Cotton Glutathione S-Transferase (GST: EC 2.5.1.18) was cloned and overexpressed in tobacco (Nicotiana tabacum) plants. Northern blot analysis confirmed the successful transformation of cotton gst gene in tobacco plant. Type I and Type ll transcript patterns were identified in transgenic tobacco plants and only Type I transcripts were discussed in this paper, The activity of GST in the type II transgenic plants was about 1.5-fold higher than those of the wild type and non-expresser by using 1-chloro-2,4-dinitrobenzene (CDNB) and reduced glutathione as the substrate. The expression of cotton GST in tobacco plants proved that Gh-5 could be translated into functional protein. Type II transgenic plants produced functional GST in the cells. The effects of cotton GST in the seedlings was evaluated by growing the control and transgenic seedlings at $15^{\circ}C$ in the growth chamber in the light. Overexpressors were grown well compared to the control plants (non-expressors). lo test far tolerance to salinity, seeds of Gh-5 overexpressors and the wild type Xanthi seedlings were grown at 0, 50, 100, 150, and 200 mM NaCl solution. Gh-5 transgenic seedlings showed higher growth rate over control seedlings on 50 and 100 mM NaCl solution. There was no difference in growth rate at 150 and 200mM NaCl concentration.
We studied the effect of SMP (solid matrix priming) treatment, seed pretreatment for germination enhancement, to tobacco seeds by measurement of germination rate and contents of fatty acid, energy source for tobacco germination. The results were as follows. In result of germination test, germinative ability was the highest in KF109 at nine day treatment and in KB108 at seven day treatment. The composition of fatty acid in tobacco seed confirmed by gas chromatography were palmitic acid, stearic acid, oleic acid+elaidic acid, linoleic acid+linolelaidic acid, and $\alpha-linolenic$ acid. Palmitic acid, stearic acid, oleic acid and elaidic acid, and linoleic acid and linole-laidic acid were highest in KF109 at eight or nine day treatment and in KB108 at six or seven day treatment. Especially, content of oleic acid + elaidic acid, and linoleic acid+linolelaidic acid were changed largely by treatment, so these might be used for index to examine treatment effect.
This study was carried out to acquire the basic information of root growth under different pot size, imposing different space limitation on rhizosphere. Different size of pots that had same surface area but different depth, 5cm(Iength)$\times$5cm(width)$\times$30, 15, 5cm(depth), were used during the seedling stage of tobacco plant. Space limitation on rhizosphere affected not only the aerial growth, stem height, leaf area and shoot dry weight, but also root growth and root architecture. Aerial growth was highly related to growth of underground part, so space limitation on rhizosphere decreased aerial growth. Limitation on pot volume by reducing pot depth induced new rooting on crown. Root number and relative multiplication rate were higher in small pot that had 5cm depth than large pot, but total root length and mean extension rate showed reverse patterns. Root numbers of 1st order and 2nd order were increased as pot depth was increased, but the root number of 3rd order was increased in small pot. Root system of seedling grown in large pot distributed more horizontally than that in small pot at 20 days after temporary planting (DAT), but the root architecture of seedling was reversed at 25 DAT.
To find main factors to affect tobacco culture and quality, NC 2326 (Nicotiana tabacum L.) was cultivated in Korea and in the United States under different plant density, fertilization, mulching and curing. Among the chemical characteristics of the both experimental soils, the organic matters were similar concentration in both locations but effective phosphorous contents were higher in Oxford in the United States. Plant height, length and width of the largest leaf, leaf thickness, and midrib ratios were larger in Oxford than in Suwon in Korea. Also they were larger in non mulching system than in mulching system. But the total numbers of the leaves were decreased in non mulching system. The content of nicotine was higher in the plant grown in Suwon than in Oxford. The concentrations of nicotine and sugar tend to increase in mulching system comparing of non mulching system. During the growing, the concentration of non-volatile organic acids was higher in Suwon, while it was lower in cured leaf produced in Suwon. Also the contents of total fatty acids were lower in the harvested leaf grown in Suwon, but not in cured tobacco. Forty three compounds identified among the volatile oils from these experimental samples were quantified. The concentrations of the major components related to the tobacco flavour such as damascone, damascenone, solanone, nor-solanadione, and megastigmatrienones were higher in the cured tobacco produced in Oxford rather than in Suwon.
