Dangguisu-san (DGSS) is widely known traditional herbal medicinal formula in Korea for treatment of traumatic injury by traffic accident, ecchymosis, abdominal distension and anti-thrombosis of blood. This study was conducted to develop the simultaneous analyze method using high performance liquid chromatography (HPLC) and examine the effect of anti-inflammatory activity of DGSS-dry extract (DGSS-DE) and DGSS-mix extract powder (DGSS-MEP). Physicochemical characteristics of DGSS-DE and DGSS-MEP showed that there is no significant difference in pH, titratable acidity, total soluble solid content and browning degree except for color value (L, a, b). 15 functional constituents of DGSS were identified and the correlation coefficient values of DGSS-DE and DGSS-MEP were conformed 0.950. Also, DGSS-DE and DGSS-MEP significantly decreased the secretion of nitric oxide (NO), prostaglandin E2 (PGE2), interleukin-1β (IL-1β), interleukin-6 (IL-6) and tumor necrosis factor-α (TNF-α) through inhibited expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase-2 (COX-2), IL-1β, IL-6, and TNF-α. From these result, DGSS-MEP showed similar chemical composition and anti-inflammatory effect to DGSS-DE. Therefore, DGSS-DE and DGSS-MEP may be useful as potential source of drug to prevent inflammation.
A-yeong Jang;Weerawan Rod-in;Il-shik Shin;Woo Jung Park
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제34권2호
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pp.476-483
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2024
Fractionated lipids of Halocynthia aurantium (Pyuridae) have been demonstrated to possess anti-inflammatory properties. However, their modulatory properties have not been reported yet. Thus, the objective of this study was to determine immune enhancing effects of fractionated lipids from H. aurantium tunic on macrophage cells. The tunic of H. aurantium was used to isolate total lipids, which were then subsequently separated into neutral lipids, glycolipids, and phospholipids. RAW264.7 cells were stimulated with different concentrations (0.5, 1.0, 2.0, and 4.0%) of each fractionated lipid. Cytotoxicity, production of NO, expression levels of immune-associated genes, and signaling pathways were then determined. Neutral lipids and glycolipids significantly stimulated NO and PGE2 production and expression levels of IL-1β, IL-6, TNF-α, and COX-2 in a dose-dependent manner, while phospholipids ineffectively induced NO production and mRNA expression. Furthermore, it was found that both neutral lipids and glycolipids increased NF-κB p-65, p38, ERK1/2, and JNK phosphorylation, suggesting that these lipids might enhance immunity by activating NF-κB and MAPK signaling pathways. In addition, H. aurantium lipids-induced TNF-α expression was decreased by blocking MAPK or NF-κB signaling pathways. Phagocytic activity of RAW 264.7 cells was also significantly enhanced by neutral lipids and glycolipids. These results suggest that neutral lipids and glycolipids from H. aurantium tunic have potential as immune-enhancing materials.
In infectious disease, invasion of host tissue by bacteria or their products frequently induces a wide variety of inflammatory and immunopathologic reaction. Evidence indicates that cytokines are involved in the initiation and progression of chronic inflammatory diseases, such as periodontitis. Interleukin-6, which is a multifunctional cytokine, has important roles in acute and chronic inflammation and may also be implicated in bone resorption. Periodontal diseases are characterized by chronic inflammation of the periodontium with alveolar bone resoption. A principal driving force behind this response appears to lie in the immune system's response to bacteria. Many of the cell components which have been shown to function as virulence factors in gram-negative bacteria are associated with the bacterial surface. Of these, lipopolysaccharide has been characterized