Objective : Kurarinone is one of the flavonoids isolated from Sophorae Radix with various biological activities including anti-microbial effect. In this study, we investigated the effects of Kurarinone on tert-butyl hydroperoxide (tBHP)-induced oxidative stress finally leading to apoptosis in human hepatoma cell line HepG2. Methods : To determine the effects on cell viability, the cells were exposed to tBHP ($100{\mu}mol/l$) after pretreatment with kurarinone (0.5 and $1{\mu}g/ml$). Cell viability was measured by MTT assay. To reveal the possible mechanism of cytoprotectivity of kurarinone, levels of reactive oxygen species, intracellular glutathione, mitochondrial membrane potential, and expression of caspase were examined. Results : tBHP-induced cell death was due to oxidative stress and the resulting apoptosis. Kurarinone dose-dependently protected cells from apoptosis when determined by MTT and TUNEL assay. Consistent with this observation, decreased expression of pro-caspase 3/9 protein by tBHP was restored by kurarinone. Kurarinone also showed anti-oxidative effects by inhibiting generation of ROS and depletion of GSH in tBHP-stimulated HepG2 cells. In addition, kurarinone significantly recovered disruption of mitochondrial membrane potential (MMP) as a start sign of hepatic apoptosis induced by oxidative stress. Conclusion : From these results, it was concluded that kurarinone protected tBHP-induced hepatotoxicity with anti-oxidative and anti-apoptotic activities. Our results suggest that kurarinone might be beneficial to hepatic disorders caused by oxidative stress.
Shim, Ji Hwan;Gim, Huijin;Lee, Soojin;Kim, Byung Joo
대한약침학회지
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제19권2호
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pp.129-136
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2016
Objectives: The crude extracts of Scutellaria barbata D. Don (SB) have traditionally demonstrated inhibitory effects on numerous human cancers both in vitro and in vivo. Gastric cancer is one of the most common types of cancer on world. The authors investigated the effects of an ethanol extract of Scutellaria barbata D. Don (ESB) on the growth and survival of MKN-45 cells (a human gastric adenocarcinoma cell line). Methods: The MKN-45 cells were treated with different concentrations of ESB, and cell death was examined using an MTT (3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide) assay. Analyses of sub-G1 peaks, caspase-3 and -9 activities, and mitochondrial membrane depolarizations were conducted to determine the anti-cancer effects of SB on MKN-45 cells. Also, intracellular reactive oxygen species (ROS) generation was investigated. Results: ESB inhibited the growth of MKN-45 cells, caused cell cycle arrest, and increased the sub-G1 population. In addition, ESB markedly increased mitochondrial membrane depolarization and the activities of caspase-3 and -9. ESB exerted anti-proliferative effects on MKN-45 cells by modulating the mitogen-activated protein kinase (MAPK) signaling pathway and by increasing the generation of ROS. Furthermore, combinations of anti-cancer drugs plus ESB suppressed cell growth more than treatments with an agent or ESB, and this was especially true for cisplatin, etoposide, and doxorubicin. Conclusion: ESB has a dose-dependent cytotoxic effect on MKN-45 cells and this is closely associated with the induction of apoptosis. ESB-induced apoptosis is mediated by mitochondria-, caspase- and MAPK dependent pathways. In addition, ESB enhances ROS generation and increases the chemosensitivity of MKN-45 cells. These results suggest that treatment with ESB can inhibit the proliferation and promote the apoptosis of human gastric adenocarcinoma cells by modulating the caspase-, MAPK- and ROS-dependent pathway.
연속 기체흐름계에서 감지막으로 $Na_2CO_3$와 $MCO_3$ ($M=Cs_2,K_2,Li_2,Ca$)를 입힌 $Na^+$ 이온 전해질 센서가 $CO_2$ 가스를 감지할 때 anode반응을 도출하였다. 흔히 사용되는 전기화학 센서에 대해 일반적으로 알려진 전체 전극반응인 $MCO_3=MO+CO_2$ 반응은 위의 $Na^+$이온 전해질 센서에는 적합한 반응이 아니었다. 따라서 anode 반응은 전체cell 내의 ionic balance를 유지하기 위해 전해질과 감지막 계면에 이온교환반응을 첨가시킴으로써 도출할 수 있었으며 anode반응은 $Na_2CO_3$ 및 감지막의 금속($M^{++}$) 이온이 포함된 산화물이 참가하는 반응임을 알 수 있었다. 이와 같이 도출된 전극반응으로부터 구한 EMF와 일시 기체흐름계에서의 출력 EMF와의 차이를 아울러 검토하였다. 이러한 출력에서의 차이는 $CO_2$와 $O_2$의 분압과 분위기가스와 전극물질과의 비가역반응에 기인됨을 알았다.
