Objective: In this study, the antioxidant activity of Ojayeonjong-hwan extracts was compared, and the following results were obtained. Methods: For hydrothermal and ethanol extracts, DPPH free radical and ABTS cationic radical erasing activity and reducing power using the FRAP method were compared, and the association between the antioxidant power of each extract and total phenol content was investigated. Significant results were obtained through in vitro apoptosis analysis through FFITC staining, mitochondrial membrane potential analysis, and ROS level measurement using C2C12 myoblastoma. Results: 1. In a comparison of DPPH free radical and ABTS cationic radical scavenging activity, water, and 70% ethanol extracts of Ojayeonjong-hwan (WEO and EEO) showed superior radical scavenging ability. 2. In the results of reducing power using the FRAP method, WEO and EEO showed antioxidant activity, which was shown to be dependent on the total phenol content contained in the extracts. 3. In comparison to the protective effect against H2O2-induced oxidative stress in C2C12 myoblasts, water extracts had no significant effect, but 70% ethanol extracts inhibited H2O2-mediated cytotoxicity in a concentration-dependent manner. 4. The cytotoxic protective effect of EEO against oxidative stress in C2C12 myoblasts was correlated with its inhibitory effects on H2O2-induced apoptosis and cell-cycle arrest. 5. In H2O2-treated C2C12 myoblasts, the apoptosis inhibitory effects of EEO were associated with the suppression of mitochondrial dysfunction and DNA damage. 6. The protective effects of EEO against H2O2-induced oxidative stress in C2C12 myoblasts were directly related to the inhibition of ROS generation. Conclusions: Ojayeonjong-hwan extracts all have protective potential against oxidative stress.
Spermidine은 spermine의 전구체로 역할을 하는 putrescine로부터 합성되는 polycation의 한 형태이다. 최근에 spermidine는 수명연장에 중요한 역할을 하는 하나의 polyamine으로 알려져 있다. Hydroxyl radical, superoxide 및 hydrogen peroxide와 같은 활성산소(ROS)는 노화뿐만 아니라 다양한 병원성 과정에서 관여한다고 보고되고 있다. DPPH radical, $H_2O_2$ 및 hydroxyl radical에 대한 spermidine의 소거활성과 산화적 스트레스와 관련된 DNA oxidation에 대한 보호 효과가 in-vitro에서 평가되었다. Spermidine은 500 ${\mu}M$ 이상에서 DPPH radical와 $H_2O_2$에 대한 소거 효과를 보여주었다. 특히 활성산소종 중에서 spermidine는 hydroxyl radical에 대한 효과가 탁월하였다. 뿐만 아니라, spermidine는 500 ${\mu}M$에서 DNA oxidation에 대해서도 뚜렷한 보호 효과를 나타내었다. 더욱이 사람피부섬유아세포에서 superoxide dismutase와 같은 항산화 관련 단백질의 발현이 대조군과 비교시 spermidine 존재 하에 증가하였다. 이상의 결과로부터 spermidine은 암, 노화 및 염증을 포함하는 활성산소와 관련 있는 질병들을 예방하기 위한 항산화제로 이용될 수 있을 것이다.
본 연구에서는 1.1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), hydroxyl radical ($^{\cdot}OH$), 그리고 superoxide radical ($O_2{^-}$) 소거능 실험을 통해 쑥부쟁이의 항산화 효과를 평가하였다. 쑥부쟁이는 에탄올로 추출한 뒤, n-hexane, methylene chloride ($CH_2Cl_2$), ethylacetate (EtOAc), 그리고 n-butanol (n-BuOH)로 분획하였다. DPPH 라디칼 소거능 실험에서 모든 추출 및 분획물이 $10-100{\mu}g/mL$의 농도에서 농도 의존적으로 라디칼 소거능이 증가하였으며, 특히 EtOAc 분획물은 가장 강한 DPPH 라디칼 소거능을 나타내었다. 또한 쑥부쟁이는 $50{\mu}g/mL$ 농도에서 80% 이상의 $^{\cdot}OH$ 라디칼 소거율을 보였다. 특히 EtOAc 분획물은 $0.03{\mu}g/mL$에서 IC50 값을 나타내어 추출물과 분획물 중 가장 강한 $^{\cdot}OH$ 라디칼 소거능을 보여주었다. 또한, EtOAc 분획물은 $O_2{^-}$ 라디칼 소거능에서도 가장 강한 소거활성을 보였다. 이러한 결과는 쑥부쟁이가 산화스트레스로 인한 질병을 예방하는 천연 항산화제로서의 활용 가능성이 있음을 보여준다.
