Helicobacter pylori is a major cause of gastric-associated diseases. In our previous study, the Adhesin/CTXA2B was expressed as insoluble recombinant chimeric protein derived from the H. pylori adhesin genetically coupled to CTXA2B subunit in Escherichia coli. Since it is very important to optimize IPTG concentration, culture temperature and composition of medium to maximize cell growth and productivity, these conditional growth factors were determined for increasing the productivity of the expressed Adhesin/CTXA2B chimeric protein in Escherichia coli JM101 carrying pTEDhpa/ctxa2b. Our data demonstrate that optimal medium for increased production of chimeric protein was a YCP/Glu medium composed of 2% yeast extract, 1% casamino acid, phosphate solution [0.3% $KH_2P0_4$, 0.4% $Na_2HP0_4$, 0.25% ($NH_4)_2HPO_4$], and 0.5% glucose. In addition, optimal concentration of IPTG was 1 mM and culture temperature, $37^{\circ}C$.
The optimal culture conditions were studied for plant regeneration from mesophyll protoplasts of Solanum sisymbriifolium. Axenic seedlings of S. sisymbriifolium were used as a explant for protoplast culture. Many viable protoplasts were isolated by incubating leaf slices in an enzyme solution containing 0.25% Meicerase and 0.05% Macerozyme for 16 hr at $25^{\circ}C$ without shaking. Protoplast density of $5.0{\times}10^4\;ml^{-1}$ in Kao medium containing 5.0 mg/L NAA, 1.0 mg/L 2,4-D and 1.0 mg/L BA was optimal for colony formation. Most colonies were formed when protoplasts were cultured at $25^{\circ}C$ after initial culture at $30^{\circ}C$ for one week. On the MS agar medium with 1.0 mg/L zeatin, 38.4% of protoplast-derived calli differentiated shoots. These shoots rooted on 1/2MS medium with 5.0 g/L sucrose and 2.5 g/L gellan gum, and developed into whole plants.
Journal of Practical Agriculture & Fisheries Research
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제7권1호
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pp.74-80
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2005
To elucidate the optimal conditions of mycelial growth of Pholiota adiposa, the effect of a kinds of media, incubation temperature and shaking culture were investigated. Mushroom complete medium was selected as superior media for mycelial growth in this fungus. The optimal temperature for mycelial growth of this fungus shows at 25℃. Shaking culture could be obtain the mycelia in two or three times than the stationary culture.
Kim, Ye Ji;Jun, Lyu Jin;Kang, Mi Rae;Lee, Da Won;Woo, Soo Ji;Kim, Myoung Sug;Jeong, Joon Bum
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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제53권3호
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pp.443-450
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2020
No established method can be used to select effective antibiotics in antibiotic susceptibility tests for fish bacterial pathogens quickly and accurately. Here, we established the optimal conditions for determining the minimal inhibitory concentration (MIC) of major fish bacterial pathogens (Streptococcus spp., Edwardsiella tarda, Vibrio spp., Aeromonas spp., and Pseudomonas spp.) using the KRAQ1 and CAMPY2 panels. The MIC panel used 18 antibiotics of two types and we conducted experiments to establish the optimal culture medium and temperature for each species. The optimal conditions for incubating Streptococcus spp. were in cation-adjusted Mueller-Hinton broth with TES buffer (CAMHBT) at 28℃, using 5% lysed horse blood (LHB) as recommended by the Clinical Laboratory Standards Institute. For Vibrio spp., the optimal culture conditions were 28℃ in CAMHBT supplemented with 1% NaCl. The optimal conditions for culturing E. tarda, Aeromonas spp., and Pseudomonas spp. were in CAMHBT at 28℃.
For effective exopolysaccharide production and mycelial growth by a liquid culture of Fomitopsis pinicola in an air-lift bioreactor, the culture temperature, pH, carbon source, nitrogen source, and mineral source were initially investigated in a flask. The optimal temperature and pH for mycelial growth and exopolysaccharide production were $25^{\circ}C$ and 6.0, respectively. Among the various carbon sources tested, glucose was found to be the most suitable carbon source. In particular, the maximum mycelial growth and exopolysaccharide production were achieved in 4% glucose. The best nitrogen sources were yeast extract and malt extract. The optimal concentrations of yeast extract and malt extract were 0.5 and 0.1%, respectively. $K_2HPO_4\;and\;MgSO_4{\cdot}7H_2O$ were found to be the best mineral sources for mycelial growth and exopolysaccharide production. In order to investigate the effect of aeration on mycelial growth and exopolysaccharide production in an air-lift bioreactor, various aerations were tested for 8 days. The maximum mycelial growth and exopolysaccharide production were 7.9 g/l and 2.6 g/l, respectively, at 1.5 vvm of aeration. In addition, a batch culture in an air-lift bioreactor was carried out for 11 days under the optimal conditions. The maximum mycelial growth was 10.4 g/l, which was approximately 1.7-fold higher than that of basal medium. The exopolysaccharide production was increased with increased culture time. The maximum concentration of exopolysaccharide was 4.4 g/l, which was about 3.3-fold higher than that of basal medium. These results indicate that exopolysaccharide production increased in parallel with the growth of mycelium, and also show that product formation is associated with mycelial growth. The developed model in an air-lift bioreactor showed good agreement with experimental data and simulated results on mycelial growth and exopolysaccharide production in the culture of F. pinicola.