Membranes prepared from Vibrio natriegens oxidized both NADH and deamino-NADH as substrates. The maximum activity of the membrane-bound NADH oxidase was obtained at about pH 8.5 in the presence of 0.2 M NaCl, whereas that of the NADH:ubiquinone oxidoreductase was obtained at about pH 7.5 in the presence of 0.2 M NaCl. Electron transfer from NADH or deamino-NADH to ubiquinone-l or oxygen generated a considerable membrane potential (${\Delta}{\psi}$), which occurred even in the presence of $20{\mu}M$ carbonylcyanide m-chlorophenylhydrazone (CCCP). However, the ${\Delta}{\psi}$ was completely collapsed by the combined addition of $10{\mu}M$ CCCP and $20{\mu}M$ monensin. On the other hand, the activity of the NADH oxidase and the ${\Delta}{\psi}$ generated by the NADH oxidase system were inhibited by about $90\%$ with $10{\mu}M$ HQNO, whereas the activity of the NADH:ubiquinone oxidoreductase and the ${\Delta}{\psi}$ generated at the NADH:ubiquinone oxidoreductase segment were inhibited by about $60\%$. Interestingly, the activity of the NADH:ubiquinone oxidoreductase and the ${\Delta}{\psi}$ generated at the NADH:ubiquinone oxidoreductase segment were resistant to the respiratory chain inhibitors such as rotenone, capsaicin, and $AgNO_3$, and the activity of the NADH oxidase and the ${\Delta}{\psi}$ generated by the NADH oxidase system were very sensitive only to $AgNO_3$. It was concluded, therefore, that V. natriegens cells possess a $AgNO_3$-resistant respiratory $Na^+$ pump that is different from the $AgNO_3$-sensitive respiratory $Na^+$ pump of a marine bacterium, Vibrio alginolyticus.
Rhamnose-rich (RROP-s) and fucose-rich (FROP-s) oligo-and polysaccharides were prepared and extensively characterised by physical and chemical procedures [1,2] and compared to L-fucose. Their biological properties were then studied on human skin fibroblast cell cultures, human skin explant cultures and on hairless rat skin, using a variety of cell-biological, biochemical and computerised morphometrical procedures. Among the most important properties we could establish, the following are of particular interest for the tretment and prevention of age-dependent modifications of human skin (loss of skin-tissue, cells and matrix, wrinkle formation and others) : stimulation of cell proliferation (by $^3$[H]-thymidine incorporation and the MTT test), scavenging of reactive oxygen species (ROS) using several different procedures, and protease (MMP-2 and MMP-9) down-regulation. A topical preparation, using RROP-s and FROP-s, and/or L-fucose, was shown to increase cell proliferation, dermal matrix synthesis, efficient scavenging of ROS-s and to increase also the thickness of dermal tissue when applied for 4 weeks on hairless rat skin, accompanied by the densification of collagen bundles as well as by an increase of elastin synthesis. Using fluorescent labeled FROPs, it could be shown that these oligosaccharides react with cell-membrane receptors and especially with the elastin-laminin-receptor and the fucose-mannose receptor, but they penetrate also in the cell nucleus, suggesting the possibility of a direct action on the regulation of gene expression. When applied to the human skin of a team of voluntary women encompassing all age-groups, the efficiency of FROP-containing preparation could be confirmed using indentometry and computerised evaluation of skin micro-relief, as well as evaluation of periorbital wrinkles. It appears therefore that these preparations correspond to all the requirements of active anti-aging principles.
Objective : This study was undertaken to determine if Carthami Semen Aquacupunc- ture(CSA) exerts protective effect against alterations in membrane transport function rabbits with mercury chloride(HG)-induced acute renal failure. Methods : The administration of Hg at a subcutaneous single dose of 10 mg/kg caused a reduction in GFR and an increase in fractional Na excretion, indicating generation of acute renal failure. When CSA were given for 7 days prior to Hg administration, such changes were significantly attenuated. The fractional excretion of glucose and phosphate was increased in rabbits treated with Hg alone. Results : The increase in rabbits treated with Hg following CSA are significantly lower than that in animals treated with Hg alone. Uptakes of glucose and phosphate in purified isolated brush-border membrane and Na-K-ATPase activity in microsomal fraction were inhibited in rabbits treated with Hg alone. Such changes were prevented by CSA. Uptakes of organic ions, PAH and TEA, in renal cortical slices were inhibited by the administration of Hg, which was prevented by CSA. Exposure of renal cortical slices to Hg in vitro caused an increased LDH release and lipid peroxidation, which was significantly prevented by CSA extract. Conclusions : These results indicate that the administration of Hg causes impairment in reabsorption of solutes in the proximal tubule via the generation of reactive oxygen species. CSA provides the protection against the impairment in proximal reabsorption, and its effect may be resulted from its antioxidant effect.
