우리나라 연안해역의 해수나 어패류에서 V. cholerae non-O1의 분포를 밝힘과 동시에 1996년 4월부터 동년 11월까지 분리된 환경분리주와 1984년부터 1996년까지 서울 및 부산소재 각 대학병원에서 환자로부터 분리된 총 55균주를 대상으로 생화학적 특성과 혈청형을 분석하였다. V. cholerae non-O1은 한국의 연안에서 206거체중 21검체(10%)에서 분리되었으나 V. cholerae O1 및 O139는 검출되지 않았다. 지역별로는 군산에서 16%로 검출률이 제일 높았다. 환경이나 환자에서 분리된 V. cholerae non-O1 55 균주에 대한 혈청형 분석결과 15종류의 혈청형이 검출되었는데 환경분리주 12종류, 환자분리주에서는 6종류이였다. 그런데 환경분리주에서는 O14가 68.3%(28/41)이였고, 환자분리주에서는 O8이 약 36%(5/14)로 많았고 그다음으로 O2와 O10등의 순이었다. 그리고 O2, O10와 O39는 환경 및 환자분리주에서 동시에 검출되었다.
The Salmonella rfb gene encoding for the biosynthesis of the oligosaccharide-repeating units of the O-antigenic determinants was cloned and sequenced. A set of nucleotide primers(a forward and reverse) was selected to target a defined region of the guanosine diphospho-mannose(GDP-Man) pyrophosphorylase synthase gene : rfbM of Salmonella C serogroup. The primer set was used to develop a PCR-based rapid and specific detection system for Salmonella C1 serogroup. Amplification bands of predicted size(1,422bp) were generated from 11 different Salmonella C1 isolates. The bands were verified to be specific for the C1 serogroup by Southern blot analysis using reference homologous DNA specificity was further confirmed by the lack of reactivity with heterologous DNA derived from non-salmonella members of the family enterobacteriaeceae. A specificity of 100% was deduced along with a very high sensitivity shown by a detection limit of 1fg of a purified DNA template. The isolated DNA sequence was found to be 99.8% homologous to S montevideo but the related primers amplified with the predicted band sizes with all the Salmonella C1 serogroups tested. It is concluded that the PCR protocol based on the rfbM gene from S cholerasuis is optimal fast and specific for the detection of Salmonella C1 serogroup and also the corresponding probe is suitable for rapid detection of all Salmonella C1 serogroup DNA tested. This technology should facilitate the identification of contaminated pig products and for any other products contaminated with the Salmonalla C1 serogroup. The immediate impact of this developed method will be in the area of food safety of pig products with the potential prospect for adaptation to other food inspection technologies.
Diarrhea is a major public health concern associated with pathogenic Escherichia coli infections. Food-borne pathogenic E. coli can lead to large diarrheal outbreaks and hence, there is a need to estimate the frequency of pathogenic E. coli load in the various types of meat available in markets. In the present study, we classified and characterized diarrheagenic E. coli isolates collected from 399 raw meat samples from retail sources in Korea. Shiga toxin-producing E. coli (STEC) were detected in 11 (9.7%) samples, including nine strains (8.0%) in beef and two strains (1.8%) in chicken. The frequency of the detected virulence markers were as follows: astA, 28.3%; escV,18.6%; eaeA,17.7%; ent, 7.0%; EHEC-hly, 4.4%; stx1, 3.5%; and stx2, 3.5%. We did not observe any typical EPEC, EIEC, or ETEC virulence determinants in any of the samples. The STEC serotype O26 was detected in one sample, but no other serogroups (O91, O103, O128, O157, O145, O111, and O121) were found. Further research is needed to better understand the virulence mechanism of STEC serotypes, their ecology, and prevalence in animals, food, and the environment. These results will help improve risk assessment and predict the sources of food poisoning outbreaks.
