Amyloid $\beta$-peptide (A$\beta$), which is a product of the proteolytic effect of $\beta$-secretase (BACE) on an amyloid precursor protein, is closely associated with Alzheimer's disease (AD) pathogenesis. There is sufficient evidence to suggest that a BACE inhibitor may reduce A$\beta$ levels, thus decreasing the risk of AD. In a previous study, an extract of Clavicorona pyxidata DGUM 29005 mycelia was found to inhibit the production of a soluble $\beta$-amyloid precursor protein (s$\beta$APP), A$\beta$, and BACE in neuronal cell lines. We sought to determine whether this mycelial extract exerts the same effect in human rhabdomyosarcoma A-204 and rat pheochromocytoma PC-12 cells. We found that the production of A$\beta$ decreased in a dose-dependent manner in the presence of the mycelial extract and that the concentration of A$\beta$ never exceeded $50{\mu}g/ml$. The presence of sAPP was detected in every culture medium to which the mycelial extract had been added and its concentration remained the same, regardless of the concentration of the extract used. Endogenous $\beta$-secretase activity in A-204 and PC-12 cellular homogenates also decreased in the presence of this extract. These cells, in culture, were not susceptible to the cytotoxic activity of the mycelial extract.
Nho, Jin Ah;Shin, Yong Sub;Jeong, Ha-Ram;Cho, Suengmok;Heo, Ho Jin;Kim, Gun Hee;Kim, Dae-Ok
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.30
no.3
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pp.359-367
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2020
Neurodegenerative disorders in the elderly are characterized by gradual loss of memory and cognitive function. Oxidative stress caused by reactive oxygen species is associated with progressive neuronal cell damage and death in Alzheimer's disease, one of the most common neurodegenerative disorders. An edible brown seaweed, Ecklonia cava, contains a variety of biologically active compounds such as phlorotannins. In this study, we comparatively evaluated the total phenolic content, antioxidant capacity, and neuroprotective effects of the phlorotannin-rich extract from E. cava (PEEC). The total phenolic content of PEEC and dieckol was 810.8 mg gallic acid equivalents (GAE)/g and 996.6 mg GAE/g, respectively. Antioxidant capacity of PEEC was 1,233.8 mg vitamin C equivalents (VCE)/g and 392.1 mg VCE/g determined using ABTS and DPPH assays, respectively, while those of dieckol were 2,238.4 mg VCE/g and 817.7 mg VCE/g. High-performance liquid chromatography results revealed 48.08 ± 0.67 mg dieckol/g of PEEC. PEEC had neuroprotective effects in pheochromocytoma (PC-12) and human neuroblastoma (SH-SY5Y) cells against H2O2- and AAPH-induced oxidative damage, partly due to reduced intracellular oxidative stress. PEEC treatment inhibited acetylcholinesterase and butyrylcholinesterase in a dose-dependent manner. Taken together, these findings suggest that PEEC is a good source of antioxidants and neuroprotective materials.
Luo, Heng;Li, Changtian;Kim, Jin Cheol;Liu, Yanpeng;Jung, Jae Sung;Koh, Young Jin;Hur, Jae-Seoun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.23
no.2
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pp.161-166
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2013
At present, acetylcholinesterase (AChE) inhibitors are the first group of drugs to treat mild to moderate Alzheimer's disease (AD). Although beneficial in improving cognitive and behavioral symptoms, the effectiveness of AChE inhibitors has been questioned since they do not delay or prevent neurodegeneration in AD patients. Therefore, in the present study, in order to develop new and effective anti-AD agents from lichen products, both the AChE inhibitory and the neuroprotective effects were evaluated. The AChE inhibitory assay was performed based on Ellman's reaction, and the neuroprotective effect was evaluated by using the MTT method on injured PC12 cells. One AChE inhibitor ($IC_{50}$ = 27.1 ${\mu}g/ml$) was isolated by means of bioactivity-guided isolation from the extract of lichen-forming fungus Cladonia macilenta, which showed the most potent AChE inhibitory activity in previous screening experiment. It was then identified as biruloquinone by MS, and $^1H$- and $^{13}C$-NMR analyses. The inhibitory kinetic assay suggested that biruloquinone is a mixed-II inhibitor on AChE. Meanwhile, biruloquinone improved the viability of the $H_2O_2$- and ${\beta}$-amyloid-injured PC12 cells at 1 to 25 ${\mu}g/ml$. The protective effects are proposed to be related to the potent antioxidant activities of biruloquinone. These results imply that biruloquinone has the potential to be developed as a multifunctional anti- AD agent.