as one that mediates a number of biological activities which can lead to the destruction of host tissue. Non-steroidal antiinflammatory drug is used for reduce inflammation, and most of NSAIDs inhibit prostaglandine $E_2$ production, but it is shown that $PGE_2$ production is stimulated by IL-1 in recent study. So, the influence of other cytokines except $PGE_2$ on periodontium can not be avoided. Therefore, new antiinflammatory drug is needed. Rhizoma coptidis is used in oriental medicine for anti-inflammation and antiseptics. In this present study, we examined the IL-6 release in periodontal ligament cells treated with the lipopolysaccharide, and also the effect of rhizoma coptidis on cellular activity and IL-6 production of periodontal ligament cells. To evaluate the effect of rhizoma coptidis on cellular activity, the cells were seeded at a cell density of $1{\times}10^4$ cells/well in 24-well culture plates. After one day incubation, 1-6, 10-9 and 10-12 g/ml of rhizoma coptidis and 5, $10{\mu}g/ml$ of LPS were added to the each well and incubated for 1 and 2 days, respectively. Then, MTT assay were carried out. To evaluate the effect of rhizoma coptidis on IL-6 production, the cells were seeded at a cell density of $1.5{\times}10^4$ cells/well in 24-well culture plates. After one day incubation, 10-9 g/ml of rhizoma coptidis and 5, $10{\mu}g/ml$ of LPS were added to the each well and incubated for 3, 6, 12 and 24 hours. Then, amounts of IL-6 production is measured by IL-6 ELISA kit used. The results were as follows : 1. Rhizoma coptidisrbelow to ($10^{-6}g/ml$) significantly increaed cellular activity of periodontal ligament cells than control. 2. Rhizoma coptidist ($10^{-9}g/ml$) significantly increased cellular activity of LPS($5{\mu}g/ml$)-treated periodontal ligament cells than control. 3. LPS(5 and $10{\mu}g/ml$) significantly increased IL-6 production of periodontal ligament cells than control. 4. Rhizoma coptidis($10^{-9}g/ml$) decreased IL-6 production of LPS ($5{\mu}g/ml$)-treated periodontal.ligarnent cells than LPS only tested group. These findings suggest that stimulation of the IL-6 release of periodontal ligament cells by LPS may have a role in the progression of inflammation and alveolar bone resoption in periodontal disease, and that inhibition of the IL-6 release of cells and stimulation of cellular activity by rhizoma coptidis may help the periodontal regeneration.
목 적 : 엡슈타인 기형의 예후는 판막변화의 심한 정도에 따라서 주로 결정되며 신생아기에 증상을 보이는 경우에는 높은 사망률을 보인다. 엡슈타인 기형에 폐동맥 폐쇄가 동반되기도 하지만 신생아기에는 높은 폐혈관 저항으로 인하여 기능적 폐동맥 폐쇄 상태가 생기기도 한다. 신생아기에 증상을 나타낸 엡슈타인 기형의 임상적인 특징과 치료 후 경과를 폐동맥 폐쇄 동반 유무를 중심으로 살펴보고자 하였다. 방 법 : 1998년부터 2004년까지 서울아산병원 소아과에서 진단된 신생아기에 증상을 보인 엡슈타인 기형 환자 15명을 대상으로 하여 심초음파 기록과 녹화된 비디오 테이프를 검토하였고 의무기록을 후향적으로 조사하였다. 심초음파상 폐동맥 폐쇄를 가진 군과 폐동맥 폐쇄가 없는 군으로 나누어 각각의 임상 양상, 검사 소견, 치료 및 경과를 비교하였다. 결 과 : 1) 대상 환자 15명 중 10명(67%)이 폐동맥 폐쇄를 보여서 신생아기에 증상을 보인 엡슈타인 기형은 폐동맥 폐쇄를 동반하는 경우가 많았으며 이중 6명은 기능적 폐쇄로 판명되었다. 2) 폐동맥 폐쇄를 가진 군과 폐동맥 폐쇄가 없었던 군 사이에 재태연령이나 출생 시 체중은 차이가 없었으나 폐동맥 폐쇄군에서 산소 포화도와 pH가 유의하게 낮았고(P<0.05) 흉부 방사선 소견상 심흉곽 비도 유의하게 커져 있었다(P<0.05). 기능적 폐쇄군과 해부학적 폐쇄군 사이에는 pH와 심흉곽 비는 차이가 없었으나 산소 포화도는 기능적 폐쇄군이 더 낮았다(P<0.05). 3) Capentier 분류로 나누어 본 삼첨판 형태의 특징과 심초음파상에서 우심방과 심방화된 우심실의 면적으로 본 기형의 심한 정도는 각각의 수가 적어서 폐동맥 폐쇄 유무에 따른 특징은 찾아볼 수 없었다. 4) 폐동맥 폐쇄가 없었던 5명 중 2명은 특별한 치료 없이 증상이 호전되어 퇴원하였으며 이를 제외한 13명(87%)이 $PGE_1$을 투여 받았고 기능적 폐쇄군 6명 중에서 4명은 NO 흡입치료를 받았다. 5) 대상 환자 중에서 3명(20%)이 사망하였으며 폐동맥 폐쇄가 없었던 환자 중에는 사망한 예는 없었다. 신생아기나 영아기에 수술을 필요로 한 환자는 폐동맥 폐쇄가 없었던 군에서는 5명 중 1명, 폐동맥 폐쇄군에서는 10명 중 8명으로 폐동맥 폐쇄군이 수술이 일찍 필요한 경우가 많았다(P<0.05). 6) 추적관찰이 가능했던 11명은 심흉곽 비가 평균 59%(49-69%)로 감소한 상태이며 기능적 폐쇄군 2명과 해부학적 폐쇄군 중 1명이 폰탄수술을 기다리는 중이고 나머지 8명은 모두 경도의 삼첨판 역류만 보이고 있다. 결 론 : 신생아기에 증상을 나타내는 엡슈타인 기형은 기능적 또는 해부학적 폐동맥 폐쇄를 동반하는 경우가 많으며 이들에서 더 심한 임상양상을 볼 수 있었고 신생아기나 영아기에 일찍 수술이 필요한 경우가 많았다. 폐동맥으로 전방향 혈류가 보이지 않는 엡슈타인 기형을 가진 신생아에서 기능적 폐쇄와 해부학적 폐쇄를 효과적으로 어떻게 빠르게 감별할 것인지, 기능적 폐동맥 폐쇄를 가진 신생아에게 가장 적절한 치료가 무엇인지는 앞으로 더 많은 경험과 연구가 필요하다.
