The authors observed the effect of estrogen and progesterone on the submaxillary glands of female albino rabbits ovariectomized bilaterally.
The animals were injected estrogen 25 ㎍ /kg, day intramuscullarly for 1 week, Progesterone was also injected intramuscullarly 0.5 ㎍/kg, day for five days after estrogen injection.
After hormone injection, salivary glands were removed under ether anesthesia and the sections were stained with H-E stain for microscopic examination.
In the estrogen injected-ovariectomized rabbits, glandular epithelial cells and a part of striated duct cells have high reactivity for hematoxylin and observed the proliferation or hypertrophy of interlobular connective tissues.
In the estrogen-progesterone injected group, lesser significant changes than estrogen injected group were observed.
This experiment was conducted to investigate how the lactation regulation such as restricted-lactation and early weaning during the suckling period influences on ovarian functions and change in serum levels of progesterone in primiparous rats. All the rats were raised in the individual cage from a few days before parturition through the suckling period. The normal lactation(NL) groups were controled 8 pups. The restricted-lactation(RL) and weaned(W) groups were subdivided into 5 subgroups as RL0, RL5, RL10, RL15 and RL20 as well as W0, W5, W10, W15, and W20 according to the day of onset of suckling. The number of pups were regulated from 8 to 4 on experimental strating day in RL gropus, and also perfectly weaned on the each on-set day in W groups. The results obtained were summarized as follows: 1. During the whole suckling period of 25 days the pups in RL group grew significantly(P<005) faster than those in normal-lactation(NL) group. The pups in earlier RL group grew significantly(P<0.05) faster than those in later RL rats, and there was no found any significant difference in body weight of pups between RL20 and NL group. The gestation period and litter size were found to be 21.53$\pm$0.04 days and 13.75$\pm$0.07, respectively. 2. The estrous cycle was not expressed in the NL group through the whole suckling period. An irregular estrous cycle was found around day 20 in RL0 group, and the regular estrous cycles were exhibited continuously from day 10 in the day 0 weaned rats. 3. In the rats of NL group the serum progesterone concentration increased from 33.16$\pm$2.64ng/$m\ell$ on day 0 to 122.5$\pm$53.68 ng/$m\ell$ on day 10, and then decreased slightly to 97.30$\pm$3.21 ng/$m\ell$ on day 20, but then decreased abruptly. However, the serum level of progesterone decreased greatly(P<0.05) in 5 to 10 days following suckling restriction in the rats from which suckling began to be under restriction on day 0 or day 15. In the early weaning group the significant ( (P<0.05) decrease in progesterone concentration was found similarly in 48 hours following weaning in all the rats weaned on day 0 through day 20. It was suggested that lactation stimulation is a very pivotal on the function of ovary.
Objective: This study was carried out to investigate the effects of 3-dimensional co-culture of human endometrial cells decidualized with progesterone and TGF-${\beta}1$ on the development of 2-cell mouse embryos. Methods: Stromal and epithelial cells isolated from human endometrial tissue were immunostained for cytokeratin and vimentin. Expression of TGF-${\beta}1$, its receptor-1, -2, integrin-${\beta}3$ and prolactin in mono or co-culture according to three different hormone conditions was investigated by RT-PCR. Differential staining was used to investigate the number of ICM and trophectoderm of hatched mouse blastocysts in different three conditions. Results: The immunohistochemical study was positive for cytokeratin or vimentin and confirmed that epithelial and stromal cells were isolated from endometrial tissue successfully. In co-culture, TGF-${\beta}1$, its receptor-1, integrin-${\beta}3$ and prolactin except TGF-${\beta}1$-r2 were expressed in progesterone dominant condition. The hatching and attaching rate were higher in the co-culture with decidualized cells (p<0.05). However, we observed that lots of the incomplete hatched blactocysts attached on non-decidualized cells. The ICM number of hatched mouse blastocysts was higher in co-culture with decidualized and non decidualized cells than media only culture (p<0.05). The trophectoderm number of hatched blastocyst was higher in the co-culture with decidualized cells than non-decidualized cells or media only culture (p<0.05). Conclusion: The administration of progesterone, estrogen and TGF-$\beta$ could induce decidualization of stromal and epithelial cells isolated from human endometrial tissue using 3-dimensional co-culture, and the decidualization of human endometrial cells could increase the hatching and attaching rate of 2-cell mouse embryos.
