The author isolated high cellulolytic fungi from natural sources and determined optimal condition of protoplast formation and fusion as fundamental step for improvement of the isolated it's cellulolytic ability. Three different cellulolytic fungi, such as Aspergillus sp., Penicillium sp. and Trichoderma sp., were isolated from soil. Their cellulolytic activities were compared with that of Aspergillus niger which was useful industrially and had cellulase activity. It was Aspergillus sp. that showed the highest activity of all these four fungi. And then it was followed by Penicillium sp., Trichoderma sp., and Aspergillus niger in order. An auxotrophic mutant of Aspergillus sp. was obtained by UV mutagenesis method. Having try to produce protoplast from mycelia, the author found that ${\beta}-glucuronidase$, at pH 6.0, was effective cell-wall lytic enzyme. And the optimal concentration of this enzyme was 5,000 unit/ml. Regeneration rates of wild type, met. auxotroph and arg. auxotroph, in presence of osmotic stabilizer, were 7. 0%, 7. 5% and 5.2%, respectively. PEG with M.W. 6,000 was effective stimulator for protoplast fusion in the concentration of 30% (W IV). In such a condition, we obtained 1.2% cell fusion rate.
KIM Dong-Soo;KIM Young-Myoung;KOO Jae-Geun;LEE Young-Chul;WOO Sang-Gyu
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.23
no.2
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pp.69-76
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1990
To substitute the soy-sauce 'koji' used in fish sauce processing with molded sardine meal(MSM) 'koji', the culture conditions of MSM be inoculated with Aspergillus spp. were investigated. To prepare the MSM, Asp. awamori(KFCC. 11439), Asp. guercinus (KFCC. l1595), Asp. niger(KFCC. 11239), Asp. oryzae(KFCC. 32343), and Asp. sojae(KFCC. 11559) were inoculated upon the chopped sardine with $20\%$ (w/w) corn starch after steriling it at $121^{\circ}C$ for 15min. Sporulation time cultured with Asp. spp. at $30^{\circ}C$ was 48hrs and color of mycelium on the surface of MSM inoculated with Asp. awamari and Asp. oryzae were black, that of MSM inoculated with the other strains were yellowish brown. The activity of protease and lipase from the MSM were increased till the 72hrs of culture at $30^{\circ}C$, while the content of trimethylamine was decreased after 96hrs of culture period at same condition with exception of Asp. niger. Asp. oryzae and Asp. sojae showed superior in pro-tease and lipase activity in comparison with the other strains, and maximum activity of protease and lipase of MSM was observed after 72hrs of culture period. The optimum pH and temperature for the activity of MSM inoculated with Asp. oryzae and Asp. sojae were pH 9.0, $30\~35^{\circ}C$ and pH $6\~7$, $35^{\circ}C$, respectively.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.15
no.4
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pp.40-46
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1986
The beta-galactosidase of Aspergillus niger CAD 1 described in previous report was immobilized to cellulose triacetate. The optimal conditions for immobilization of the enzyme were obtained when 13%(v/v) of the soluble enzyme (349 unit/ml) was entrapped in fiber prepared from 10%(w/v) cellulose triacetate in methylene chloride. The optimal temperature and pH for the activity of the immobilized enzyme were $45^{\circ}C$ and 4.5, respectively, which stowed the same values as those of the soluble enzyme. It was found that Km of the immobilized enzyme for lacotse exhibited high value compared with that of the soluble enzyme. The immobilized enzyme showed good storage stability, reusability, and also hydrolysis of lactose when introduced into skim milk and acidic whey.
Three fractions of carboxymethyl-cellulase (F-I, F-II, and F-III) and ${\beta}-glucosidase$ form Aspergillus niger were partially purified by ammonium sulfate fractionation. Sephadex G-150 and DEAE-Sephadex column chromatography. The optimum conditions such as pH and temperature and thermal inactivation properties of the enzymes were investigated. Arrhenius plots of F-II and F-III appeared as straight lines, whereas that of F-I was biphasic. The Z-values of F-II and F-III were $8^{\circ}C$ and $10^{\circ}C$ respectively, while that of F-I was $4^{\circ}C$ over $60{\sim}70^{\circ}C$ and $383^{\circ}C$ over $70{\sim}98^{\circ}C$. Three fractions and the crude extract of carboxymethyl-cellulase exhibited a similar optimum pH 4.3 and temperature of $60^{\circ}C$, while Z-value of crude extract $(21.5^{\circ}C)$ was much higher than that of the purified enzyme. Maximum activity of both purified and crude extract of ${\beta}-glucosidase$ was shown at pH 4.7 and $60^{\circ}C$, and z-value of the enzyme was $7^{\circ}C$.
In this study, we selected Gardeniae fructus (GF) as an anti-inflammatory functional material and improved the biological activity of GF through the treatment of ${\beta}$-glucosidase. For the simple evaluation of anti-inflammatory activity, the inhibitory activity of GF extract (GFE) on the production of NO by RAW264.7 cells in the presence of LPS was examined. ${\beta}$-glucosidase originating from Aspergillus niger or Aspergillus fumigatus has effectively improved the anti-inflammatory activity of GFE. The enzyme treatment raised the activity of GFE by more than 10 times. The optimum conditions for the enzyme reaction were at pH 4.6, $45^{\circ}C$, and 20 U/mL for 24 h with agitation. In addition, in vitro production of cytokines (IL-$1{\beta}$, IL-6, TNF-${\alpha}$), COX-2, and the NF-${\kappa}B$ activation of RAW264.7 cells decreased more in the presence of GFE treated with ${\beta}$-glucosidase originating from Aspergillus niger (GFAN) than in the presence of GFE. These results suggest that enzyme-treated GFE might be a potential candidate for natural anti-inflammatory food materials.