Objectives : This study was designed to investigate the anti-osteoarthritic effects of clematidis radix pharmacopuncture on the MIA-induced osteoarthritis rats. Methods : The subjects were divided into 4 groups ; Normal rat group(N, n=5), MIA-induced osteoarthritis control rat group(C, n=5), MIA-induced osteoarthritis rat group injected with normal saline at ST36(NS, n=5), and MIA-induced osteoarthritis rat group injected with clematidis radix pharmacopuncture at ST36(CR, n=5). The experiment was conducted over a period of 21 days after injecting MIA. We analyzed body weight, hind paw weight distribution, liver and renal function, immunocytes, cykokines, inflammatory mediators, inflammatory proteins and mRNA expressions, as well as histopathological changes. Results : The CR group showed a significant increase in the hind paw weight distribution, and significant decreases in IL-$1{\beta}$, IL-6, $PGE_2$, $LTB_4$, osteocalcin, deoxypyridinoline level, the protein expression of COX2, arachidonate 5 lipoxygenase, and the mRNA expression of COX2, TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, and NOS-II. In terms of the joint damages induced by osteoarthritis, the CR group showed a greater protective effect than group C in histopathologic observation (H&E, Safranin-O staining). Conclusion : These results demonstrated that clematidis radix pharmacopuncture had anti-inflammatory and analgesic effects. In addition, these results showed that it inhibited the progression of osteoarthritis.
The expression of cyclooxygenase-2 (COX-2) is a characteristic response to inflammation and can be inhibited with sodium salicylate. $TNF-{\alpha}$ plus $IFN-{\gamma}$ can induce extracellular signal-regulated kinase (ERK), IKK, $I{\kappa}B$ degradation and NF-${\kappa}B$ activation. The inhibition of the ERK pathway with selective inhibitor, PD098059, blocked cytokine-induced COX-2 expression and $PGE_2$ release. Salicylate treatment inhibited COX-2 expression induced by $TNF-{\alpha}$/$IFN-{\gamma}$ and regulated the activation of ERK, IKK and $I{\kappa}B$ degradation and subsequent NF-${\kappa}B$ activation in MC3T3E1 osteoblasts. Furthermore, antioxidants such as catalase, N-acetyl-cysteine or reduced glutathione attenuated COX-2 expression in combined cytokines-treated cells, and also inhibited the activation of ERK, IKK and NF-${\kappa}B$ in MC3T3E1 osteoblasts. In addition, $TNF-{\alpha}$/$IFN-{\gamma}$ stimulated ROS release in the osteoblasts. However, salicylate had no obvious effect on ROS release in DCFDA assay. The results showed that salicylate inhibited the activation of ERK and IKK, $I{\kappa}B$ degradation and NF-${\kappa}B$ activation independent of ROS release and suggested that salicylate exerts its anti-inflammatory action in part through inhibition of ERK, IKK, $I{\kappa}B$, $NF-{\kappa}B$ and resultant COX-2 expression pathway.