The study was carried out to find out the changes of the sex hormone levels in the milk of Holstein cows during the reproductive stages such as the estrous cycle, pregnancy and periparturient period. The FSH, LH, estradiol-17$\beta$ and progesterone from the milk samples were assayed by radioimmunoassay methods. The results of this study were summarized as follows: 1. The levels of progesterone and estradiol-17$\beta$ were similar among inter-quarters, but they were higher in after milking than before milking times, with no statistical significance. 2. The milk progesterone levels during the estrous cycles reached a peak mean level of 3.55$\pm$0.26ng/$m\ell$ at 15 days after estrus and they did not show any differences among the length of estrous cycles. The estradiol-17$\beta$ levels during the estrous cycles showed a peak level of 36.40$\pm$2.38pg/$m\ell$ at estrus, and decreased(17.20$\pm$0.46 pg/$m\ell$ to 18.65$\pm$1.26pg/$m\ell$) at luteal phase. 3. The FSH levels during the estrous cycles ranged from 2.25$\pm$0.23mIU/$m\ell$ to 4.35$\pm$0.24mIU/$m\ell$ showing significant changes. The LH levels during the estrous cycles gradually increased and remained a peak level of 10.90$\pm$0.36mIU/$m\ell$ from 20 to 25 days after estrus. 4. The progesterone levels during the pregnancy were decreased from 30 to 60 days after artificial insemination, and therafter continuously increased until 240 days. The estradiol-17$\beta$ levels during the pregnancy were 24.56$\pm$1.19pg/$m\ell$ at day 30 after artificial inseminaton, and increased rapidly until 180 days. The levles were agagin decreased by 26.17$\pm$3.03pg/$m\ell$ until 210 days and markedly increased by 68.00$\pm$8.70pg/$m\ell$ until 240 days. 5. The prolactin levels during the pregnancy were 31.27$\pm$2.31ng/$m\ell$ and 42.60$\pm$2.37ng/$m\ell$ at day 150 and 240 after artificial insemination respectively. The LH levels during the pregnancy reached a peak of 27.47$\pm$7.90mIU/$m\ell$ at day 30 after artificial insemination, and thereafter gradually decreased. 6. The progesterone levels during the periparturient period reached a peak of 4.61$\pm$0.34ng/$m\ell$ at day 3 prepartum, and thereafter gradually decreased, and showed 2.05$\pm$0.60ng/$m\ell$ at day 7 postpartum. The estradiol-17$\beta$ levels during the periparturient period showed high level from 207.23$\pm$6.04pg/$m\ell$ at day 1 prepartum to 239.90$\pm$13.90pg/$m\ell$ at day 2 prepartum, and thereafter began to decline and reached 51.87$\pm$1.72pg/$m\ell$ at by 7 postpartum. 7. The prolactin levels during the periparturient period showed relatively higher level at the time of parturition. The LH levels during the periparturient period rnage from 6.32$\pm$0.32mIU/$m\ell$ to 13.90$\pm$1.37mIU/$m\ell$ showing significant changes. 8. The progesterone levels(4.6$\pm$0.8ng/$m\ell$) of the pregnant cows were significantly higher than those (1.84$\pm$1.4ng/$m\ell$) of nonpregnant cows. The cows of artificial insemination from 61 to 90 days after parturition showed higher progesterone levels. 9. During 20 to 25 days after artificial insemination, the accuracy of pregnancy diagnosis from milk progesterone levels were 94.4% for nonpregnant cows(<2.3ng/$m\ell$), and 75.0% for pregnant cows( 3.2ng/$m\ell$). The average overall accuracy of pregnancy prediction for nonpregnant and pregnant cows 83.3% 10. The results obtained this study suggest that the understanding of the endocrinological mechanisms by means of milk hormone analysis during the estrous cycle, pregnancy and parturition would give the basic information needed for increasing efficiency of reproduction. This study would not only provide an accurate method of the early pregnancy diagnosis by milk progesterone levels but also contribute to the research of providing the method of detecting of FSH levels in milk, which was difficult in blood serum.