This study was conducted to investigate O group serotyping, antimicrobial drug resistance and distribution of extended spectrum ${\beta}$-lactamase of 203 Escherichia coli(E. coli) isolated from poultry in Korea during the period from April in 2003 to December 2005. The serogroup of 69.4% of isolates was determinated ; O 78(32.5%), O88(7.9%). O15(6.9%) and O141(6.4%) were the most common. These E. coli isolates showed resistance to nalidixic acid(92.6%), streptomycin(81.8%), ampicillin(77.3%), ciprofloxacin(70.9%), sulfisoxazole(66.5%) and trimethoprim(58.1%), respectively. The bla CTX$_{-M-3\;like}$(2 strains) and bla$\;_{CMY-2}$(2 strains) genes producing extended spectrum ${\beta}$ - lactamase(ESBL) were detected in four wild strains resistant to the third generation cephalosporin, respectively. The presence of the ESBL genes was confirmed in all transconjugants by PCR analysis with primers encoding CTX-M-3 like types or CMY-2.
The present study conducted to evaluate the isolation frequency of Salmonella sap., Escherichia O157:H7 and Listeria monocytogenes in fecal samples collected form 33 dairy cow feedlots in West Gyeong-nam province from tan. 179\ulcorner to Feb. 1999. Salmonella spp. were isolated from 8.7% of fecal samples and 57.5% of dairy cow feedlots participaiting in this study had at least one positive fecal 7ample. The isolation rates of Salmonella spp. in each herd size were 42.9% in ln less than 125 heads, 63.6% in 25% to 50 heads and 75% in more than 50 heads. Of the positive sample, the most common serogroup recovered was Bl(31.5%), followed by C1 and D(22.9%), C2(16.2%), A(4.2%) and E(2.1%), in order. However, E. coli O157:H7 and Listeria monocytogenes were net detected in the fecal samples collected from all feedlots.
Uropathogenic Escherichia coli (UPEC) is main causative agent of urinary tract infections. They are classified based on various types of O antigen. UPEC strains commonly possess many genes encoding virulece-associated factors. E. coli strains are generally divided into four main phylogenetic groups. The virulence factor (VF) profiles of UPEC are related with their O-serogroups in each strains. A total of 681 strains of UPEC clinical isolates were collected from Korean healthcare facility (1989: 123 strains and 2010-2014: 558 strains). The UPEC clinical isolates were analyzed by polymerase chain reaction (PCR) methods. A total of 14 O-serotypes (O1, O2, O4, O6, O7, O8, O15, O16, O18, O21, O22, O25, O75 and O83), 6 virulence factors (papC, fimG/H, sfaD/E, hly1, cnf1 and usp) and phylogenetic groups were identified. The most prevalent O-serogroups were O6 (11.1%) in 1989 UPEC strains and O25 (21.0%) in 2010-2014 UPEC strains. The identified VFs, phylogenetic groups in 1989 UPEC strains and 2010-2014 UPEC strains were fimG/H and B2 group. In this study, O6 serotype was revealed the close relationships with VFs. Also, the distribution of prevalence O-serogroups of UPEC has been changed from O6 to O25 and virulence of UPEC strains was increased during past twenty-one years.
Background: Escherichia coli, which causes subclinical or clinical mastitis in cattle, is responsible for transmitting antimicrobial resistance via human consumption of raw milk or raw milk products. Objectives: The objective of this study was to investigate the molecular characteristics of 183 E. coli from bulk tank milk of five different dairy factories in Korea. Methods: The molecular characteristics of E. coli such as serogroup, virulence, antimicrobial resistance, and integron genes were detected using polymerase chain reaction and antimicrobial susceptibility were tested using the disk diffusion test. Results: In the distribution of phylogenetic groups, group D was the most prevalent (59.6%) and followed by group B1 (25.1%). The most predominant serogroup was O173 (15.3%), and a total of 46 different serotypes were detected. The virulence gene found most often was fimH (73.2%), and stx1, fimH, incC, fyuA, and iutA genes were significantly higher in isolates of phylogenetic group B1 compared to phylogenetic groups A, B2, and D (p < 0.05). Among 64 E. coli isolates that showed resistance to at least one antimicrobial, the highest resistance rate was observed for tetracyclines (37.5%). All 18 integron-positive E. coli carried the integron class I (int1) gene, and three different gene cassette arrangements, dfrA12+aadA2 (2 isolates), aac(6')-Ib3+aac(6')-Ib-cr+aadA4 (2 isolates), and dfrA17+aadA5 (1 isolate) were detected. Conclusions: These data suggest that the E. coli from bulk tank milk can be an indicator for dissemination of antimicrobial resistance and virulence factors via cross-contamination.
