. In Korea, several low Pathogenic AIV, H9N2, have been isolated from the commercial farms with severe decrease of egg production and mortality resulted in severe economic loss since 1996. Therefore, it has been requested to develop AI vaccines to prevent clinical signs and economic losses from the field infection of AIV. To develop a killed vaccine that efficiently prevents low pathogenic AIV (H9N2), evaluation on the pathogenicity and selection of an inactivator for H9N2 is taking place and is being tested safety and immunogenicity of vaccine produced. Based on the pathogenicity test and viral reisolation test, the ADL0401 isolate is the characteristic low pathogenic AIVs and has fairly similar biologic functions compared with MS96 which is the official low pathogenic AIV (H9N2) and one of the predominant AIV isolated from poultry farms in Korea. In antigenicity tests, the ADL0401 and MS96 virus have no significant antigenic difference. In inactivation tests, the ADL0401 isolates can be easily inactivated with $0.1\%$ Formalin at $37^{\circ}C$ within 1 hour with a little decrease of HA titer. The vaccine developed in the present report has no harmful effect on bird and forms good immune capability. Therefore, the isolates, ADL0401 can be used for a killed vaccine which can reduce the clinical signs and viral shedding in the birds infected with H9N2 low pathogenic AIVs.
A new leaf blight was found on the perilla leaves at the major perilla-cultivating areas such as Kangdong in Busan and Miryang in Kyungnam province. Symptoms of the disease initially appeared on the edge of perilla leaves showing black necrosis and drying, and the infected leaves were finally fell down. The SD1 isolate showing strong pathogenicity and forming abundant conidial spores on the diseased lesions was isolated. Among the tested media, mycelial growth was abundant on PDA (Potato Dextrose Agar) medium at $25^{\circ}C$ under dark condition, but conidial formation was greater on V8A (V-8 juice A8ar) medium than that on PDA medium. Optimal temperatures for mycelial growth and conidial formation on PDA medium were respectively $25^{\circ}C$ and 3$0^{\circ}C$. The rate of conidial germination and the elongation of germ tube were more effective in 10% tomato juice than those in PDB (Potato Dextrose Broth) and sterile water. In 10% tomato juice, the rate of conidial germination and the length of germ tube were 100% after incubation for 24k and 535.2${\mu}{\textrm}{m}$ after incubation for 36hr, respectively. According to the result of pathogenicity, it revealed that conidial suspention with 10% tomato juice was the most effective for pathogenicity test showing as 100% of disease incidence, and the symptoms caused by artificial inoculum were same as those of naturally infected perilla. In this study, the SD1 isolate according to the results of morphological characteristics, the incubation characteristics and pathogenicity was firstly identified A. alternata, and named as leaf blight of perilla.
Fowl typhoid(FT) caused by Salmonella gallinarum is an infectious, egg-transmitted disease and characterized by swollen bronze liver, greenish-yellow diarrhea and high mortality in growing and adult chickens. Since 1992 the outbreak of FT has been increased. Several problems have been occurred such as absence of appropriate vaccines and lack of useful therapeutic methods. In these studies we investigated the pathogenicity of S gallinarum isolated in chickens. To compare the pathogenicity among the species of chickens, all chickens were challenged intramuscularly or orally with $1{\times}10^7$ CFU of S gallinarum. The brown-colored layers were more susceptible and white leghone chickens were more resistant than other species. In the brown layer chickens orally challenged, lethal doses ($LD_{50}$) of the isolates were inoculated at 1 day, 2 weeks, 4 weeks and 8 weeks old chickens with amount of $10^{4.2}$, $10^{4.7}$, $10^{7.0}$ and $10^{7.6}$ CFU, respectively. The chickens which were intramuscularly challenged with the less amount than $10^2$ CFU showed higher mortality than that of the chickens orally inoculated with same dose. Also, we investigated the recovery rates of bacteria from various organs of survival chickens which were challenged orally with $5{\times}l0^7$ CFU of S gallinarum. The bacteria was more frequently and isolated earlier from the liver and spleen than from any other ogans. In the pathogenicity test, the white-leghorn chickens which were known as resistant-strain against Salmonella were artificially immunosuppressed using bursectomy and/or dexamethasone treatment. Mortality of chickens with both bursectomized and treated with dexamethasone was higher(90%) than that of the control group(10%), the bursectomized chickens(10%) and the dexamethasone only treated group(20%). It was suggested that the protective mechanism in chickens against S gallinarum may be required both the functions of B-cells and T-cells.
