Marine algaes are capable of binding a large quantity of heavy metals. We have investigated the uptake capacity of Pb and Cu by using 22 species of marine algae. collected from Korean coast. Among a variety of different marine algae types for biosorbent potential. Kjellmaniella crassifolia showed the highest uptake capacity of Pb. Metal uptake of Pb and Cu by Kjellmaniella crassifolia increase as the initial concentration rises, as long as binding sites are remained. The metal uptake parameters for Pb and Cu had been determined according to Langmuir and Freundlich model. By increasing pH, Pb uptake was increased and Cu uptake was constant. The maximum uptake capacity of Pb and Cu by Kjellmaniella crassifolia was 437 mg/g and 129 mg/g, respectively.
Cisplatin treatment increases the excretion of inorganic phosphate in vivo. However, the mechanism by which cisplatin reduces phosphate uptake through renal proximal tubular cells has not yet been elucidated. We examined the effect of cisplatin on $Na^+$-dependent phosphate uptake in opossum kidney (OK) cells, an established proximal tubular cell line. Cells were exposed to cisplatin for an appropriate time period and phosphate uptake was measured using $[^{32}P]$-phosphate. Changes in the number of phosphate transporter in membranes were evaluated by kinetic analysis, $[^{14}C]$phosphonoformic acid binding, and Western blot analysis. Cisplatin inhibited phosphate uptake in a time- and dose-dependent manner, and also the $Na^+$-dependent uptake without altering $Na^+$-independent uptake. The cisplatin inhibition was not affected by the hydrogen peroxide scavenger catalase, but completely prevented by the hydroxyl radical scavenger dimethylthiourea. Antioxidants were ineffective in preventing the cisplatin-induced inhibition of phosphate uptake. Kinetic analysis indicated that cisplatin decreased Vmax of $Na^+$-dependent phosphate uptake without any change in the Km value. $Na^+$-dependent phosphonoformic acid binding was decreased by cisplatin treatment. Western blot analysis showed that cisplatin caused degradation of $Na^+$-dependent phosphate transporter protein. Taken together, these data suggest that cisplatin inhibits phosphate transport in renal proximal tubular cells through the reduction in the number of functional phosphate transport units. Such effects of cisplatin are mediated by production of hydroxyl radicals.
Cheong, Jae-Hoon;Desmond I. Bannon;Josep P. Bressler
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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2001.11a
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pp.91-91
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2001
Nramp2, also known as DMT1 and DCT1, is a 12-transmembrane domain protein responsible for dietary iron uptake as well as metal ions such as lead, manganese, zinc, copper, nickel, cadmium, and cobalt. High expression of DMT1 increase lead uptake, and DMT1-dependent lead transport was H -dependent and inhibited by iron ions. The molecular mechanism of lead transport in CNS is as yet unknown. although interactions between iron and lead at the level of absorption have been known for some time. The process of lead uptake into astrocytes was not known yet. Nramp2 may mediate transport of heavy metal into astrocytes. We investigated whether Nramp2 mediate transport of lead into astrocytes. And we do whether Nramp2 was expressed highly by deprivation of iron in Astrocytes, and lead uptake into astrocytes was influenced by expression of Nramp2. Immortalized human fetal astrocyte(SV-FHA) cells were cultured in medium containing Dulbecco's modified Eagle's medium and treated with Deferoxamine. Northern blot analysis was done for determining mRNA level of DMT1 and lead uptake assay was done in incubation condition of pH 5.5 and 7.4.
