This study was conducted to obtain the basic information for breeding of burley(N. tabacum cv. burley) and sun-cured tobacco(N. tabacum cv. sun-cured) variety. Two burley(Burley 21, KB 108), and T.I. 1068 and three sun-cured varieties(Yeonbyeon 3, Jaheungyeon and Jaraehong) were diallel crossed and 15 combinations of F$_1$generations were made in 1998, respectively. Six parental varieties, 15 F$_1$s were grown under the complete randomized block design with 3 replications at Chonju Experiment Station, Korea Ginseng & Tobacco Research Institute in 2000. The data of 12 quantitative characters were measured for degree of heterosis. The results obtained are as follows. Heterosis of F$_1$generation was positive in weight per leaf, plant height, stem diameter, yield, leaf length and total alkaloid content. Cross combinations between either Burley 21 or KB 108 and sun-cured varieties showed comparatively high heterosis in each characters.
Leaf mesophyll protoplasts from five cultivars of tobacco (N. tabacum L.) were cultured. The protoplasts did not survive in culture medium containing Murashige and Skoog inorganic salts for over 6 days. NH4NO3 and FeSO4.Na2EDTA concentration of Murashige and Skoog medium were toxic in tobacco leaf mesophyll protoplast culture. Therefore we investigated optimum condition in Murashige and Skoog medium. High plating efficiency was obtained by reducing the concentrations of NH4NO3 and FeSO4.Na2EDTA to 1/3 and 1/10, respectively, on the supplemented with 5$\mu$M IAA, 0.5 $\mu$M 2.4-D 5 $\mu$M BAP. Plants were regenerated from protoplast-derived calluses.
Screening 실험을 통하여 결정된 주요인자인 sucrose, nitrogen, 배양온도로 인자의 최적수준을 결정하는 표면반응법중 하나인 Box-Behnken design을 수행하였다. 각 인자의 상관관계를 통하여 sucrose는 90 g/L, nitrogen은 41 mM, 온도는 $22^{\circ}C$가 최적수준으로 결정이 되었으며 확인실험을 통하여 대조구보다 세포생장이 증가하였을 뿐만 아니라 hGM-CSF의 생산도 약 2배 정도 증가되었음을 확인하였다. 이것은 고농도의 sucrose로 인해 배지내로의 hGM-CSF의 분비가 촉진되었기 때문이며 또한 저온으로 인해 분비된 hGM-CSF를 분해하는 protease 활성이 감소되었기 때문인 것으로 사료된다.
형질전환된 담배세포 배양을 이용한 hGM-CSF 생산에 있어 polyurethane foam 내 고정화법을 이용하여 연속배양의 가능성을 확인하였고 spinner flask에서의 배양에 따른 영향을 알아보았다. 16일 동안 3번의 배지교환에도 세포의 활성이 유지되어 hGM-CSF 생산량은 계속적으로 증가하였다. 온도와 교반속도를 동일하게 하였을 때 spinner flask에서의 hGM-CSF 생산량은 17.3 ${\mu}g/L$으로 100-mL flask의 9.8 ${\mu}g/L$보다 증가하였다. 따라서 최적의 배지교환 속도와 양을 결정하여 spinner flask에서 연속배양을 실시할 경우 세포 재사용이라는 경쟁력과 함께 높은 hGM-CSF 생산량이 얻어질 것으로 예상된다.
A field experiment was conducted to study the effects of fertilizer application rate and number of harvested leaves per plant on selected agronomic, chemical and physical characteristics of burley tobacco(Nicotiana tabacum L. cv Burley 21) in 1988, 1989 and 1990 at Chonju Experiment Station, Korea Ginseng SE Tobacco Research Institute. 175.0 or 227.5 kilogram per 10a of compound fertilizer(N-P2O5-K2O= 10-10-20) were applied as main plot, and 2 or 4 of upper leaves was topped off with 0, 2 or 4 of the lower leaves removed as sub plot. Yield, total alkaloid and total nitrogen content of cured leaves were high in the higher level of compound fertilizer plot, and increasing the level of compound fertilizer had an adverse effect on physical characteristics. Reducing the number of harvested leaves had a negative effect on yield regardless of whether the leaf number was reduced by lower topping or removing the bottom leaves, but increased the rate of higher grades leaves. Differences in total alkaloid, total nitrogen and some physical properties among number of harvested leaf per plant were smaller than expected.
AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism) analysis was conducted to cultivars of tobacco, Nicotiana tabacum in order to select the cultivar-specific markers. AFLP results using 12 primer sets revealed genetic diversity among 12 field grown tobacco cultivars. Polymorphic fragments amplified by PCR was purified and cloned to identify their nucleotide sequences. From the sequences of them, 40 primer sets were designed to select cultivar-specific markers. When genomic DNA isolated from tobacco were used as PCR template, a set of primers, BrSF/BrSR showed Burley-specific band patterns. The results indicate that AFLP technique used in this experiments is useful for identifying tobacco cultivars in a rapid manner.
Potato Virus Y(PVY), vein necrosis strain, in Korea causes severe symptoms on burley tobacco(Nicotiana tabacum L.). As the results, programs to incorporate PVY resistance into commercial cultivars were initiatEd. But the development of the homozygous fertile line resistant to PVY is time consumming. This study was conducted whether the Fl hybrid could be used to reduce the yield losses caused by PVY. Four F1 hybrids were made between male - sterile(ms) NC 107 and KB 107 as maternal parent, and TC 612 and TC 613 as Pollen donor, respectively, and were evaluated for their PVY resistance and negatively associated traits. (ms NC 107 X TC 612) F1, named as KB 109, Ivas applied to yield trial and compared with commercial cultivars for the level of disease resistance, agronomic characteristics, chemical contents and physical properties. All Fl hybrid could be used commercially as the PVY resistant cultivar. Especially KB 109 have the resistance against PVY, tobacco mosaic virus and black shank(Phytophthora parasitica var. nicotianae). It had wider leaves, flowered one day later, and yield of acceptable quality was higher than that of Burley 21, standard cultivar in Korea.
The effects of stalk cutting time and environmental factors such as air temperature, leaf temperature, solar radiation and leaf moisture content during harvesting and curing in burley tobacco(Nicotiana tabacum L.) on weight loss of fresh stalks and sunburning in leaves were investigated at Chonju Experiment Station, Korea Ginseng & Tobacco Research Institute in 1996 and 1997. Twelve to fifteen percent of the fresh weight was lost in 3 to 4 hours after stalk-cutting, and sunburned leaves could be observed in case of stalk cutting between 11:00 and 15:00 O'clock on a clear sunny day, when the air temperature was 34 to 35$^{\circ}C$, leaf temperature 52 to 54$^{\circ}C$, and solar radiation 700 to 940 w/$m^2$. The leaves exposed to this weather condition were sunburned within 1 hour after stalk cutting. But low temperature (below $25^{\circ}C$) with high solar radiation(above 700w/m2) or high temperature(above 3$0^{\circ}C$) with low solar radiation (below 600w$m^2$) did not induce the sunburn damage in leaves. As the leaf temperature and leaf moisture content were higher, the sunburned leaves increased. The leaves at the higher stalk position were more easily sunburned than those at the lower. This result indicates that the immature leaves with higher chlorophyll content might be more susceptible to sunburning.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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