본 연구는 동백나무(Camellia japonica L.) 유박 추출물 및 분획물의 in vitro 항산화 활성에 대해 조사하였다. 동백나무 유박은 에탄올을 사용하여 추출하였으며, 이 후 부탄올(BuOH), 에틸아세테이트(EtOAc), 클로로포름 및 헥산을 이용하여 분획물을 조제하였다. 동백 유박 추출물 및 분획물의 항산화 활성을 평가하기 위해 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), 2,2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS+), hydroxyl radical, superoxide anion (O2-) radical 소거능을 측정하였다. 동백 유박 추출물 및 분획물은 농도의존적으로 DPPH, ABTS+ 및 O2- radical 소거능을 증가시켜 항산화 활성을 나타내었다. 특히 동백 유박 BuOH 분획물은 다른 추출물 및 분획물에 비해 가장 높은 radical 소거능을 나타내었다. 동백 유박 BuOH 분획물의 총 폴리페놀 및 플라보노이드 함량은 각각 23.26 mg GAE/g 및 32.39 mg QE/g이었으며, 이는 다른 추출물 및 분획물보다 높은 수치임을 알 수 있었다. 동백 유박 BuOH 분획물 및 EtOAc 분획물의 cameliaside B 함량은 각각 102.37, 165.05 ㎍/g임을 확인하여 다른 추출물 및 분획물에 비해 높은 수치를 나타냄을 알 수 있었다. 따라서 동백 유박 추출 및 분획물 중에서 BuOH 분획물 및 EtOA c 분획물은 다른 추출 및 분획물에 비해 radical 소거능이 우수할 뿐 아니라 항산화 물질 함유량이 높아, 항산화 기능성 소재로 활용될 수 있을 것으로 사료된다.
Kim, Ji Hyun;Kim, Hyun Young;Lee, Sanghyun;Cho, Eun Ju
농업과학연구
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제45권4호
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pp.761-767
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2018
Degenerative diseases are commonly associated with excess free radicals. Acer okamotoanum, a plant endemic to Korea, is reported to have anti-oxidant, anti-cancer, and anti-viral activities. We previously isolated flavonoids from the ethyl acetate fraction of A. okamotoanum such as quercitrin (QU), isoquercitrin (IQ), and afzelin (AF). In the present study, the in vitro antioxidant activity of flavonoids such as QU, IQ, and AF isolated from the ethyl acetate fraction of A. okamotoanum were investigated by measuring the free radical scavenging activity including 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), hydroxyl radical ($^{\cdot}OH$), and superoxide anion ($O_2{^-}$). The flavonoids (QU, IQ, and AF) concentration-dependently showed a DPPH radical scavenging activity. In particular, QU and IQ showed a higher DPPH radical scavenging activity than that of AF. In addition, the flavonoids (QU, IQ, and AF) at $10{\mu}g/mL$ showed over an 80% scavenging effect against $^{\cdot}OH$ radical production. Furthermore, the $O_2{^-}$ radical scavenging activity of the flavonoids, QU, IQ, and AF increased in a dose-dependent manner. Particularly, IQ exerted the strongest scavenging activities against $^{\cdot}OH$ and $O_2{^-}$ radicals among the other flavonoids. These results indicate that the flavonoids from A. okamotoanum, in particular IQ, would have a protective activity against oxidative stress induced by free radicals, and potentially be considered as a natural antioxidant agent.
