A Gram-positive, rod-shaped bacteria named DY5 was isolated from a peat sample collected from Daeam mountain in Korea. The culture filtrate of the bacterial isolate DY5 showed a broad spectrum of antifungal activity on various crop pathogenic fungi such as Trichoderma koningii, Fusarium oxysporum, Colletotrichum gloeosporioides, Sclerotinia sclerotiorum, Rhizoctonia solani AG-1(IA) For the identification of the DY5, morphological, biochemical, API 50 CHB test, analysis of fatty acid and molecular phylogenetic approaches were performed. The DY5 was found to be a member of the genus Paenibacillus on the basis of morphological and biochemical analysis. The 16S rRNA of DY5 showed high similarity(98%) with Paenibacillus polymyxa. On the basis of these results, the DY5 was identified as Paenibacillus polymyxa. Antifungal substance of the DY5 would be mild alkaline proteine molecule. The DY5 seems to have a great potential to be a biocontrol agent against various crop pathogens.
Paenibacillus polymyxa is known to be a plant-growth-promoting rhizobacterium. The present study describes a quantitative polymerase chain reaction (qPCR) assay for the specific detection and quantitation of P. polymyxa using a primer pair based on the sequence of a membrane-fusion protein for the amplification of a 268 bp DNA fragment. This study reports that the qPCR-based method is applicable for the rapid and sensitive detection of P. polymyxa and can be used as an alternative method for agricultural soil monitoring.
This study was conducted to investigate the pathogenicity of Paenibacillus (R) polymyxa JB 115 and single oral dose toxicity of culture broth containing (${\beta}$-glucan (CBG-JB 115) produced from P. polymyxa JB 115 in Sprague-Dawely rats of both sexes for 14 days. After oral administration of P. polymyxa JB 115 into rats, we could not find any abnormal clinical signs and variation in the body weight and temperature as compared with control group. We also investigated the acute toxicity of CBG-JB 115. As the results, there were no clinical signs and variance in the body weight and temperature related with CBG-JB 115 in comparison with the control group. From the this experiment, we could not find out any significant pathogenicity and toxicity induced by P. polymyxa JB 115 or by CBG-JB 115. Results of this study demonstrated that consumption of P. polymyxa JB 115 and its culture broth containing (${\beta}$-glucan was not associated with any obvious signs of toxicity in Sprague-Dawely rats even following consumption of large quantities.
취나물 재배 시 문제가 되는 점무늬병(Septoria sp.)에 대해 항균활성을 나타내는 세균 P. polymyxa JE201를 분리하였다. JE201 균주를 이용하여 점무늬병 방제효과 포장검정을 시행한 결과, 대조구로 사용한 세레나데 맥스와 비슷한 정도의 방제효과를 나타낼 정도로 효과가 있었으며, 다른 식물 병원성 진균에 대한 항균활성 스펙트럼을 조사한 결과, 10종 중 9종에 대해서도 균사생장억제력이 크게 나타나는 것으로 보아, 앞으로 추가적인 연구를 통해 다른 병에도 적용할 수 있을 것으로 기대된다.
새로운 항균물질의 탐색이 활발하다. 선행연구에서 새로운 항균활성물질을 생산하는 세균이 한국토양에서 분리되어 Paenibacillus polymyxa DY1으로 동정 및 명명되었으며, 다제내성 장내세균들에 대한 항균활성 특성이 규명되어 새로운 항생물질로서 잠재력을 보여주었다. 본 연구에서 배지의 탄소원, 무기질소원, 유기질소원, 아미노산, 무기염류 등의 영양 조성물과 물리화학적 생장조건이 P. polymyxa DY1 균체의 생장과 항균활성 생산에 미치는 영향을 조사하였다. 균체의 생장을 위하여 기초배지에 0.6% dextrose, 1.4% ammonium phosphate monobasic, 0.9% peptone, 2.4% glutamine, 2 mM sodium molibdate를 가한 후 pH를 8.0으로 조정하고 $35^{\circ}C$에서 30$\sim$48시간동안 180 rpm으로 진탕배양하는 것이 가장 적합하였다. P. polymyxa DY1 항균활성의 생산은 기초배지에 1% dextrose, 1.5% ammonium sulfate, 1.1% casamino acid, 1.9% aspartic acid, 2 mM ferrous sulfate를 가한 배지를 pH 8.0으로 조정하고 $35^{\circ}C$에서 30$\sim$48시간동안 180 rpm으로 진탕배양하는 조건에서 가장 높았다.
가축 질병의 제어를 위해 면역증강제인 베타글루칸 생성균으로 분리한 Paenibacillus polymyxa JB115의 배양액이 가축병원성 세균에 대한 항균성을 보임에 따라, 배양액의 동결건조 분말을 대상으로 항균물질의 특성을 조사하여 다기능 가축 사료첨가제로의 개발 가능성을 타진하였다. 그 결과, P. polymyxa JB115에서 생산된 항균물질은 E. coli, S. aureus, S. choleraesuis 및 P. aeruginosa 등 가축 병원성 세균들에 대해 살균 또는 정균 활성을 보였으며, 항균범위도 광범위하게 나타났다. 또한 이 물질은 높은 내열성과 pH 안정성을 지녀 배양액의 제형화에도 적합하였으며, 인공 담즙산 및 인공 위액에서도 안정하여 사료첨가제로 투여시 가축의 장내 병원세균에 대해서 항균 활성을 충분히 나타낼 수 있을 것으로 판단되었다. 상기의 결과로부터 P. polymyxa JB115의 배양액은 베타글루칸 이외에도 가축 병원성 세균에 대한 항균물질을 지니고 있어서, 다기능 사료첨가제로 개발 가능함을 확인하였다.