This experiment was conducted to investigate effects of NaCl concentration on photosynthetic rate, free proline content and ion content in tobacco. As NaCl concentration was increased growth was retarded. The decrease growth characteristics(shoot/root ratio was 2.0) at 90mM NaCl indicated that this concentration could be a limiting level. As NaCl concentration was increased photosynthetic rate, transpiration rate, and water use efficiency were decreased. Photosynthetic rate was highly decreased at 60mM NaCl. There was no significant difference between transpiration rate and water use efficiency. Leaf water potential was decreased as NaCl concentration was increased, in that twice lower at 30mM than that of control and drop largely at 120mM NaCl. Free proline content was increased as NaCl increased until 120mM NaCl and drop at 150mM NaCl. The $Ca^{2+}$, $Mg^{2+}$, and $K^+$ contents were increased until NaCl concentration was 120mM. The $Na^{2+}$ content was slowly increased as NaCl concentration increased until 120mM NaCl, and largely increased at 150mM NaCl. There was no significant difference between $Cl^-$ and NaCl treatments except 30 mM NaCl in which $Cl^-$ content was higher than that of control. As NaCl concentration was increased $K^+/Na^+$ ratio was decreased. The negative correlation between $K^+$ and $Na^+$, and positive correlation between $K^+/Na^+$ and protein content were found.
This study was conducted to establish the most appropriate transplanting time which can attribute to increase of aromatic substances in tobacco variety, Hyangcho, maintaining its original aroma. The highest content of total alkaloid, total nicotine and total nitrogenous compounds were observed in the late transplanting time such as July 5, showing 4.16%, 3.83% and 3.68%, respectively. However, the petroleum ether extract was highest in the early transplanted one such as April 5, showing 5.77% and total sugar content, 12% in April 20. The content of petroleum ether extract decreased as the transplanting time delayed. The early transplanting of Hyangcho on April 20 under vinyl mulching showed the increase of fatty acid content, but the decrease of non-volatile organic acids such as malic and citric acids than those of the conventional transplanting time on March 5. The earlier transplanting time also increased the content of volatile acids such as 2,3-methylbutanoic acid and 3-methyl-pentanoic acid, which seem to be related to tobacco aroma.
Changes in the amount of ribulose 1, 5-bisphosphate carboxylase/oygenase(=RuBisCO) protein, namely fraction I protein, and the protease activity were determined in the 10th leaf of tobacco(Nicotiana tabacum, var. Ky-57) from 10 days after emergence through senescence at 5 days interval. The amount of RuBisCO per deveined leaf rapidly increased during the early growing season, reached a maximal quantity at the around 20 days after leaf emergence, when the leaf has gone through its most rapid expansion, and began gradually to decrease till 30 days after leaf emergence, thereafter significantly declined to 45 days that the leaf has been dried up partly. The pattern of the ratio of RuBisCO protein to soluble protein in quantity changed similar to that of RuBisCO contents in a leaf, that was 43%, 60%, and 21% at the around 10 days, 20 days, and 45 days, respectively. And RuBisCO contents was linearly correlated with the concentration of chlorophyll(r=0.98) throughout the life span of the leaf. So, it was assumed that the leaf color can be a useful indicator for judging whether RuBisCO contents higher or not in tobacco leaves without homogenization. On the other hand, the protease activities for degradation of casein were assayed at pH 5.5. 7.0. and 8.5 with crude extracts desalted on Sephadex G-25. The highest caseolytic activity was found at pH 5.5 throughout the life sawn of the leaf. Also, the activity at 5.5 became gradually to increase from 30 days after leaf emergence, when RuBisCO protein had became to disappear and remarkably increased in the last stage of senescence, although nitrogen contents of the leaf had reached low levels. The caseolytic activity at pH 5.5 was in negative correlation with RuBisCO contents throughout the life span of the leaf, but not in lineality between them. In other words, the caseolytic activity increased in a rapid exponential manner when RuBisCO contents had reached some low levels. These results showed that the leaf age, namely harvesting time, is a very important factor for the production of the tobacco leaf containing higher RuBisCO protein. It was concluded that the practical harvesting time is between 20 days and 30 days after the leaf emergence from the present results.