다양한 환경에서 분리된 시가독소 생산성 대장균(Shiga toxin-producing E. coli, STEC, n=18)을 초산혼합용액(AAS;400 mM, pH 3.2, $30^{\circ}C$)에 노출한 후 산 저항성을 측정하였다. 또한, 선정된 4종류의 non-O157:H7 STEC균을 사과주스, 파인애플주스, 오렌지주스, 딸기주스(pH 3.8)에 정봉하여 $4^{\circ}C$와 $20^{\circ}C$에서 24시간 산 적응시킨 후 위합성용액(SGF, pH 1.5)에서 2시간 동안 생존능력을 평가하였다. Non-O157:H7 STEC를 AAS에 노출했을 때 O111 혈청형의 STEC는 평균 0.12 log CFU/mL 감소하여 다른 혈청형에 비하여 가장 강한 산 저항성을 나타냈고 O157:H7 STEC와 유의적 차이가 없었으며(P>0.05), O26 혈청형의 STEC는 가장 민감한 것으로 나타났다. 반면, AAS에 glutamic acid를 첨가하였을 경우 모든 STEC는 혈청형과 관계없이 초산에 매우 강한 저항성을 나타내었다(P>0.05). SGF에서 생존능력을 측정한 결과, 06E0218(O157:H7)은 다른 non-O157:H7 STEC 균들보다 생존능력이 낮았고 03-4669(O145:NM)가 가장 강한 생존능력을 나타내었다. 한편, 과일주스 중에서는 파인애플주스에 산 적응된 STEC가 SGF에 가장 강한 생존능력을 나타내었다. $4^{\circ}C$의 과일주스에 STEC를 산 적응시켰을 경우 $20^{\circ}C$보다 SGF에 대한 생존능력이 현저하게 높았다(P<0.05). 따라서 과일주스에 의한 non-O157:H7 STEC의 산 적응력 증가는 위장관 내 생존율 및 식중독 발생을 높일 수 있으므로 이에 대한 적절한 연구와 안전관리 옵션을 제공할 필요가 있을 것으로 판단된다.
Kim, Eun Jin;Yu, Hyun Jin;Nair, G. Balakrish;Kim, Dong Wook
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제26권12호
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pp.2199-2205
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2016
Vibrio cholerae O1 serogroup Wave 3 El Tor strains are presently prevalent worldwide. The Wave 3 El Tor strains contain a TLC:RS1:CTX array on chromosome 1, and no element is integrated on chromosome 2. A multiplex PCR optimized to identify the TLC:RS1:CTX array of Wave 3 strains has been developed in this study. By using eight primers, the multiplex PCR can identify the characteristic CTX and RS1 array of Wave 3 strains from various arrays of strains belonging to other Waves. The four amplified DNA fragments of Wave 3 strains have been cloned in a vector, which could be used as a positive control for the multiplex PCR. This multiplex PCR and the positive control set could be useful tools for rapid recognition of Wave 3 El Tor strains.
Kim, Eun Jin;Lee, Dokyung;Moon, Se Hoon;Lee, Chan Hee;Kim, Dong Wook
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제24권6호
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pp.725-731
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2014
The classical biotype strains of the Vibrio cholerae O1 serogroup harbor the biotype-specific cholera-toxin encoding phage (CTX) $CTX^{cla}$, and the El Tor biotype strains contain CTX-1. Although the classical biotype strains have become extinct, a remnant of classical CTX phage is transferred to the El Tor biotype strains. The prototype El Tor strains, which produce the biotype-specific cholera toxin, are now being replaced by atypical El Tor variant strains producing classical biotype cholera toxin. The genome sequences of the CTX phages in atypical El Tor strains indicate that the CTX phages in atypical El Tor strains are a mosaic of $CTX^{cla}$ and CTX-1. Before the emergence of atypical El Tor stains in the early 1990s, unusual pre-seventh pandemic strains were isolated in the US Gulf Coast between 1973 and 1986. These strains have characteristics of atypical El Tor strains since they are El Tor biotype strains containing $CTX^{cla}$, yet the genome sequence of this CTX phage indicates that it is different from $CTX^{cla}$ and is therefore classified separately as $CTX^{US\;Gulf}$.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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