Objectives: The effects of bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) and enamel matrix derivative (EMD) respectively with mineral trioxide aggregate (MTA) on hard tissue regeneration have been investigated in previous studies. This study aimed to compare the osteogenic effects of MTA/BMP-2 and MTA/EMD treatment in MC3T3-E1 cells. Materials and Methods: MC3T3-E1 cells were treated with MTA (ProRoot, Dentsply), BMP-2 (R&D Systems), EMD (Emdogain, Straumann) separately and MTA/BMP-2 or MTA/EMD combination. Mineralization was evaluated by staining the calcium deposits with alkaline phosphatase (ALP, Sigma-Aldrich) and Alizarin red (Sigma-Aldrich). The effects on the osteoblast differentiation were evaluated by the expressions of osteogenic markers, including ALP, bone sialoprotein (BSP), osteocalcin (OCN), osteopontin (OPN) and osteonectin (OSN), as determined by reverse-transcription polymerase chain reaction analysis (RT-PCR, AccuPower PCR, Bioneer). Results: Mineralization increased in the BMP-2 and MTA/BMP-2 groups and increased to a lesser extent in the MTA/EMD group but appeared to decrease in the MTA-only group based on Alizarin red staining. ALP expression largely decreased in the EMD and MTA/EMD groups based on ALP staining. In the MTA/BMP-2 group, mRNA expression of OPN on day 3 and BSP and OCN on day 7 significantly increased. In the MTA/EMD group, OSN and OCN gene expression significantly increased on day 7, whereas ALP expression decreased on days 3 and 7 (p < 0.05). Conclusions: These results suggest the MTA/BMP-2 combination promoted more rapid differentiation in MC3T3-E1 cells than did MTA/EMD during the early mineralization period.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.33
no.1
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pp.56-62
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2019
To investigate the effect of Bombycis Corpus on male osteoporosis, we performed Dual Energy X-Ray Absorptiometry(DEXA) and histochemical methods. The animals were used ICR-based male mice of 8 weeks and 50 weeks, respectively. ICR male mice at 8 weeks were used in the control group, and ICR male mice at 50 weeks were used in aging group and Bombycis Corpus group(BC group). In the aging group, 0.5 ml of distilled water was administered once a day for 6 months. In BC group, Bombycis Corpus(0.78g/kg) was dissolved in distilled water for 6 months once a day. As a result, Bombycis Corpus decreased bone loss, increased bone density by reducing the loss of bone matrix in the femur due to aging, and increased osteoblast - induced osteopontin(OPN) and osteocalcin(OPC) positivite reaction. In addition, administration of Bombycis Corpus decreased Reaction of activation of nuclear factor kappa B ligand(RANKL) positive reaction, increased osteoprotegerin(OPG) positive reaction, and decreased matrix metalloproteinase-3(MMP-3) and 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine(8-OHdG) positivite reaction. Taken together, Bombycis Corpus increases the activity of osteoblasts, inhibits osteoclast function, promotes osteoblast function, inhibits bone tissue degradation, and inhibits bone loss due to oxidative stress. It was observed that Bombycis Corpus reduced bone loss and increased bone density caused by aging to improve male osteoporosis. Therefore, Bombycis Corpus may be used as a preventive and therapeutic agent for male osteoporosis.
Seed protein and oil content is important trait in the soybean. Both seed protein and oil content in this plant species is inherited quantitatively. A 68-plant $F_2$ segregation population derived from a mating between Mercury and PI 467.468 was evaluated with random amplified polymorphic DNA (RAPD) markers to identify QTL related to seed protein and oil content. Marker OPB12 was found to be associated with differences in seed protein content. Four markers, OPA09b, OPM07b, OPC14, and OPN11b had highly significant effects on seed oil content. By interval mapping, the interval between marker OPK3c and OPQ1b on linkage group 13 contained a QTL that explained 25.7% variation for seed oil content.