Kim, Yun-Hee;Kwon, Suk-Yoon;Bang, Jae-Wook;Kwak, Sang-Soo
Journal of Plant Biotechnology
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v.30
no.4
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pp.399-403
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2003
In order to understand the protection effects of antioxidant enzymes against oxidative stress caused by various environmental stresses, transgenic tobacco (Nicotiana tabacum cv, Xanthi) plants expressing both copper/zinc superoxide dismutase (CuZnSOD) and ascorbate peroxidase (APX) in chloroplasts (referred to as CA plants) were subjected to highlight (1,100$\mu$mol m$^{-2}$ sec$^{-1}$) and chilling at 4$^{\circ}C$. The protection effects of CA plants using leaf discs were compared with those of transgenic plants expressing either CuZnSOD or APX in chloroplasts (SOD plants or APX plants, respectively) and non-transgenic (NT) plants. CA plants showed about 15% protection in the photosynthetic efficiency (Fv/Fm) of photosystem II relative to NT plants 1 hr after treatment of both highlight and chilling, whereas they showed about 23% protection in the redox state of P700 in photosystem I at 3 hr after treatment. SOD plants or APX plants showed an intermediate protection effect between CA plants and NT plants. These results demonstrated that the coexpression of CuZnSOD and APX in chloroplasts importantly involves in the protection effects against oxidative stress caused by various environmental stresses.
The transgenic tobacco (Nicotiana tabacum cv. Xanthi) plants containing Bacillus subtilis protoporphyrinogen oxidase gene with cauliflower mosaic virus 35S promoter have recently been generated by using Agrobacterium-mediated gene transformation. The nontransgenic and the transgenic tobacco plants were compared with respect to responses to diphenyl ether herbicide oxyfluorfen and under various environmental conditions. Both cellular leakage and lipid peroxidation caused by oxyfluorfen were found to be less in the transgenic than in the nontransgenic plants. Growth responses of the transgenic plants under various temperature, light, and water conditions were almost the same as those of the nontransgenic plants, although the transgenic plants exhibited slightly more retarded growth under low light or saturated water condition. These results revealed that the transgenic tobacco plants containing B. subtilis protoporphyrinogen oxidase gene under cauliflower mosaic virus 35S promoter were relatively resistant to oxyfluorfen and exhibited normal growth pattern. Possible mechanism of resistance to oxyfluorfen in the transgenic plants is also discussed.
Lee, B.H.;Won, S.H.;Lee, H.S.;Kim, K.Y.;Kim, M.H.;Eun, S.J.;Jo, J.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.19
no.3
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pp.281-290
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1999
The bacterial isopentenyl transferase (ipt) gene involved in cytokinin biosynthesis was fused with 35S promoter of cauliflower mosaic virus (CaMV) and introduced into tobacco plants (Nicotiana tabacum L. cv. Samsun) via Agrobacterium-mediated transformation. As expected, ipt gene was constitutively expressed in all tissues of transgenic plants. Several primary transgenic plants were obtained that expressed different level of transcripts for ipt gene. Three of transgenic plants with different expression level of ipt gene were selected and selfed to obtain homozygous line for further analysis. A number of interesting phenotypic changes such as viviparous leaves, delayed senescence, larger axillary shoots, an abundance of tiny shoots at the apex and a release of lateral buds, were observed in transgenic plants. Chlorophyll content was 1.5- t.o 4-fold higher in transgenic plants as compared with non-transformed plants. These results indicate that the cytokinin synthesized in transgenic plants could improve forage crop yield by delay of leaf senescence and increase of leaf number.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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