Lee, Wi Young;Lee, Jae Soon;Ka, Kang Hyeon;Ahn, Jin Kwon
Journal of Korean Society of Forest Science
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제97권3호
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pp.285-290
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2008
This study was carried out to obtain an optimal liquid culture condition for Sarcodon aspratus mycelia. Among various basal culture media the GYS (glucoe-yeast extract-soytone) medium was the best for mycelial growth. The appropriate temperature was $25^{\circ}C$. Starch, maltose or glucose was excellent carbon sources for the mycelial culture, compared to others tested. As nitrogen nutrients, soytone and $NH_4-N$ were the best organic and inorganic nitrogen sources, respectively. Moreover, the optimal concentration of soytone was 3 g per one-liter medium. In addition, we also found that alanine, $(NH_4)H_2PO_4$, and nicotinic acid were the best aminoacid, phosphorus salt, and vitamin, respectively. When all optimal conditions described above were applied to culture medium, we were able to produce 5.7 g dry weight of S. aspratus mycelia per one-liter liquid medium within 20 days.
The polysaccharide isolated from Phellinus species has been known as a folk remedy, including antitumor and immune-stimulating activities. However, there are lacks of knowledge about mycelial growth and exopolysaccharide (EH) production in its submerged culture. We investigated the optimal conditions on mycelial growth and EPS production in Phellinus baumii. The optimal temperature and initial pH for mycelial growth and EPS production in shake flask culture of P. baumii were proved to be 3$0^{\circ}C$ and pH 5.0, respectively. In case of carbon source, cellobiose and maltose were highly efficient for mycelial growth and fructose and mannitol were also relatively favorable for EPS production. Yeast extract was the most suitable nitrogen source for mycelial growth and EPS production. The composition of optimal culture medium was determined to be fructose 20 g/L, yeast extract 20 g/L, and $CaCl_2$ 0.55 g/L, respectively. Under the optimal culture condition, the maximum mycelial biomass and EPS achieved in a 5-L stirred-tank fermenter were 17.43 g/L and 3.6 g/L, respectively. It was found that the EPS was a glycoprotein onsisted of mainly arginine (14.1%) and glycine (12.0 %) in protein moiety and mainly mannose (48.7%) and arabinose (38.4%) in carbohydrate moiety.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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제35권4호
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pp.493-498
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2006
The optimal culture conditions of Monascus purpureus MMK2 for production of red pigment were investigated in submerged culture. Monascus purpureus MMK2 showed a maximal production of red pigment in the medium containing of 3.0% wheat flour, $0.15%\;NaNO_3,\;0.25%\;Na_2HPO_4\;12H_2O$ and $0.15%\;MgSO_4\;7H_2O$. The optimal culture conditions of temperature and initial pH were $30^{\circ}C$ and 6.5, respectively. The red pigment production reached to a maximal level at 7th day of cultivation.
The effects of water extracts and powder of Korean ginseng on the division of Saccharomyces cerevisiae were studied. 1. The addition of several doses of water extracts and powder of ginseng to the yeast medium of Moyer and Coghill showed various promoted division of Saccharomyces. 2. The optimal dose of ginseng on tile division of Saccharomyces (0.08% dry ginseng medium solution per $10\;cells/mm^3$) could be recognized. 3. On the culture for 24 hours at $18^{\circ}C$, the cell number of control group was $13.25{\times}10^3\;cells/mm^3$ and that of the optimal dose group of water extracts of ginseng was $23.20{\times}10^3\;cells/mm^3$. On the culture, for 24 hours at $25^{\circ}C$, the cell number of control group was $16.85{\times}10^3\;cells/mm^3$ and that of the optimal dose group was $30.20{\times}10^3\;cells/mm^3$. The increasing rate of cell divison by the ginseng was about twice than that of control group. The optimal dose treatment of ginseng at $18^{\circ}C$ was more effective than control group at $25^{\circ}C$. 4. On the culture for 24 hours at $18^{\circ}C$, the increasing rate of water extracts of ginseng was 75.1%, and the rate of ginseng powder was 7.6%. On the culture for 24 hours at $25^{\circ}C$, the rate of water extracts of ginseng was 79.8%, and the rate of ginseng powder was 57.2%. Therefore water extracts of ginseng was more effective than ginseng powder of same dry weight, and the promoted effect of ginseng powder at $25^{\circ}C$ was more effective than at $18^{\circ}C$.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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제32권2호
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pp.181-184
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2003
We investigated the effect of ethanol on the production of cellulose and acetic acid fermentation by Gluconacetobacter persimmonensis KJ145. Results showed that bacterial cellulose productivity was highest when 2% ethyl alcohol was added to apple-juice medium. For acetic acid production, 7% ethyl alcohol was needed. Optimal concentration of ethyl alcohol was 5% for simultaneous production of bacterial cellulose and acetic acid. For simultaneous production of bacterial cellulose and acetic acid, optimal nitrogen source and optimal concentration were corn steep liquor and 15% (w/v), respectively Optimal culture time for simultaneous production of bacterial cellulose and acetic acid was 14 days. At the optimal condition, Cluconacetobacter persimmonenis KJ145 produced 7.55 g/L of bacterial cellulose (dry weight).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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