It has been reported that silibinin, a natural polyphenolic flavonoid, induces cell death in various cancer cell types. However, the underlying mechanisms by which silibinin induces apoptosis in human glioma cells are poorly understood. The present study was therefore undertaken to examine the effect of silibinin on glioma cell apoptosis and to determine its underlying mechanism in human glioma cells. Apoptosis was estimated by FACS analysis. Reactive oxygen species (ROS) generation and mitochondrial membrane potential (${\Psi}m$) were measured using fluorescence dyes DCFH-DA and $DiOC_6$(3), respectively. Cytochrome c release from mitochondria and caspase-3 activation were estimated by Western blot analysis using specific antibodies. Exposure of cells to 30 mM silibinin induced apoptosis starting at 6 h, with increasing effects after 12-48h in a time-dependent manner. Silibinin caused ROS generation and disruption of ym, which were associated with the silibinin-induced apoptosis. The silibinin-induced ROS generation and disruption in ym were prevented by inhibitors of mitochondrial electron transport chain. The hydrogen peroxide scavenger catalase blocked ROS generation and apoptosis induced by silibinin. Silibinin induced cytochrome c release into cytosolic fraction and its effect was prevented by catalase and cyclosporine A. Silibinin treatment caused caspase-3 activation, which was inhibited by DVED-CHO and cyclosporine A. Pretreatment of caspase inhibitors also protected against the silibinin-induced apoptosis. These findings indicate that ROS generation plays a critical role in the initiation of the silibinin-induced apoptotic cascade by mediation of the mitochondrial apoptotic pathway including the disruption of ${\Psi}m$, cytochrome c release, and caspase-3 activation.
고분자전해질 수소연료전지는 수소와 산소의 전기화학적 반응을 이용하여 전기를 자발적으로 생산하며, 높은 전류밀도와 비교적 낮은 구동온도의 장점을 가져 화석연료를 대체할 미래 친환경 화학에너지 변환 장치이다. 현재 연료전지는 수소전기차를 중심으로 가정용 연료전지, 수소연료전지 발전소 등 다양한 산업에서 활용 중에 있다. 하지만 연료전지 산업의 지속적인 성장을 위해서는 여러 기술적인 문제가 보완되어야 하며, 그 중에서도 연료전지 각 구성요소의 장기 내구성을 필수적으로 확보해야 한다. 특히 연료전지의 연료극과 공기극에서 사용되는 탄소담지 백금촉매는 연료 전지 운전조건에 따라 다양한 기작을 통하여 성능 감소가 일어난다. 이에 연료전지용 촉매의 내구성 파악을 위한 가속테스트법이 다양하게 제시되고 있다. 본 논문에서는 연료전지용 백금 기반 촉매의 성능 감소 기작을 설명하고, 지금까지 제시된 가속스트레스 시험을 통한 내구성 평가 방법에 대해 비교하고자 한다.
In order to enhance the bioavailability of curcumin its conjugates with piperic acid and glycine were synthesized by esterifying the 4 and 4' phenolic hydroxyls, the sites of metabolic conjugation. Antiproliferative and apoptotic efficacy of synthesized conjugates was investigated in MCF-7 and MDA-MB-231 cell lines. $IC_{50}$ values of di-O-glycinoyl (CDG) and di-O-piperoyl (CDP) esters of curcumin were found to be comparable with that of curcumin. Both conjugates induced chromatin condensation fragmentation and apoptotic body formation. CDP exposure to MCF-7 cells induced apoptosis initiating loss of mitochondrial membrane potential (${\Delta}{\Psi}m$) followed by inhibition of translocation of transcription factor NF-${\kappa}B$ and release of Cytochrome-C. Reactive oxygen species (ROS) production was evaluated by fluorescent activated cell sorter. Change in ratio of Bcl2/Bclxl was observed, suggesting permeablization of mitochondrial membrane leading to the release of AIF, Smac and other apoptogenic molecules. DNA fragmentation as a hallmark for apoptosis was monitored by TUNEL as well as agrose gel electrophoresis. Thus, it was proven that conjugation does not affect the therapeutic potential of parent molecule in vitro, while these could work in vivo as prodrugs with enhanced pharmacokinetic profile. Pharmacokinetics of these molecules under in vivo conditions is a further scope of this study.
Objective: This study was conducted to investigate the effect of L-carnitine on the pig semen characteristics during storage. Methods: Spermatozoa samples were examined for spermatozoa quality and then randomly divided into 5 groups: 0 (control), 12.5, 25, 50, and 100 mM L-carnitine. Sperm motility, plasma membrane integrity and antioxidant parameters (total reactive oxygen species, total antioxidant capacity, and malondialdehyde) were evaluated after 0, 3, 5, and 10 day cooled-storage at 17℃. Moreover, ATP content, mitochondria activity as well as sperm-binding and in vitro fertilizing ability of preserved boar sperm were also investigated. Results: Supplementation with 50 mM L-carnitine could effectively maintain boar sperm quality parameters such as sperm motility and membrane integrity. Besides, we found that L-carnitine had positive effects on boar sperm quality mainly through improving antioxidant capacities and enhancing ATP content and mitochondria activity. Interestingly, by assessing the effect of L-carnitine on sperm fertility and developmental potential, we discovered that the extender containing L-carnitine could improve sperm quality and increase the number of sperms bounding to zona pellucida, without improving in vitro fertility and development potential. Conclusion: These findings suggested that the proper addition of L-carnitine to the semen extender improved boar sperm quality during liquid storage at 17℃.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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