대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.1
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pp.219.1-219.1
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2003
RNA polymerase II (pol II) is known to cycle between hyperphosphorylated and hypophosphorylated forms during transcription cycle. These extensive phosphorylation/dephosphorylation event occurs in the C-terminal domain (CTD) of the largest subunit of pol II which consists of a tandemly repeated heptapeptide motif with consensus of YSPTSPS. (omitted)
Epstein-Barr virus (EBV), cytomegalovirus (CMV), hepatitis B virus (HBV), parvovirus B19 (B19)등 4종의 바이러스는 인체에 감염을 일으키는 병원체로서 DNA를 유전물질로 함유한다. 각 바이러스 유전자의 염기서열을 분석하여 EBV CMV, HBV의 pol 유전자와 B19의 ns 유전자에 특이적으로 결합할 수 있는 primer를 설계 제작하고 단일 시험으로 4종의 바이러스를 동시에 검출할 수 있는 다중 중합효소 연쇄반응(Multiplex PCR)법을 확립하였다. Primer 염기서열, PCR 반응조성물의 농도, PCR 반응시간 및 온도조건을 최적화하여 민감도를 증대시킴으로써, 단일 시험으로 5-10 분자수의 유전물질까지 검출이 가능하였다. 또한 4종의 바이러스 사이에 교차반응이 일어나지 않았으며 생체시료를 이용한 시험에서도 특이성과 민감도가 유지됨을 확인하였다. 그러므로 본 연구에서 확립한 다중 중합효소 연쇄반응은 세포배양액 또는 생체 시료에 감염된 4종 DNA 바이러스진단에 효율적으로 이용할 수 있을 것이라고 판단된다.
The present study was aimed at determining the effects of alkylating and oxidative stress inducing agents on a newly identified variant of DNA polymerase beta ($pol{\beta}{\Delta}_{208-304}$) specific for ovarian cancer. $Pol{\beta}{\Delta}_{208-304}$ has a deletion of exons 11-13 which lie in the catalytic part of enzyme. We compared the effect of these chemicals on HeLa cells and HeLa cells stably transfected with this variant cloned into in pcDNAI/neo vector by MTT, colony forming and apoptosis assays. $Pol{\beta}{\Delta}_{208-304}$ cells exhibited greater sensitivity to an alkylating agent and less sensitivity towards $H_2O_2$ and UV when compared with HeLa cells alone. It has been shown that cell death in $Pol{\beta}{\Delta}_{208-304}$ transfected HeLa cells is mediated by the caspase 9 cascade. Exon 11 has nucleotidyl selection activity, while exons 12 and 13 have dNTP selection activity. Hence deletion of this part may affect polymerizing activity although single strand binding and double strand binding activity may remain same. The lack of this part may adversely affect catalytic activity of DNA polymerase beta so that the variant may act as a dominant negative mutant. This would represent clinical significance if translated into a clinical setting because resistance to radiation or chemotherapy during the relapse of the disease could be potentially overcome by this approach.
Oxidized abasic residues arise as a major class of DNA damage by a variety of agents involving free radical attack and oxidation of deoxyribose sugar components. 2-deoxyribonolactone (dL) is a C1'-oxidized abasic lesion implicated in DNA strand scission, mutagenesis, and covalent DNA-protein cross-link (DPC). We show here that mammalian cell-free extract give rise to stable DPC formation that is specifically mediated by dL residue. When a duplex DNA containing dL at the site-specific position was incubated with cell-free extracts of Po ${\beta}-proficient$ and -deficient mouse embryonic fibroblast cells, the formation of major dL-mediated DPC was dependent on the presence of DNA polymerase (Pol) ${\beta}$. Formation of dL-specific DPC was also observed with histones and FEN1 nuclease, although the reactivity in forming dL-mediated DPC was significantly higher with Pol ${\beta}$ than with histones or FEN1. DNA repair assay with a defined DPC revealed that the dL lesion once cross-linked with Pol ${\beta}$ was resistant to nucleotide excision repair activity of cell-free extract. Analysis of nucleotide excision repair utilizing a model DNA substrate containing a (6-4) photoproduct suggested that excision process for DPC was inhibited because of DNA single-strand incision at 5' of the lesion. Consequently DPC mediated by dL lesion may not be readily repaired by DNA excision repair pathway but instead function as unusual DNA damage causing a prolonged DNA strand break and trapping of the major base excision repair enzyme.
The power supply systems, which require low-voltage / high-current output has been changing from the conventional centralized power system to a distributed power system. The distributed power system consists of a bus converter and POL. The most important factor is the system stability in bus architecture design. The overlap between the output impedance of a bus converter input impedance of POL causes system instability and has been an actual problem. By increasing the bus capacitor, the system stability can be easily improved. However, due to limited space on the system board, the increasing of bus capacitors is impractical. An urgent solution of this issue is strongly desired. This paper presents the output impedance design for on-board distributed power system by means of three control schemes of a bus converter. The output impedance peak of the bus converter and the input impedance of the POL are analyzed and then conformed experimentally for stability criterion. Furthermore, the design process of each control schemes for system stability is proposed.