Rubus coreantim (Rosaceae), which has been used in oriental traditional medicine as the remedies for impotence, pollution and premature ejaculation, bet-wetting and frequ ency of urination. is a fruit drug cultivating throughout southern Korea. The leaves of Rubus coreanum were extracted with 80% acetone. The extracts were separated by Ambellite XAD-2, Sephadex LH-20. MCI-gel CHP 20P and Cosmosil 75 C$_{18}$ OPN. And three flavonoids were isolated. The structures of these compounds were elucidated as quercetin-3-O-${\beta}$-D-glueuronopyranoside(l). quercetin-3-O-${\beta}$-D-glueuronopyranosyl methyl ester(2), quercetin-3-O-${\beta}$-D-xylopyranosyl-(2${\rightarrow}$1)-${\beta}$-glucopyranoside(3) on the basis of physicochemical and spectroscopic evidences.
Hydroxyapatite [Ca10(PO4)6(OH)2, HAp] and titanium(Ti) metal are known to be excellent materials with high affinities for natural bone through the apatite. Tricalcium phosphate [Ca3(PO4)2, TCP] is a promising alternative material because it is similar to HAp in its physical properties and biocompatibility. To examine the influence of hydroxyapatite, tricalcium phosphate, pure titanium and pre-treated titanium on osteopontin expression in osteoblasts, RNA was extracted from proliferated and cultured osteoblast cells and OPN mRNA expression was observed by RT-PCR.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2020.08a
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pp.90-90
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2020
Panax ginseng C.A. Meyer (P. ginseng) is known to exert a wide range of pharmacological effects both in vitro and in vivo. Although studies on ginsenoside, antioxidant activity, and anticancer effect of wild simulated ginseng (WSG) have been conducted, there is little research on the effect of WSG on bone metabolism. In this study, we investigated the potential anti-osteoporotic properties of WSG on the growth and differentiation of MC3T3-E1 cells. WSG significantly increased the viability and proliferation of MC3T3-E1 cells. WSG activated intracellular alkaline phosphatase (ALP) activity in MC3T3-E1 cells. In addition, WSG increased the mineralized nodules in MC3T3-E1 cells. Furthermore, WSG increased the expression of genes such as Runx2, ALP, OPN and OCN associated with osteoblast growth and differentiation in a dose-dependent manner.
Seo, Hyun-Ju;Eo, Hyun Ji;Kim, Hyun Jun;Jeon, Kwon Seok;Park, Gwang Hun;Hong, Se Chul;Jeong, Jin Boo
Korean Journal of Plant Resources
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v.33
no.4
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pp.227-236
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2020
Panax ginseng C.A. Meyer (P. ginseng) is known to exert a wide range of pharmacological effects both in vitro and in vivo. Although studies on ginsenoside, antioxidant activity, and anticancer effect of the cultivated wild Panax ginseng (CWP) have been conducted, there is little research on the effect of CWP extract on bone metabolism. In this study, we investigated the potential anti-osteoporotic properties of CWP on the growth and differentiation of MC3T3-E1 cells. CWP significantly increased the viability and proliferation of MC3T3-E1 cells. CWP activated intracellular alkaline phosphatase (ALP) activity in MC3T3-E1 cells. In addition, CWP increased the mineralized nodules in MC3T3-E1 cells. Furthermore, CWP increased the expression of genes such as Runx2, ALP, OPN and OCN associated with osteoblast growth and differentiation in a dose-dependent manner.
