Today swine respiratory disease is one of the most important diseases because of its economic losses and severe infection nationwide, and swine society as well as veterinary service are trying to prevent the diseases in Korea. This study would like to obtain some information useful for the control of the diseases. A total of 174 lung specimens with lesion consisted of 3 sorts; 60 were collected from nursey pigs requested for diagnostic service from March of 2006 to October of 2007, 58 finishing pigs and 56 sows were selected from slaughterhouse from September to November 2007. In the detection test of pathogens by PCR, porcine circovirus 2 (PCV2), porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) and Mycoplasma hyopneumoniae were positive in 95.4%, 31.6%, and 20.1%, respectively. Double infection rate with PCV2 and PRRS was 30.4%, PCV2 and M hyopneumoniae was 19.5%, triple infection with PCV2, PRRS and M hyopneumoniae was 5.7%, respectively.
In this study, a DNA-launched reverse genetics system was developed from a type 2 porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) strain, KNU-12. The complete genome of 15,412 nucleotides was assembled as a single cDNA clone and placed under the eukaryotic CMV promoter. Upon transfection of BHK-tailless pCD163 cells with a full-length cDNA clone, viable and infectious type 2 progeny PRRSV were rescued. The reconstituted virus was found to maintain growth properties similar to those of the parental virus in porcine alveolar macrophage (PAM) cells. With the availability of this type 2 PRRSV infectious clone, we first explored the biological relevance of ORF5a in the PRRSV replication cycle. Therefore, we used a PRRSV reverse genetics system to generate an ORF5a knockout mutant clone by changing the ORF5a translation start codon and introducing a stop codon at the 7th codon of ORF5a. The ORF5a knockout mutant was found to exhibit a lack of infectivity in both BHK-tailless pCD163 and PAM-pCD163 cells, suggesting that inactivation of ORF5a expression is lethal for infectious virus production. In order to restore the ORF5a gene-deleted PRRSV, complementing cell lines were established to stably express the ORF5a protein of PRRSV. ORF5a-expressing cells were capable of supporting the production of the replicationdefective virus, indicating complementation of the impaired ORF5a gene function of PRRSV in trans.
Porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) has plagued pig populations worldwide causing severe economical impacts. In order to establish effective strategies for prevention of PRRS, infection patterns on the herd level are primarily evaluated. In the present study, therefore, serological and virological analyses were conducted in 20 pig farms suffering from PRRS. Seroprevalence levels in each farm were grouped into 3 patterns: SN (Stable sow groups/Not infected piglet groups, SI (Stable sow groups and Infected piglet groups), and UI (Unstable sow groups and Infected piglet groups). The rates of each serological pattern were 15% (n=3), 10% (n=2), and 75% (n=15), respectively. In addition, the pattern analysis was extended to virological monitoring on the same farms that further included suckling pig groups. As a result, the infection pattern was classified into 4 categories: SNI (Stable sow groups/Not infected suckler groups/Infected piglet groups), SII (Stable sow groups/Infected suckler groups/Infected piglet groups), UNI (Unstable sow groups/Not infected suckler groups/Infected piglet groups), and UII (Unstable sow groups/Infected suckler groups/Infected piglet groups). The rates of each viroprevalence were estimated at 50% (n=10), 30% (n=6), 10% (n=2), and 10% (n=2), respectively. PRRSV viroprevalence results of suckling pig groups revealed that 8 farms were considered virus positive. In 2 farms among these farms, PRRSV appeared to be transmitted vertically to suckling piglets from their sows. In contrast, piglet-to-piglet horizontal transmission of PRRSV seemed to occur in sucking herds of the remaining farms. Thus, this virological analysis on suckling piglets will provide useful information to understand PRRSV transmission routes during the suckling period and to improve a PRRS control programs. Our seroprevalence and viroprevalence data found that infection patterns between sow and piglet groups are not always coincident in the same farm. Remarkably, 15 farms belonging to the UI seroprevalence pattern showed four distinct viroprevalence patterns (SNI; 7, SII; 4, UNI; 2 and UII; 2). Among these farms, 11 farms with unstable seroprevalence sow groups were further identified as the stable viroprevalence pattern. These results indicated that despite the absence of typical seroconversion, PRRSV infection was detected in several farms, implying the limitation of serological analysis. Taken together, our data strongly suggests that both seroprevalence and viroprevalence should be determined in parallel so that a PRRS control strategies can be efficiently developed on a farm level.
More than 20 years after the first report of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) in Korea, the disease is still having major impact on domestic pig health and relevant industries. Although ELISA tests are commonly used by veterinarians to guide herd management, data on diagnostic performance of the test in field settings are very limited. The objective of this study was to evaluate two commercially available PRRSV ELISA (IDEXX PRRS X3 ELISA and Bionote PRRSV ELISA 4.0) to detect antibodies against PRRSV on serum samples. To this end, a total of 1,108 sera were recruited from 35 swine farms located in Gyeonggi province and tested at the Gyeonggi Province Veterinary Service Center. All tests were performed according to the manufacturer's instructions, by laboratory technicians who routinely perform PRRS testing on blood samples. Samples were collected from two sources of swine populations with different PRRS prevalence; 60 samples (5.4%) were originated from breeding farms and the remaining 1,048 samples (94.6%) were from farrow-to-finish farms. We applied Bayesian latent class model (LCM) for two-tests in the two-population when the accuracy of the gold standard is not available. The model estimated that Bionote ELISA was a bit more specific but slightly less sensitive. The estimated sensitivity and specificity of the IDEXX ELISA were 99.8% (95% CI 98.1-100%) and 86.4% (95% CI 81.4-96.5%), respectively. Sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value for Bionote kit were 98.7% (95% CI 92.8-100%), 89.8% (95% CI 86.2-93.1%), 93.8% (95% CI 91.5-96.0%), and 97.8% (95% CI 87.1-100%), respectively. Based on the Bayesian 95% credible intervals, the sensitivity and specificity of the two ELISAs were not significantly different each other when assuming that two kits were imperfect, indicating that two kits performed equally well in terms of sensitivity and specificity in our filed setting.
As sessile organisms, plants are exposed to persistently changing stresses and have to be able to interpret and respond to them. The stresses, drought, salinity, chemicals, cold and hot temperatures, and various pathogen attacks have interconnected effects on plants, resulting in the disruption of protein homeostasis. Maintenance of proteins in their functional native conformations and preventing aggregation of non-native proteins are important for cell survival under stress. Heat shock proteins (HSPs) functioning as molecular chaperones are the key components responsible for protein folding, assembly, translocation, and degradation under stress conditions and in many normal cellular processes. Plants respond to pathogen invasion using two different innate immune responses mediated by pattern recognition receptors (PRRs) or resistance (R) proteins. HSPs play an indispensable role as molecular chaperones in the quality control of plasma membrane-resident PRRs and intracellular R proteins against potential invaders. Here, we specifically discuss the functional involvement of cytosolic and endoplasmic reticulum (ER) HSPs/chaperones in plant immunity to obtain an integrated understanding of the immune responses in plant cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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