본 연구는 한우 난포발달에 있어서 난포액 및 inhibin의 생리적 역할을 검토하기 위해 수행하였다. Anti-inhibin serum(AIS) 생산을 위해 사용된 항원은 porcine inhibin-$\alpha$-subunit 19~32의 peptide를 사용하여 adjuvant 용액을 1:3의 비율로 혼합하여 앙고라종 토끼 5두(체중 2.5kg)에게 주 2회 간격으로 8회 실시후 ELISA Leader로 항혈청의 역가를 확인하였다. 난포액(bFF; bovine follicular fluid)은 도축장에서 도축되는 한우 난소로부터 직경 1.0cm 이하의 난포로부터 회수하여 스테로이드를 제거하기 위해 10% chacoal solution(50 mg/$m\ell$, Norrit-A, Fisher Sci., USA)을 처리하여 45분간 배양후 원심분리후 상층액을 회수하여 실험에 공시하였다. 과립막세포의 체외배양을 위해 D-MEM용액(10% FCS와 antibiotics를 첨가)을 배양액으로 하여 1 $\times$$10^{6}$ cells/$m\ell$로 조절하였다. 호르몬은 RIA 및 ELISA법으로 분석하였다. 그 결과 항원-항체반응은 항원처리후 24일째부터 항체가를 확인할 수 있었으며 52일째에서 높은 항원-항체반응을 보였다. 한편, 난포크기별 난포액의 progesterone 및 Estradiol-l7$\beta$을 농도를 분석한 결과, Progesterone 난포크기가 직경 1.0 cm부터 유의적으로 증가하기 시작하여 직경 2.0cm의 난포액에서는 높은 progesterone이 존재하고 있는 것으로 나타났다. 이에 반해, 난포크기별 난포액중 estradiol 17$\beta$농도는 직경 1.0cm구에서 가장 높게 나타났다. 난포직경이 1cm일 경우에 난포액내 etradiol-17$\beta$가 가장 많이 존재하고 있음이 나타났다. 과립막세포의 체외배양에서 배양 24시간에서는 과립막세포의 progesterone분비는 약 40ng/1$\times$$10^{6}$ cell/well/$m\ell$ 전후로 나타났으며 bFF 5%, AI 5% 및 bFF+AI 첨가구에 따라 유의적인 차이는 없었다 반면에 48시간배양구에서는 24시간에 비해 유의적으로 높게 분비되었으며, bFF 5%처리구와 bFF5%+AI5%처리구에서는 progesterone을 대조구보다 유의적으로 억제되었으나 AI 5%단독처리구에서는 대조구와 큰 차이가 없었다. 한편, 각 세포질을 SDS-PAGE로 분리하여 nitro cellulose membrane에 transfer하여 Western blotting법에 의해 검토한 결과, 직경 1.0 cm의 성숙난포의 granulosa cell에 특이하게 Inhibin이 존재하고 있음이 확인되었다. 이상의 결과로, 한우에 있어서 성숙난포에 존재하는 Inhibin은 난포발달 및 난포세포의 스테로이드호르몬합성에 중요하게 관여하고 있는 것으로 사료된다.
Kim, Cheol-Ho;Bhak, Jong-Sik;Shin, Jung-Sub;Kang, Chung-Bo
Korean Journal of Veterinary Service
/
v.31
no.3
/
pp.397-414
/
2008
In order to evaluate conception rate of Hanwoo in northwestern region of Gyeongsang-nam-do, we investigated conception rate and reduction of reproductive disorder rate after artificial insemination (AI) in 1,000 heads of breeding cows, This study showed that 80.9% of cows were classified as fertility after 1st and 2nd AI. For a accurate pregnancy diagnosis with practicing ovariectomy and histeotomy, we comparatively investigated each of 80 slaughtered cows, including 30 of non-pregnancy, and used enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for estimation of plasma progesterone concentration and serum luteal hormone. The mean diameter of non-pregnant corpus luteum is $18.9{\pm}4.2{\times}15.6{\pm}3.6 mm$ and that of pregnant corpus luteum is $22.5{\pm}2.7{\times}18.7{\pm}2.9 mm$. This indicates that corpus luteum is more developed in the ovary of pregnant than non-pregnant cows (P<0.05). The diameter of pregnant corpus luteum according to the stage of pregnancy showed $21.3{\pm}2.4{\pm}18.4{\pm}2.6 mm$ in early stage (1-3 month), $23.4{\pm}2.8{\times}19.1{\pm}2.7 mm$ in middle stage (4-6 month) and $22.8{\pm}3.0{\times}18.8{\pm}2.4mm$, in last stage (7-9 month). This indicates that corpus luteum in middle and last stage is more significantly developed than that of early stage(P<0.05). The mean plasma progesterone concentration of cows showing size of non-pregnant corpus luteum was $4.58{\pm}0.92ng/ml$ and that of pregnant corpus luteum $8.26{\pm}0.98ng/ml$. Thus, it was more significantly increased in pregnant corpus luteum(P<0.02).. However, it was low to $0.58{\pm}0.39ng/ml$. in estrus (corpus albicans). The plasma progesterone concentration according to gestation period was high in proportion to the degree of development in corpus luteum and more significantly increased (P<0.05) and maintained in middle and last state than early state. The concentration was sharply decreased to $0.56{\pm}0.32ng/ml$ at parturition. As a consequence, we can practice the early pregnancy diagnosis by confirming non-pregnancy when the mean plasma progesterone concentration is below 1ng/ml 19 to 22 days after AI and this can be available to diagnose reproductive disorder.