Cheong, Jae-Hoon;Tan, Tan Blendyl;Kim, Y.B.;Bannon, Bannon Desmond;Olivi, Olivi Luisa;Bressler, Bressler Joseph
Proceedings of the PSK Conference
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2003.10b
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pp.117.2-117.2
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2003
The mechanism by which lead enters glial cells was examined. The uptake of lead reached saturation when assays were performed in buffers at pH 5.5 and 7.4. The Vmax and Km was 2.7 pmoles/mg protein/min and 13.4 M in the buffer at pH 7.4, respectively, whereas the Vmax and Km was 329 fmoles/mg and 8.2 M in the buffer at pH 5.5, respectively. Uptake in a buffer at pH 5.5 but not at pH 7.4 was inhibited by iron. Cells treated with the iron chelator desferoxamine displayed higher levels of the divalent metal transporter mRNA and protein. (omitted)
To remove phosphate accumulated in the soil and water, Acinetobacter lwoffi PO8 possessing a high ability to accumulate phosphate was isolated from a active sludge. Bacterium was cultured in the liquid medium containing $150\;{\mu}g/mL$ of phosphate at $30^{\circ}C$ in different culture conditions to examine intracellular phosphate uptake. The initial pH in the range of $7.5{\sim}8.5$ was effective on the growth and phosphate uptake of the strain. Glycerol and arabinose used as a carbon sources showed 93 and 91% the phsphate uptake, respectively. Among the nitrogen sources, ammonium salt such as $NH_4NO_3$ and $(NH_4)_2SO_4$ was effectively utilized on the phosphate uptake compared with amino compounds. The rate of phosphate uptake of $NH_4NO_3$, and $(NH_4)_2SO_4$, was 95 and 96%, respectively The growth and Phosphate uptake ability in the strain were significantly promoted when metal ions were added in the medium; $Co^{2+}$, however, was not utilized by the strain. The capacity of phosphate uptake was enhanced to $10{\sim}20%$ when arginine, methionine, or lysine was added. Using $^{32}P$ to examine the uptake Pattern of intracellular phosphate, experiment result showed that polyphosphate was largely found in the fraction of intracellular inorganic phosphate of Acinetobacter lwoffi PO8.
Experiments were conducted to investigate the effects of chromium application level, soil pH change, soil topping, application of some metals and application of organic matter on the absorption of chromium by radish and its growth. The results of experiments are summarized as following. Application of chromium as potassium dichromate up to 50 mg/kg did not affect the germination of radish seed. Application of chromium above this level affected the germination abversely. The dry matter yield of and absorption of chromium by radish was not affected by the application of chromium up to 100 mg/kg. Increased in soil pH decreased the uptake of chromium by radish under all range of chromium application rates. Under acidic condition (pH 5-6), the increase in the application of chromium resulted in the increase in the uptake of chromium by radish and lowering of dry matter production of radish. However, under alkaline condition (pH 7-8), increased application of chromium did not affect the uptake of chromium and the dry matter yield of radish. The application of Zn, Fe and Cu, up to 100 mg/kg did not affect not affect the uptake of chromium and dry matter yield of radish. The topping of soil with untreated soil after application of chromium up to five cm, did not affect the chromium uptake of radish, the same treatments tended to increase the dry matter yield of radish. The application of organic fertilizer(obtained from local market) up to the amount equivalent to 3000 kg/ha, although increased the dry matter yield of radish, did not affect the uptake of chromium by radish significantly. All the treatments tested in this study did not affect the translocation of chromium between root and shoot of radish.
The most significant direct role of estrogen in vivo is its ability to elicit receptor-mediated cellular proliferation in mammalian target tissues. However, the mechanism by which exogenously added estrogen causes the neoplastic transformation of renal cortical cells is yet to be uncovered. The present study was designed to evaluate interaction of $17{\beta}-estradiol\;(E_2)$ with epidermal growth factor (EGF) and insulin-like growth factor-I (IGF-I) on proliferation and $P_i$ uptake in primary cultured rabbit renal proximal tubular cells in phenol red-free, hormonally defined-medium. $[^3H]-thymidine$ incorporation increased markedly by about 133% and 141% more in the presence of $10^{-9}\;and\;10^{-6}\;M\;E_2$, respectively, than that of control. Cell count was 162% and 143% greater in the presence of $10^{-9}\;and\;10^{-6}\;M\;E_2$ , respectively, compared with control. Among all time points examined, there was an increase in $[^3H]-thymidine$ incorporation in the presence of $10^{-9}\;M\;E_2$ at day 9 or 13, respectively. However, $E_2$ ($10^{-9}\;M$) significantly drove up cell count to 160% of that of control at day 13, while it had a slight but statistically insignificant effect at day 9. $E_2-induced$ stimulation of $[^3H]-thymidine$ incorporation was completely reversed by $E_2$ antagonists (progesterone or tamoxifen). $E_2$ ($10^{-9}\;M$) or EGF ($10^{-8}\;M$) significantly stimulated $[^3H]-thymidine$ incorporation by 144% and 154% of control. $E_2$ plus EGF was synergistic on $[^3H]-thymidine$ incorporation (204% of control), while $E_2$ plus IGF-I showed a slight but no significant synergistic effect. Cell number also displayed similar pattern. $E_2$ ($10^{-9}\;M$) significantly stimulated $P_i$ uptake to 134% of control. $E_2$-induced stimulation of $P_i$ uptake was partially reversed by $E_2$ antagonists. EGF or IGF-I ($10^{-8}\;M$) significantly also increased $P_i$ uptake to 132% or 129% of control. $E_2$ plus EGF had synergistic effect on $P_i$ uptake, while $E_2$ plus IGF-I did not. In conclusion, $E_2$ may act not only directly interaction with its receptors but also indirectly as a modulator of EGF in proliferation and $P_i$ uptake of primary cultured rabbit renal proximal tubular cells.