생체는 산소를 소비하는 대사 과정 중에 초산화물(superoxide, $O_{2}$), 과산화수소($H_2O_2$), 수산 라디칼(OH)과 같은 다양한 활성산소(reactive oxygen)들을 생성하게 되며, 그 중에서도 hydrogen peroxide ($H_2O_2$)는 biological membrane을 자유롭게 통과하며, 세포내에서 hydroxyl radical 등의 반응성이 큰 활성 산소종(reactive oxygen species, ROS)을 발생시키는 작용을 하는 강력한 산화제이다. 세포를 계대 배양 (5, 15, 25, 35 passage)하여 $H_2O_2$를 농도별(100 ${\mu}M$, 500 ${\mu}M$, 1 mM, 5 mM)로 처리하고, 또한 $H_2O_2$의 처리 시간(30 분, 1 시간)을 변화시킴으로써, Hepatoma 세포주에서 $H_2O_2$ 처리에 의한 Cu/Zn SOD의 발현을 Northern blot을 통하여 다음과 같이 분석하였다. 1)Hepatoma 세포주에서 시간별, 농도별로 산화제를 처리 했을 때 각각의 경우에서 발현양의 차이는 적었지만, 오랜 시간동안 고농도의 산화제에 노출시켰을 때 항산화 능력이 증가한다는 것을 확인할 수 있었다. 2)계대배양을 증가시키는 것은 노화가 진행된다는 것을 의미하므로, 산화제를 처리했을 때 25 passage에서 35 passage 단계에서 항산화 효소의 발현 정도가 급격히 감소되는 것으로 미루어 보아 이 단계에서 노화가 진행되었음을 추측할 수 있었다. 3)동일한 시간과 농도로 처리했을 때 각각의 passage의 발현 level에서 보이는 양상과는 다르게 35 passage에서는 500${\mu}M$이상의 농도를 1 시간동안 노출시켰을 경우에 Cu/Zn SOD가 거의 발현되지 않았으며, 30 분 동안 노출시켰을 때에는 500 ${\mu}M$의 농도까지 방어할 수 있는 능력을 가진 것으로 보인다.
The six phenolic compounds isolated from the root of Dipsacus asper, 3,4-di-O-caffeoylquinic acid (1), methyl 3,4-di-O-caffeoyl quinate (2), 3,5-di-O-caffeoylquinic acid (3), methyl 3,5-di-O-caffeoyl quinate (4), 4-5-di-O-caffeoylquinic acid (5), methyl 4,5-di-O-caffeoyl quinate (6) were continuously evaluated for their antioxidant activity using superoxide radical scavenging and AAPH-mediated (LDL) oxidation assay. The results demonstrated that compounds 1 - 6 had remarkable antioxidant activities with the $IC_50$ values ranging from 12.0 to $2.8{\mu}M$ in superoxide radical scavenging. They also inhibited AAPH-mediated low-density lipoprotein LDL oxidation by the generation of thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) with $IC_50$ ranging from 6.7 to $8.7{\mu}M$.
Photoinduced electron-transfer process of 1,8-naphthalimide-linker-trimethylsilane (NI-O3-TMS, O3 = 3,6,9-trioxaundecyl) and NI-O3 has been investigated using the transient absorption measurements in $CH_3CN$ and $CH_3CN/H_2O$. The excitation of NI-O3-TMS in $CH_3CN$ produced the NI radical anion ($NI^{{\cdot}-}$) with a transient absorption band around 413 nm, via the intermolecular electron-transfer between NI moieties in the excited singlet state. In contrast, in a protic polar solvent mixture of $CH_3CN/H_2O$, a proton abstraction process occurred from $NI^{{\cdot}-}$ to generate the NI ketyl radical ($NIH^{\cdot}$), which showed a transient absorption band around 405 nm. The decay time constants of $NIH^{\cdot}$ were quite long compared to those of $NI^{{\cdot}-}$ in $CH_3CN$.
Rao, Thalapaneni Nageswara;Kumarappan, Chidambaram;Lakshmi, Sabapathi Mohana;Mandal, Subhash C
Advances in Traditional Medicine
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제8권4호
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pp.329-338
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2008
The aim of the study is to investigate the antioxidant activity through, reducing power, 2, 2-diphenyl-1-picryl hydrazyl radical (DPPH), nitric oxide radical (NO), superoxide radical, hydrogen peroxide radical ($H_2O_2$) scavenging activity and the amount of total phenolic compounds of chloroform, ethyl acetate, methanol and aqueous extracts of the leaves of Talinum portulacifolium. Chloroform extract of leaves of T. portulacifolium showed highest antioxidant activity, with a direct relationship between activity and concentration of extracts ($15-240\;{\mu}g/mL$). Among all the extracts, the highest amount of the total polyphenolic compounds was found in the chloroform extract. Chloroform extract of T. portulacifolium showed an important free radical scavenging activity towards the DPPH, NO, Superoxide and $H_2O_2$ radicals, with $IC_{50}$ values of 133.26, 165.75, 156.34 and $135.29\;{\mu}g/mL$, respectively. In the lipid peroxidation assay, extracts of chloroform and ethyl acetate showed a remarkable inhibitory activity. The extracts showed significant activity in all the experiments but lower than the standard antioxidant, ascorbic acid.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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