This study investigated the phylogenetic classification and pathogenicity of 6 infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV) strains isolated from salmonid fish in Gangwon-do, Korea. Based on the nucleotide sequence of mid-G region, all six strains belong to J genotype, of which 5 are J-Nagano type and 1 J-Shizuoka type. In a challenge test, 5 isolates of J-Nagano type IHNV showed a various mortalities as 2 isolates induced a high mortality of 100% and the other 3 isolates induced mortalities of 50, 30, and 20% after intraperitoneal injection in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). Meanwhile no mortality was occurred by 1 isolate of J-Shizuoka type virus. Thus, it seems that there might be no relation between genotype and pathogenicity within IHNV J genotypes. This is contrary to previous studies where reported a higher pathogenicity of J-Shizuoka type virus than J-Nagano type virus in rainbow trout. Further examination will be required to clarify this since only one J-Shizuoka type virus was analyzed in this study.
28 porcine enteroviruses were isolated from 86 pig-feces of 9 swine farms located in south region, Chung-buk, from March to September 1990. Physico-chemical properties and pathogenicity of isolates were investigated. Results obtained throughout experiments are summarized as follows. According to the age, weanlings(40-90 days), sucklings(10-30 days) and adult pigs(6 months over) showed the isolation rate of 67%. 8% and 4%, respectively. By physico-chemical tests, YD-90/22, YD-90/43 and YD-90/64 strains were found to be ether, chloroform and PH stable. Nucleic acid test suggests the virus to have a DNA genome. Most of the Isolates were not evident of hemagglutinin using erythrocytes from various mammalian & avian. 22 strains among the isolates were shown CPE type I and the remainders were CPE type II. 3 strains among isolates of CPE type I strains were neutralized with high titers to serotype 2 antiserum. In the study on virus growth curve in PK-l5 cells, YD-90/22, YD-90/43 and YD-90/64 strains showed the maximum infectivity titers($10^{6.0}-l0^{6.5} TCID({50}ml$) at 4days post inoculation(PI). When 30 day-old commercial piglets were inoculated only intraoral route with the YD-90/22 strain at $10^{6.0} TCID_{50}ml,$ piglets not showed the symptoms. But piglets inoculated by intramuscle route, intraoral and intramuscle route after pretreat with dexamethasone(2.5mg /kg) for 5 days were shown the symptoms of anorexia, diarrhea, pyrexia and ataxia at 4th-6th days PI. The viral reisolation in the virus-inoculated piglets was examined from feces. The viruses were recovered intermittently from 2nd to 16th day PI and at 4th-6th day PI, all piglets excreted viruses.
Blue mold is the most important postharvest disease of apples in Korea. Apple fruits with blue mold symptoms were collected from storages in different locations in Korea and were investigated for their association with Penicillium species. A total of sixty five isolates of Penicillium were sampled from the collected apples. Based on DNA sequence analysis of ${\beta}$-tublin gene and ITS and lsu rDNA (ID region) and morphological characteristics, they were identified as P. crustosum, P. expansum, P. italicum, P. solitum and P. sp.. P. sp. which is closely related to P. hirsutum is a new species, not reported before. P. expansum (35%) was predominant species followed by P. crustosum. The phylogenetic tree inferred from combined ${\beta}$-tublin and ID region sequence showed good correlation with species that are defined by morphological characteristics. In pathogenicity test, apples were wound-inoculated with conidial suspension and incubated at $20-22^{\circ}C$. The most severe and destructive species was P. expansum. The species caused a decayed area 42-50mm in diameter after 8-10days. Decayed area caused by P. crustosum and P. sp. was 26-32mm and 20-26mm, respectively. This is the first record of P. crustosum, P. italicum and P. sp. from apple in Korea.