Iron uptake in mitochondria and fractionated mitochondria compartments was studied to understand iron transport in heart mitochondria. The inner membrane is most active in iron uptake. Mitochondrial uptake was dependent on iron concentration and the amount of mitochondria. Iron transport was inversely proportional to pH in the range of 6.0 to 8.0. Iron transport reached a maximum after 30 min of incubation at $37^{\circ}C$. Iron uptake was inhibited by 1 mM ATP and stimulated by 1 mM ADP. The oxidative phosphorylation inhibitor oligomycin inhibited iron uptake, but rotenone and antimycin A did not. The divalent ions $Mg^{2+}$, $Cu^{2+}$, $Mn^{2+}$, and $Zn^{2+}$ suppressed iron uptake at $10\;{\mu}M$ and stimulated it at 1 mM. The divalent ion $Ca^{2+}$ stimulated iron uptake at $10\;{\mu}M$ and suppressed it at 1 mM, competing with iron. The uptake of calcium was stimulated by 10 to $1000\;{\mu}M$ ATP, while iron uptake was stimulated reciprocally by 10 to $1000\;{\mu}M$ ADP, suggesting that these ions have movements similar to those of ATP and ADP.
Plastic film houses are directly associated with increases in plant growth and yield of vegetable crops through a year round cultivation, however, at the same time temperature stresses are one of fates which are difficult to avoid during crop growth. The objective of this study was to examine the translocation and distribution of minerals (N, P, K) and carbohydrates as well as seasonal fluctuation of mineral uptake and carbohydrate production in cucumber plant grown under moderately high temperature. The temperature treatments consisted of 2-layers film houses (optimal temp.) and 3-layers (high temp.). Shoot growth of cucumber plants were linearly increased until 14 weeks after transplanting (WAT) without any significant difference between both temperatures, and the slowdown was observed from 16 WAT. The level of soluble sugar and starch was slightly greater in optimal temperature compared to the high. Cumulative accumulation of soluble sugar was significantly different before and after 12 WAT in both treatments, whereas starch level represented a constant increase. Monthly production of soluble sugar reached the peak between 12 to 16 WAT, and starch peaked between 4 to 8 WAT and 12 to 16 WAT. Total uptake of N, P and K in optimal and high temperature conditions was $18.4g\;plant^{-1}$ and 17.6 for N, 4.7 and 5.1 for P, and 37.7 and 36.2 for K, respectively, and the pattern of monthly N uptake between optimal and high temperatures was greater in early growth stage, whereas was greater in mid growth stage in both P and K. Thus, this study suggests that moderately high temperature influences much greater to photosynthesis and carbohydrate production than plant biomass and mineral uptake. On the basis of the present result, it is required to indentify analysis of respiration rates from plant and soil by constantly increasing temperature conditions and field studies where elevated temperatures are monitored and manipulated.
Prostate cancer is one of the most common cancers in men. Choline PET or PET/CT has been used to visualize prostate cancer, and high levels of choline accumulation have been observed in tumors. However, the uptake system for choline and the functional expression of choline transporters in prostate cancer are not completely understood. In this study, the molecular and functional aspects of choline uptake were investigated in the LNCaP prostate cancer cell line along with the correlations between choline uptake and cell viability in drug-treated cells. Choline transporter-like protein 1 (CTL1) and CTL2 mRNA were highly expressed in LNCaP cells. CTL1 and CTL2 were located in the plasma membrane and mitochondria, respectively. [3H]Choline uptake was mediated by a single Na+-independent, intermediate-affinity transport system in the LNCaP cells. The anticancer drugs, flutamide and bicalutamide, inhibited cell viability and [3H]choline uptake in a concentration-dependent manner. The correlations between the effects of these drugs on cell viability and [3H]choline uptake were significant. Caspase-3/7 activity was significantly increased by both flutamide and bicalutamide. Furthermore, these drugs decreased CTL1 expression in the prostate cancer cell line. These results suggest that CTL1 is functionally expressed in prostate cancer cells and are also involved in abnormal proliferation. Identification of this CTL1-mediated choline transport system in prostate cancer cells provides a potential new therapeutic target for the treatment of this disease.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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