Skim milk progesterone($P_4$) profiles in 74 dairy cows were determind to monitor postpartum ovarian activity by radioimmunoassay. Milk samples were collected from each cow every 5 days from 10 to 90 days postpartum. Signs of estrus were observed twice daily, and status of the ovaries and uterus were examined every 10 days by rectal palpation. Results are summarized as follows: 1. Cows were categorized into five types by the change of skim milk $P_4$ profiles; Type I(normal) : Cyclic changes of skim milk $P_4$ profiles appeared within 20 days postpartum(12 cows, 16.2%), Type II(cycle delayed) : Cyclic changes of skim milk $P_4$ profiles appeared from 21 to 60 days postpartum(39 cows, 52.7%), Type III(cycle ceased with low $P_4$) : Onset of the estrous cycle within 20 days postpartum but ceased later with low levels of $P_4$ (7cows, 9.5%), Type IV(cycle ceased with high $P_4$) : Onset of the estrous cycle within 20 days postpartum but ceased later with high levels(>3.0 ng/ml) of skim milk $P_4$ (4 cows, 5.4%), Type V(acyclicity) : Skim milk $P_4$ concentration remained low(<1.0 ng/ml) until 80 days postpartum(12 cows, 16.2%). 2. Out of the 17 cows classified as the Type III and Type V by skim milk $P_4$ profiles, 13 cows had inactive ovaries and remaining 6 cows had single or multiple follicular cysts in their ovaries by rectal palpation. All 4 cows of Type IV had a persistent corpus luteum in their ovaries. 3. Approximately eighty percent of the cows had begun ovarian activity by 60 days postpartum and 90.6% by 90 days by skim milk $P_4$ profiles, but only 39.2% by 60 days and 71.7% by 90 days had shown visible estrus signs. The mean days from parturition to the first, second and third ovulations determined by skim milk $P_4$ profiles was $28.0{\pm}11.0$, $46.4{\pm}13.3$ and $66.4{\pm}11.5$ days and the visible estrus signs were 9.3%, 38.1%, and 48.6%, respectively. The mean days from parturition to the first visible estrus was $57.2{\pm}15.9$ days. These results indicated that milk $P_4$ profile of each Types by radioimmunoassay can be utilized for monitoring postpartum ovarian and would be useful for the early detection of ovarian dysfunction in dairy cow.