The effect of gamma irradiation on the microbial growth inoculated in the Korean traditional paper, Hanji, was investigated. Also, the mechanical properties of Korean traditional paper were measured to verify the possible change by gamma radiation. Bacillus cereus and Aspergillus niger were cultivated and the spores were innoculated in papers at the 250,000 and 500,000 colonies, respectively. In these results, 5log spores of B. cereus could be all inactivated at the dose of 6 kGy, and 5log A. niger be inactivated at 8 kGy, respectively. There was also showed no significant change in tensile strength, bursting strength and color index of Korean traditional paper by the gamma irradiation upto the dose of 50 kGy. These results confirmed that radiation treatment of Korean traditional paper is extremely efficient and could be used to preserve ancient books and archives documents from being damaged by moulds and fungi.
Strain BCNU 2001 was isolated from soil samples collected from Tea-baek Mountain area. The biochemical characteristics and 16S ribosomal RNA gene sequences of the isolate revealed that the strain belonged to the Pseudomonas aeruginosa. The supernatants had an antimicrobial effect on various kind of bacteria and fungi. Especially BCNU 2001 was able to greatly inhibit the growth of Micrococcus luteus, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, and Aspergillus niger, and its inhibition zone was measured as 18.5 mm against Micrococcus luteus, 19.0mm against Proteus mirabilis, 17.0mm against Proteus vulgaris, and 13.5 mm against Aspergillus niger, respectively. Hexane and dichloromethane extracts of BCNU 2001 exhibited significant activity against bacteria, and dichloromethane and ethylacetate extracts showed significant activity against fungi. Pseudomonas strain BCNU 2001 was also determined to have antimicrobial peptide against various microorganisms including Gram positive bacteria, Gram negative bacteria and fungi. The obtained results may provide preliminary support for the usefulness of Pseudomonas strain BCNU 2001.
This experiment was conducted to observe the effects of fermented feed by Aspergillus oryzae and Aspergillus niger on the improvement of feed value and the effect of fermented feed additive for meat production of broiler. The results of fermented feed on the improvement of feed value were as follows; I; The effects of fermented feed value improvement were as follaws; 1) There were little difference between fermented feeds by Asp. oryzae and Asp. niger, compared with wheat bran, crude protein contents of Koji was highly increased and its nitrogen free extract and crude fat contents were decreased, but crude fiber and ash were little difference. 2) Total amino acids were highly increased as to fermented feeds but proline in Asp. niger koji feed, and proline and valine in Asp. oryzae koji feed were decreased and other amino acid were increased 2) The effect of fermented feeds on meat production of broiler were as follows; 1) Fermented feeds groups appeared higher weight (p<0.01)than weight of control on end of experimental period, but little difference were recognized between 5% and 10% fermented feed groups. 2) On the weight gain per day, highly significant were recognized(p<0.05) between control and test groups, 10% Asp. oryzae koji group was highest ($12.15{\pm}0.46g$) between all groups. 3) On the yield of carcass, there were significant highly difference (p<0.01) between control and test groups but little difference were recognized between each of 5% groups and 10% groups of fermented feeds. 4) Fermented feed groups appeared higher carcass yield (p (0<0.05) than control. But between all fermented feed groups were a little difference in partly. 5) On the influence of fowl meat composition, amount of moisture contents was a little decrease in fermented feed groups, and crude protein and crude fat were increased. 6) Feed conversion rate resulted a little amount decreasing. Specially, 10% Asp oryzae koji group was lowest (2.89) compare with control (3.35) 3. As a result of economical analysis appeared highest low income in koji groups. Low income were more gained percent of 40.22 in 10% Asp oryzae koji and 33.19 in 10% Asp. niger koji than control.
The strains selected in the previous paper were identified according to the manual of Aspergilli by Thom and Raper, and the preparation of the crude enzymes with the strains were investigated. The fermented fodders were made with wheat bran and chaffs containing 20% wheat bran by the strains, and the feeding experiments concerned was conducted. The results obtained are as follows: 1. The selected strains were identified as below; MC-9 was a similar strain of Aspergillus niger van Tieghem, MC-10 was a similar strain of Aspergillus flavus Link, MC-53 was a similar strain of Aspergillus penicilloides Spegazzini and MC-61 was a similar strain of Aspergillus niger mut Schiemanni n. comb. 2. Percentages of crude enzymes obtained from the dried matters of the wheat bran cultures were MC-9: 2.9%, MC-10: 3.9%, MC-53: 6.4% and MC-61:2.6%. And the cellulase activity of MC-9 was the most active among the crude enzymes as the same as the filtrates of wheat bran cultures. 3. As the results of the feeding experiments, changes of body weights showed no trends to be significant as compared with the control group, and the groups of MC-9 and MC-61 showed the increasing significance with P<0.05 in egg-laying rate.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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