The effects of DNA polymerase $\beta$ on the somatic chromosome mutations and mitotic recombinations were investigated using the transgenic Drosophila beating chimetic gene consisting of a promoter region of Drosophila actin 5C gene and rat DNA polymerase $\beta$. For detecting the somatic chromosome mutations and mitotic recombinations, the heterozygous (mwh/+) strains possessing or lacking transgene poi 13 were used. The spontaneous frequency of small mwh spots, due to deletion or nondisjunction etc., in the non-transgenic w strain and the transgenic p[pol $\beta$]-130 strain was 0.351 and 0.606, respectively. The spontaneous frequency (0.063) of large mwh spots, arises mostly from somatic recombination between the centromere and the locus mwh, in the transgenic p[pol $\beta$]-130 strain was about three times higher than that (0.021) of the non-transgenic w strain. The mutant clone frequencies of small and large mwh spots induced by N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine and ethyl methanesulfonate in the transformant p[pol $\beta$]-130 were higher than those in the host strain w. The present results suggest that rat DNA polymerase $\beta$ participate at least in the somatic chromosome mutations and mitotic recombination processes.
Background: Ovarian cancer is the number one killer among all the gynecological cancers. We undertook association study to identify potential alterations in the genomic DNA of a DNA repair gene, DNA polymerase beta ($pol{\beta}$), involved in base excision repair (BER), in ovarian carcinomas of patients from Haldia, India. Mutations, splice variants have been reported earlier in different tumors other than ovarian tumors. Aim: In this study we explored the possibility of association of any mutation of $pol{\beta}$ (Exon 8) with prognosis in 152 ovarian cancer samples. Results: Alteration in the exon 8 region (Exon 8:468, $A{\rightarrow}C$; 15.1%) was noted among fifty seven polymorphism positive samples. Alteration in the intervening sequence 8 (IVS8, -25, $A{\rightarrow}C$; 3.9%) was also noted. All alterations are heterozygous in nature. Conclusions: We found no significant association among the samples from serous type, stage IV, and the $pol{\beta}$ mutations ($P{\leq}0.01$). Only a slight tendency of association was evident between IVS8, -25, A to C; and stage III. Further analysis with a larger number of samples is needed.
The remote sensing technique using SAR data have many advantages when applied to the disaster site due to its wide coverage and all-weather acquisition availability. Although a single-pol (polarimetric) SAR image cannot represent the land surface better than a quad-pol SAR image can, single-pol SAR data are worth using for disaster-induced change detection. In this paper, an automatic change detection method based on a mixture of GGDs (generalized Gaussian distribution) is proposed, and usability of the textural features and intensity is evaluated by using the proposed method. Three ALOS/PALSAR images were used in the experiments, and the study site was Norita City, which was affected by the 2011 Tohoku earthquake. The experiment results showed that the proposed automatic change detection method is practical for disaster sites where the large areas change. The intensity information is useful for detecting disaster-induced changes with a 68.3% g-mean, but the texture information is not. The autocorrelation and correlation show the interesting implication that they tend not to extract agricultural areas in the change detection map. Therefore, the final tsunami-induced change map is produced by the combination of three maps: one is derived from the intensity information and used as an initial map, and the others are derived from the textural information and used as auxiliary data.
Applied by periodic Stimulating Currents in Bonhoeffer-Van der Pol(BVP) model, chaotic and periodic phenomena occured at specific conditions. The conditions of the chaotic motion in BVP comprised 0.7182< $A_{1}$ <0.792 and 1.09< $A_{1}$ <1.302 proved by the analysis of phase plane, bifurcation diagram, and lyapunov exponent. To control the chaotic motion, two methods were suggested by the first used the amplitude parameter $A_{1}$,$A_{1}={\varepsilon}((x-x_{s})-(y-y_{s}))$ and the second used the temperature parameter c, c=c$(1+ {\eta}cos{\Omega}t)$ which the values of $\eta$, ${\Omega}$ varied respectlvly, and $x_{s}$, $y_{s}$ are the periodic signal. As a result of simulating these methods, the chaotic phenomena was controlled with the periodic motion of periodisity. The feasibilities of the chaotic and the periodic phenomena were analysed by phase plane and lyapunov exponent.
The purpose of this study was to measure the roughness on the acid -etching surface. The etching agents of three-kinds composite resins were used to etch the tooth surface. Newly extracted I5-anterior teeth were invested with self-curing acrylic resin, and the labial surface was exposed. The exposed labial side was polished with abrasive papers and finally polished on polishing machine with zinc oxide powder. After the teeth were polished, the specimens were washed by water and dried by air. Surface roughness tester, Taylor-Habson's Taly Surf-10, (Fig-1) was used to measure roughness of this unetched tooth surface. And that, the specimens were divided into three groups. The first group was etched with Restodent etchant, the second group was etched with Nuva-system etchant, and Hi-pol etching agent was used in the third group. And the surface roughness tester was used to measure roughness of the etching teeth surface. The results obtained were as follows. 1. The roughness of acid-etched enamel were increased $2{\mu}m$ to $6{\mu}m$. 2. Hi-pol etchant produced the smoothest surface($2.3{\mu}m$). 3. Restodent etchant($3.8{\mu}m$) and Nuva-system etchant($3.7{\mu}m$) produced rougher surface than Hi-pol.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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