Pang, X.S.;Wang, Z.Y.;Zhu, T.G.;Yin, D.Z.;Zhang, Y.L.;Meng, L.;Wang, F.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
/
v.23
no.2
/
pp.188-196
/
2010
The objective of this study was to characterize the litter sizes in Huanghuai goats with high prolificacy (HP, five or more kids born per litter on at least one occasion), and to compare their peripheral blood concentrations of progesterone and estradiol with those of goats with poor prolificacy (PP, up to three kids born per litter on any occasion). The circulating concentrations of progesterone and estradiol were measured by radioimmunoassay from daily blood samples taken during natural estrus cycles and at 1-5 days after ovariectomy. Estrus was synchronized using two doses of a prostaglandin analog. Litter size for the HP goats increased up to a parity of five and decreased thereafter. The percentage of goats with litter sizes of $\geq$4 from parities 3 to 6 ranged from 44.5% to 58.3%. Although small differences in litter size were obtained for goats of parities three, four and six relative to five, parity five does had the highest mean litter size. Progesterone concentrations began to rise earlier and were higher in the HP than in the PP goats on most days of the luteal phase, but not during the follicular phase of the cycle or after ovariectomy. There was a significant difference between the two groups (p<0.05) in the magnitude of the progesterone plateau. Mean estradiol concentrations in the HP group remained significantly higher than in the PP group (p<0.05) during the estrus cycle. There were two estradiol peaks in the HP goats during the early luteal phase, but only one in the PP group. Measurements of individual corpora lutea (CL) in vitro showed that there was a greater prevalence of small CL (<6 mm in diameter) in the HP group than in the PP group (p<0.05). After ovariectomy, the estradiol level on day 1 was significantly higher than at the nadir during the estrus cycle in both the HP (p<0.01) and PP (p<0.05) goats, while levels decreased by 12.3% and 26.2% respectively compared with the mid-luteal period in HP and PP goats (p<0.05). The overall mean estradiol concentrations in HP goats were lower than in the PP group, but no significant differences were found between groups at 1-5 days after ovariectomy.
Steroidogenesis requires coordination of the anabolic and catabolic pathways of lipid metabolism, but the profile of proteins associated with progesterone synthesis in cyclic and pregnant corpus luteum (CL) is not well-known in cattle. In Experiment 1, plasma progesterone level was monitored in cyclic cows (n = 5) and pregnant cows (n = 6; until d-90). A significant decline in the plasma progesterone level occurred at d-19 of cyclic cows. Progesterone level in abbatoir-derived luteal tissues was also determined at d 1 to 5, 6 to 13 and 14 to 20 of cyclic cows, and d-60 and -90 of pregnant cows (n = 5 each). Progesterone level in d-60 CL was not different from those in d 6 to 13 CL and d-90 CL, although the difference between d 6 to 13 and d-90 was significant. In Experiment 2, protein expression pattern in CL at d-90 (n = 4) was compared with that in CL of cyclic cows at d 6 to 13 (n = 5). Significant changes in the level of protein expression were detected in 32 protein spots by two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (2-DE), and 23 of them were identified by matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS). Six proteins were found only in pregnant CL, while the other 17 proteins were found only in cyclic CL. Among the above 6 proteins, vimentin which is involved in the regulation of post-implantation development was included. Thus, the protein expression pattern in CL was disorientated from cyclic luteal phase to mid pregnancy, and alterations in specific CL protein expression may contribute to the maintenance of pregnancy in Korean native cows.
Ion effects on $11{\alpha}-hydroxylation$ of progesterone and $5{\alpha}-reduction\;of\;11{\alpha}-hydroxyprogesterone$ by Rhizopus nigricans were investigated. Metal ions such as $Cu^{2+},\;Cd^{2+},\;Co^{2+},\;Mn^{2+},\;Zn^{2+},\;Fe^{2+},\;Mg^{2+},\;Fe^{3+}\;and\;Na^+$ reduced the $11{\alpha}-hydroxylation$ activity, while $K^+$ stimulated the same reaction. Enzyme activity for the $5{\alpha}-reduction$ of $11{\alpha}-hydroxyprogesterone$ was increased in the presence of $Fe^{2+},\;Mn^{2+},\;Mg^{2+},\;Co^{2+},\;Zn^{2+},\;Fe^{3+},\;K^+\;and\;Na^+$, whereas it was decreased in the presence of $Cd^{2+}\;and\;Cu^{2+}$. Potassium ion of $10^{-3}\;M\;$ of concentration was found to be effective for the promotion of $11{\alpha}-hydroxylation$. On the other hand, cadmium ion of $10^{-4}\;M$ was proved to suppress the $5{\alpha}-reduction$ reaction. Progesterone is reported to be transformed into $11{\alpha}-hydroxyprogesterone$ which, in turn, is converted further into $11{\alpha}-hydroxy-allopregnane-3$, 20-dione by R. nigricans. From this point of view, the highest yield of $11{\alpha}-hydroxyprogesterone$ could be obtained when potassium ion of $10^{-3}\;M$ was given initially followed by addition of cadmium ion of $10^{-4}\;M$ to limit conversion of 11{\alpha}-hydroxyprogesterone into $11{\alpha}-hydroxy-allopregnane-\;3$, 20-dione.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.