Oh, Youn-Lee;Jang, Kab-Yeul;Kong, Won-Sik;Shin, Pyung-Gyun;Kim, Eun-Sun;Oh, Min ji;Choi, In-Geol
Journal of Mushroom
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v.13
no.3
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pp.243-249
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2015
Agaricus bitorquis is an edible white mushroom of the genus that is cultivated at high temperature($25{\pm}1^{\circ}C$) unlike A. bisporus is cultivate at $16{\pm}2^{\circ}C$. Unlike Agaricus bisporus, an edible white A. bitorquis mushroom is cultivated at high temperature ($25{\pm}1^{\circ}C$). Most farmers cultivate this mushroom for a long cultivation period in Korea. For this reason, we made heterokayons to develop a new cultivar that generate fruitbodies for short cultivation period. Over one hundred SSIs(single spores isolates) were collected from selected A. bitorquis ASI1151 and ASI1349 strains. Seventy-three SSIs were germinated on CDA(compost dextrose agar) media after 20 days (minimum) or 83 days (maximum) incubation under different media condition. The mycelial growth rate of germinated SSIs was different. 9 homokaryons in ASI 1151 and 11 homokaryons in ASI 1349 from SSIs were selected by OPN-02 primer in RAPD analaysis. Also this primer was used to select heterokaryon that cross among each homokaryon with compatible locus. Therefore 44 compatible matings were confirmed of 99 crossed lines.
Lysyl oxidase (LOX), extracellular matrix enzyme, is catalyzing lysine-derived crosslinks in collagen and elastin. Recently, several LOX-like proteins (LOXL, LOXL2, LOXL3 and LOXL4) have been identified in human but their specific functions are still largely unknown. The purpose of this study was to evaluate the function of the LOX family genes during odontoblastic differentiation of human dental pulp (HDP) cells induced with odontogenic supplement (OS). The messenger RNA (mRNA) expression of LOX family genes and differentiation markers was assessed by reverse transcriptase polymerase chain reaction analysis (RT-PCR). The formation of mineralization nodules was evaluated by alrizarin red S staining. Amine oxidase activity of HDP cells was measured by peroxidase-coupled fluormetric assay. The expressions of differentiation markers, such as alkaline phosphatase (ALP), osteopontin (OPN), osteocalcin (OCN), dentin matrix protein1 (DMP1), dentin sialophosphoprotein (DSPP) in HDP cells were increased after treatment with OS media. The LOX and LOXL mRNA expression were gradually increased in OS media, whereas LOX enzyme activities were markedly detected on day 7. The mRNA expression and LOX enzyme activity of collagen type I was very similar to the pattern of LOX gene. In this study, the expression of LOX and its isoforms, and activity of LOX were highly regulated during odontoblastic differentiation. Thus, these results suggest that LOX plays a key role in odontoblastic differentiation of HDP cells.
Although it has been reported that lysyl oxidase (LOX) is involved in odontoblastic differentiation, the role of LOX on odontoblastic differentiation by hydrogen peroxide ($H_2O_2$) have not been clarified. In the present study, we investigated whether $H_2O_2$, reactive oxygen species (ROS), is modulated the messenger RNA (mRNA) expression and activity of LOX during odontoblastic differentiation of human dental pulp (HDP) cells. The mRNA expression was quantified by reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis, and LOX enzyme activity was measured by high sensitive fluorescent assay. Expression of the odontoblastic differentiation marker genes were assessed in the presence and absence of specific small interfering RNAs (siRNAs) of the LOX and LOXL. The $H_2O_2$-induced mRNA expression of LOX family was significant reduction of LOX, LOXL, and LOXL3 mRNA levels in HDP cells. LOX enzyme activity was increased at $H_2O_2$ 0.3 mM for 24 hours. The mRNA expression of alkaline phosphatase (ALP), osteopontin (OPN), and osteocalcin (OCN) was inhibited by LOX- and LOXL-specific siRNAs whereas the mRNA expression of dentin matrix protein1 (DMP1), and dentin sialophosphoprotein (DSPP) was inhibited by LOX-specific siRNA. In LOX enzyme activity, siRNA-induced knockdown of both LOX and LOXL inhibited the total amine oxidase activity in HDP cells, as in the case of mRNA expression. In conclusion, the essential role of $H_2O_2$ on odontoblastic differentiation suggests that its regulation by LOX may have pharmacologic importance in HDP cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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