항생제 내성 세균의 출현으로 새로운 항생물질의 개발에 대한 필요성이 대두되고 있다. 본 연구에서는 새로운 항균활성물질을 개발하고자 강원도 대암산 용늪 토양으로부터 새로운 항균물질을 생산하는 균을 분리하였고, 이를 동정하였다. 생화학적인 시험과 16S ribosomal DNA 염기서열 분석결과 Paenibacillus polymyxa균과 가장 높은 상동성을 보여주었다. 지방산 조성의 분석에서도 이 균주는 Paenibacillus polymyxa와 가장 가까웠다. 이 균주가 생산하는 항균물질은 1군 법정 전염병을 일으키는 Samonella enterica serovar Typhi와 Shigella dysentery, enterohaemorrhagic Eschelichia coli, 그리고 Vibrio cholera등의 병원성 세균에 성장억제 효과를 나타냈으며, 다른 일반 식중독 장내세균에서도 성장억제 효과를 나타냈다. 이 균주가 생산하는 항균활성 물질은 과거에 보고된 것과 다른 새로운 것으로 보이며, 광범위한 항균활성으로 인하여 새로운 항생물질 개발 후보로 많은 잠재력을 가진 것으로 평가된다.
Root discs of 4-year-old ginseng, Panax ginseng C. A. Meyer, were inoculated with the higher($10^8$ colonyforming units(CFU)/ml) and lower($10^6\;or\;10^5$ CFU/ml) initial inoculum levels of a plant-growth promoting rhizobacterium(PGPR), Paenibacillus polymyxa GBR-1 to examine rot symptom development and bacterial population changes on the root discs. At the higher inoculum level, brown rot symptoms developed and expanded on the whole root discs in which the bacterial population increased continuously up to 4 days after inoculation. In light and electron microscopy, ginseng root cells on the inoculation sites were extensively decayed, which were characterized by dissolved cell walls and destructed cytoplasmic contents. However, no rot symptoms were developed and the bacterial population increased only during the initial two days of inoculation at the lower inoculum level($10^6$ CFU/ml) of P. polymyxa GBR-1. At the lower inoculum level($10^5$ CFU/ml), boundary layers with parallel periclinal cell divisions, structurally similar to wound periderm, were formed internal to the inoculation sites, beneath which the cells were intact containing numerous normal-looking starch granules and no disorganized cell organelles, suggesting that these structural features may be related to the suppression of symptom development, a histological defense mechanism.
이 연구에서는 여러 미생물에 항균활성을 갖는 토양세균을 분리하고 그들이 생성하는 항균물질과 그 효과를 조사하였다. 많은 세균 분리균주 중 Bacillus subtilis DS660과 Paenibacillus polymyxa DS842은 6가지 인간 피부 상재균과 3종의 병원성 세균에 대하여 높은 항균활성을 나타내었다. DS660과 DS842 균주는 대부분의 대상 세균과 진균에 대하여 NA 배지 상에서 각각 직경 15.3~26.8과 11.3~27.5 mm의 생장 저해대를 형성하는 우수한 항균활성을 나타내었다. DS660과 DS842 균주는 siderophore를 생산하였는데 각각 $570{\pm}8$과 $1700{\pm}15{\mu}mol/ml$의 최대 생산량을 나타내었고, 균주 배양 상등액의 에틸 아세테이트 추출물의 분석은 그들의 glycolipid 계면활성물질 생성을 나타내며 이에 의해 배양 상등액의 표면장력을 60 mN/m에서 각각 40.3과 30.3 mN/m으로 현저하게 낮추는 계면활성을 보였다. 또한 두 균주는 $169.2{\pm}9.9$와 $357.2{\pm}13.7nmol/min/mg$ protein의 ${\beta}$-1,3-glucanase 생산을 나타낼 뿐만 아니라 세균의 세포벽 성분을 용해하는 능력을 지녔다. 이러한 결과들은 B. subtilis DS660과 P. polymyxa DS842가 일부 중요한 인간 피부 상재균과 병원성 세균에 대한 효율적인 생물제어제로 사용될 수 있음을 암시한다.
In this study, bacterial strains were isolated from soils from 30 locations of Samcheok, Gangwon province. Of the isolated strains, seven showed potential plant growth promoting and antagonistic activities. Based on cultural and morphological characterization, and 16S rRNA gene sequencing, these strains were identified as Paenibacillus species. All seven strains produced ammonia, cellulase, hydrocyanic acid, indole-3-acetic acid, protease, phosphatase, and siderophores. They also inhibited the mycelial growth of Fusarium oxysporum f. sp. radicis-lycopersici in vitro. The seven Paenibacillus strains enhanced a range of growth parameters in tomato plants under greenhouse conditions, in comparison with non-inoculated control plants. Notably, treatment of tomato plants with one identified strain, P. polymyxa SC09-21, resulted in 80.0% suppression of fusarium crown and root rot under greenhouse conditions. The plant growth promoting and antifungal activity of P. polymyxa SC09-21 identified in this study highlight its potential suitability as a bioinoculant.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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