Fusarium head blight (FHB) caused by Fusarium species is a major disease of wheat and barley around the world. FHB causes yield reductions and contamination of grains with trichothecene mycotoxins including; nivalenol (NIV), deoxynivalenol (DON), 3-acetyldeoxynivalenol (3-ADON), and 15-acetyldeoxynivalenol (15-ADON). The objectives of this study were to identify strains of F. graminearum isolated in Korea from 2012-harvested wheat grain and to test the pathogenicity of these NIV- and DON-producing isolates. Three hundred and four samples of wheat grain, harvested in 2012 in Chungnam, Chungbuk, Gyeongnam, Jeonbuk, Jeonnam, and Gangwon provinces were collected. We recovered 44 isolates from the 304 samples, based on the PCR amplification of internal transcribed spacer (ITS) rRNA region and sequencing. Our findings indicate that F. asiaticum was the predominant (95% of all isolates) species in Korea. We recovered both F. asiaticum and F. graminearum from samples collected in Chungnam province. Of the 44 isolates recovered, 36 isolates had a NIV genotype while 8 isolates belonged to the DON genotype (3-ADON and 15-ADON). In order to characterize the pathogenicity of the strains collected, disease severity was assessed visually on various greenhouse-grown wheat cultivars inoculated using both NIV- and DON-producing isolates. Our results suggest that Korean F. graminearum isolates from wheat belong to F. asiaticum producing NIV, and both F. graminearum and F. asiaticum are not significantly different on virulence in wheat cultivars.
Pectobacterium, which causes soft rot disease, is divided into 18 species based on the current classification. A total of 225 Pectobacterium strains were isolated from 10 main cultivation regions of potato (Solanum tuberosum), napa cabbage (Brassica rapa subsp. pekinensis), and radish (Raphanus sativus) in South Korea; 202 isolates (90%) were from potato, 18 from napa cabbage, and five from radish. Strains were identified using the Biolog test and phylogenetic analysis. The pathogenicity and swimming motility were tested at four different temperatures. Pectolytic activity and plant cell-wall degrading enzyme (PCWDE) activity were evaluated for six species (P. carotovorum subsp. carotovorum, Pcc; P. odoriferum, Pod; P. brasiliense, Pbr; P. versatile, Pve; P. polaris, Ppo; P. parmentieri, Ppa). Pod, Pcc, Pbr, and Pve were the most prevalent species. Although P. atrosepticum is a widespread pathogen in other countries, it was not found here. This is the first report of Ppo, Ppa, and Pve in South Korea. Pectobacterium species showed stronger activity at 28℃ and 32℃ than at 24℃, and showed weak activity at 37℃. Pectolytic activity decreased with increasing temperature. Activity of pectate lyase was not significantly affected by temperature. Activity of protease, cellulase, and polygalacturonase decreased with increasing temperature. The inability of isolated Pectobacterium to soften host tissues at 37℃ may be a consequence of decreased motility and PCWDE activity. These data suggest that future increases in temperature as a result of climate change may affect the population dynamics of Pectobacterium.
Root rot of Cucurbitaceae plants, caused by Monosporascus cannonballus, is one of the recently described diseases in Korea. The distribution and pathogenicity of M. cannonballus were examined by field and in vitro experiments. Root rot caused by M. cannonballus occurred on melon, oriental melon, watermelon and cucumber plants. In two years of disease survey, the disease occurred at 10 and 32 fields in 1997 and 1998, respectively, which were located at Kimhae, Chinju, and Namhae in Kyeongnam province, at Kwangyang in Chonnam province, at Kwangju city, and at Yeoju and Inchon in Kyeonggi province. The disease progress in a melon field at Namhae was not observed until the middle stage of plant growth, but rapidly increased at the fruit maturing stage, resulting in more than 50% yield loss. Isolation rate of M. cannonballus was 36.7% from wilted hosts. Fusarium oxysporum and Rhizoctonia solani were also frequently isolated. In vitro test, seedlings wilted after 7∼14 days of inoculation, and perithecia were formed in infected roots 21 days later. Two cucumber cultivars, Baekbong and Eunhwa, were resistant to the disease.
This research was conducted to develop a simple and effective method for pathogenicity assay of the causal agent of bacterial canker on kiwifruit. The developed method is a modified version of syringe-infiltration method that is used in the assay fer the hypersensitive response assay. Bacterial cell suspensions in 50 mM potassium phosphate buffer(pH 7.5) were infiltrated using a plastic syringe with 25G needle into primary leaves of five-year-old kiwifruit. Typical symptoms of bacterial canker were observed five days after infiltration. Symptoms developed on the leaves were detected in these inocula that treated above 10$^4$cfu/ml or above. Using this technique, host range of Pseudomonas syringae pv. actinidiae and three other plant pathogenic pseudomonads were investigated for 25 different plant species. The various symptoms were showed depend-ing on different plant species and inoculated pathogen combinations. This method has the advantage that symptoms can be showed faster compared to other methods and high humid conditions are not required.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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