Kim, Seulah;Shin, Seulmee;Hyun, Bobae;Kong, Hyunseok;Han, Shinha;Lee, Aeri;Lee, Seungjeong;Kim, Kyungjae
IMMUNE NETWORK
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제12권5호
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pp.181-188
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2012
Dioscoreae Rhizome (DR) has been used in traditional medicine to treat numerous diseases and is reported to have anti-diabetes and anti-tumor activities. To identify a bioactive traditional medicine with anti-inflammatory activity of a water extract of DR (EDR), we determined the mRNA and protein levels of proinflammatory cytokines in macrophages through RT-PCR and western blot analysis and performed a FACS analysis for measuring surface molecules. EDR dose-dependently decreased the production of NO and pro-inflammatory cytokines such as IL-$1{\beta}$, IL-6, TNF-${\alpha}$, and $PGE_2$, as well as mRNA levels of iNOS, COX-2, and pro-inflammatory cytokines, as determined by western blot and RT-PCR analysis, respectively. The expression of co-stimulatory molecules such as B7-1 and B7-2 was also reduced by EDR. Furthermore, activation of the nuclear transcription factor, NF-${\kappa}B$, but not that of IL-4 and IL-10, in macrophages was inhibited by EDR. These results show that EDR decreased pro-inflammatory cytokines via inhibition of NF-${\kappa}B$-dependent inflammatory protein level, suggesting that EDR could be a useful immunomodulatory agent for treating immunological diseases.
Objectives : The purpose of this study was to investigate the effect of Bee Venom on the lipopolysaccharide-induced expression phospholipase $A_2$, cyclooxygenase-2 and inducible nitrogen oxide synthase, and the generation of arachidonic acid, prostaglandin D2 and E2 in RAW 264.7 cells, a murine macrophage cell line. Methods : The expression of phospholipase $A_2$, cyclooxygenase and inducible nitrogen oxide synthase was determined by western blotting with corresponding antibodies, and the generation of arachidonic acid, prostaglandin $D_2$ and $E_2$ was assayed by ELISA method in RAW 264.7 cells. The non-toxic concentrations (0.1 to $5\;{\mu}g/ml$) of bee venom determined by MTT assay, were used in this study. Results : 1. Bee venom inhibited lipopolysaccharide-induced expression of phospholipase $A_2$ in a dose dependent manner after 48 hours treatment. 2. Bee venom inhibited lipopolysaccharide-induced expression of cyclooxygenase-2 in a dose dependent manner after 24 and 48 hours treatment. 3. Bee venom inhibited lipopolysaccharide-induced expression of inducible nitrogen oxidesynthase in a dose dependent manner after 48 hours treatment. 4. The generation of arachidonic acid, prostaglandin $D_2$ and $E_2$ was not much affected by the treatment of bee venom on the lipopolysaccharide-induced generation of arachidonic acid, prostaglandin $D_2$ and $E_2$ in RAW 264.7 cells.
Jo, Mi-Jeong;Chu, Yan-Hui;Back, Young-Doo;Lee, Byung-Wook;Shin, Soon-Shik;Kwon, Young-Kyu;Kim, Sang-Chan
동의생리병리학회지
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제22권4호
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pp.907-913
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2008
Taraxci Herba (TH; Pogongyoung in Korean) has been used in traditional oriental medicine for the treatment of various ailments. The biological activity of this plant is not yet evaluated systematically. This study was conducted to evaluate the inhibitory effects of TH on the production of nitric oxide (NO) and the expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) in lipopolysaccharide (LPS)-activated Raw264.7 cells. The aim of the present work is to investigate a potential anti-inflammatory activity of TH. The Raw264.7 cells were cultured in DMEM medium for 24 h. After serum starvation for 12 h, the cells were treated with TH for 1 h, followed by stimulating NO production with LPS ($2{\mu}g/ml$). As result of this study, TH inhibited the levels of NO, PGE2, $TNF-{\alpha}$, IL-6 and $IL-1{\beta}$, and the expressions of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) activated by LPS. These inhibitory effects were mediated though the inhibition of phosphorylation of inhibitory kappa B ($I{\kappa}B$). These findings showed that TH could have some anti-inflammatory effects.
A marine alga, Spirulina maxima, was extracted under high pressure and low temperature conditions at 500 MPa and $60^{\circ}C$ for 5 and 10 min. A high pressure of 500 MPa was applied to improve process yields because of low temperature extraction. This method resulted in highest higher extraction yield of 26.1% (w/w) in comparison to those results obtained from conventional extraction methods which produced a yield of 17.6% (w/w) from water. The extracts from this process also showed 19% of low cytotoxicity against human normal fibroblast cells in adding 1.0 mg/ml of the highest concentration. The crude extract significantly reduced the production of Prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$) from CCD-986sk cells and increased nitric oxide production by macrophages. These higher activities of enhancing skin immune functions were found to have high antioxidant extract properties, like a 98% increase in DPPH radical scavenging activity. The extracts from the high pressure process showed a higher elution of active components than other processes and generated new compounds based on HPLC analysis. This clearly indicates that the extracts from high pressure and low temperature conditions have higher skin immune activation properties that have not been previously reported.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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