Oxidative stress induced by reactive oxygen intermediates (ROIs) has been implicated in a variety of human diseases including cancer, diabetes, rheumatoid arthritis and neurodegenerative disorders. Hydrogen peroxide ($H_2O_2$), a representative ROI which is produced during the cellular redox process, can cause cell death via apoptosis and/or necrosis depending on its concentrations. l5-Deoxy-$D^{12, 14}$ prostaglandin $J_2$ (15d-$PGJ_2$), a dehydration product of prostaglandin $D_2$, has been reportd to possess a number of biological activities such as anti-inflammatory, anticarcinogenic, and antioxidative properties. (omitted)
A convenient bioassay of nerve growth factor(NGF) is essential for assessing its potency during the course of product development and quality controls afterwards. We have set up a cell-based bioassay for determining the potency of recombinant NGF using rat pheochromocytoma (PC12) cells. Cell survival was measured by monitoring the reduction of the alamarBlue$^{TM}$ dye by living cells. (omitted)d)
Liriope platyphylla (LP) Wang et Tang has been used for tonic, anti-tussive and expectorant in Korea. In the current study, we found that buthanol fraction of Liriope platyphylla-conditioned media of C6 and primary astrocyte induced the neurite outgrowth of PC 12 cells, which effect was reversed by addition of NGF-antibody. We demonstrated that buthanol fraction of Liriope platyphylla increased the expression and secretion of NGF through RT-PCR and ELISA. (omitted)
Activation of the apoptosis program by an increased production of beta-amyloid peptides (A${\beta}$) has been implicated in the neuronal cell death of Alzheimer's disease. Bcl-2 is a well demonstrated anti-apoptotic protein, however, the mechanism of anti-apoptotic action of Bcl-2 in A${\beta}$-induced apoptosis of neuronal cells is not fully understood. (omitted)
The action of phospholipid on the rhodotorucine A(RH.A) acceptance by heterbasidiomyceteous yeast Rhodosporidium toruloides mating type a cells and the effect of medium composition during sexual differentiation were investigated. Activation of trigger peptidase(TPase)was very sensitive to the originated phospholipid from R. toruloides and was more sensitive to phospholipid liposome made up of phospholipi. Phospholopod present on the membrance of mating type a cells consists of phospatidylglycerol(PG), phosphatidylethanolamine(PE), phospatidylcholine(PC), phospatidylinositol(PI), and phosphatidylserine(PS) of 12.9, suprisingly 45.4, 11.0, and 13.9%, respectively. As the result of using C-1 and N-1 mediums which limited C and N sources capable of inhibiting the synthesis of phospholipid, it resulted inhibiting sexual dlfferentiation and production of Rh.A from mating type Acells.
Proceedings of the Korean Society of Embryo Transfer Conference
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2002.11a
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pp.75-75
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2002
The present study was conducted for the production of transgenic cloned cows by somatic cell nuclear transfer (SCNT) that secrete human prourokinase into milk. To establish an efficient production system for bovine transgenic SCNT embryos, the offset was examined of various conditions of donor cells including cell type, size, and passage number on the developmental competence of transgenic SCNT embryos. An expression plasmid far human prourokinase (pbeta-ProU) was constructed by inserting a bovine beta-casein promoter, a green fluorescent protein (GFP) marker gene, and a human prourokinase target gene into a pcDNA3 plasmid. Three types of bovine somatic cells including two adult cells (cumulus cells and ear fibroblasts) and fetal fibroblasts were prepared and transfected using a lipid-meidated method. In Experiment 1, developmental competence and rates of GFP expression in bovine transgenic SCNT embryos reconstructed with cumulus cells were significantly higher than those from fetal and ear fibroblasts. In Experiment 2, the effect of cellular senescence in early (2 to 4) and late (8 to 12) passages was investigated. No significant differences in the development of transgenic SCNT embryos were observed. In Experient 3, different sizes of GFP-expressing transfected cumulus cells [large (>30 ${\mu}{\textrm}{m}$) or small cell (<30 ${\mu}{\textrm}{m}$)] were used for SCNT. A significant improvement in embryo development and GFP expression was observed when small cumulus cells were used for SCNT. Taken together, these results demonstrate that (1) adult somatic cells could serve as donor cells in transgenic SCNT embryo production and cumulus cells with small size at early passage were the optimal cell type, and (2) transgenic SCNT embryos derived from adult somatic cells have embryonic development potential.
In this study, the neuronal cell protective effects of methanol extract from cheonggukjang were evaluated. The proximate composition and total phenolics of the methanol extract were 40.95% crude protein, 22.49% crude fat, 15.99% nitrogen free extract, 7.91% moisture, 6.74% crude ash, 5.92% crude fiber, and 28.43 mg/g of total phenolics. Intracellular ROS accumulation resulting from $H_2O_2$ treatment of PC12 cells was significantly reduced when methanol extract was present in the media compared to PC12 cells treated with $H_2O_2$ only. In a cell viability assay using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium-bromide (MTT), the methanol extract showed protective effects against $H_2O_2$-induced neurotoxicity, and lactate dehydrogenase (LDH) release into the medium was also inhibited. Furthermore, the inhibitory effect of the methanol extract against acetylcholinesterase was dose-dependent.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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