Effects of proton beam irradiation on seed germination and growth pattern of tobacco (Nicotiana tabacum L. cv. BY-4; N. plumbaginifolia) and rice (Oryasativa L.) plants were estimated to develop the efficient conditions of irradiation. Seed germination rate was decreased by increasing the proton beam the current and the beam irradiation time in both tobacco and rice seeds. The beam irradiation conditions showing $50\%$ germination were over 60 sec at 10 nA, approximately 5 sec at 100 nA and at 500 nA beam current in tobacco seeds. And the conditions of $50\%$ germination were 60 sec at 10 nA, and 100 nA and 30 sec at 500nA in rice (cv. Dongjin 1) seeds. The growth of irradiated plants was decreased, but significant difference in morphological changes was not observed by the proton beam treatment. The proton beam is able to use as a mutagen, but some of the factors including beam size and beam detector-system must be established for efficient usage of the beam.
Tobacco rattle virus(TRV) was detected from Gladiolus hybridus, Crocus spp. and Narcissus spp. leaves show-ing notched or stripe on the leaf and malformation symptoms collected from Daegu and Kyungbuk province by electron microscopy (EM), immunosorbent electron microscopy (ISEM) and host range study. Direct negative staining method by EM showed rigid rod long particles 170~200$\times$22 nm and rigid rod short particles 40~114$\times$22 m. TRV-K isolated from G. hybridus propagated with Nicotiana tabacum. TRV coat protein(CP) gene was amplified using specific oligonucleotide primer by RT-PCR. Sequence analysis of amplified CP gene showed 99.5% nucleotide similarity to TRV-ORY.
$Potato$$virus$$X$ (PVX) replication is precisely regulated by regulatory viral sequences and by viral and/or host proteins. In a previous study, we identified a 54-kDa cellular tobacco protein that bound to a region within the first 46 nucleotides (nt) of the 5' non-translated region (NTR) of the viral genome. Optimal binding was dependent upon the presence of an ACCA sequence at nt 10-13. To identify host factors that bind to 5' NTR elements including AC-rich sequences as well as stemloop 1 (SL1), we used northwestern blotting and matrixassisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry for peptide mass fingerprinting. We screened several host factors that might affect PVX replication and selected a candidate protein, $Nicotiana$$tabacum$ WRKY transcription factor 1 (NtWRKY1). We used a $Tobacco$$rattle$$virus$ (TRV)-based virus-induced gene silencing (VIGS) system to investigate the role of NtWRKY1 in PVX replication. Silencing of $WRKY1$ in $Nicotiana$$benthamiana$ caused lethal apical necrosis and allowed an increase in PVX RNA accumulation. This result could reflect the balancing of PVX accumulation in a systemic $N.$$benthamiana$ host to maintain PVX survival and still produce a suitable appearance of mosaic and mottle symptoms. Our results suggest that PVX may recruit the WRKY transcription factor, which binds to the 5' NTR of viral genomic RNA and acts as a key regulator of viral infection.
This Study was conducted to estimate the degree of dominance and gene frequency of some sueful characters in tobacco. The eight parents and a set of 28 crosses of F'1s was F'2s were used as materials, and planted on oriental's and burley cultivated system as randomized block designs, respectively. The observed characters were six agronomic characters which were plant height, number of leaves per plant, leaf length, leaf width, days to flowering and yield, and the data obtained from the experiment were analyzed from methods by Hayman's and Jinks. The results obtained are summarized as follows: 1. In Vr-Wr graphical analysis, number of leaves per plant, leaf length, days to flowering and yield were found to be inherited in partial dominance, and plant height was over dominance to be similar to complete dominance, but leaf width was inherited with partial dominance close to complete dominance. 2. In the gene frequency, two varieties Xanthi-Basma and KA 102, for days to flowering and yield had larger number of dominant genes as those were situated near the point of origen. 3. Additive effects of genes(D) were greater than dominance effects of Genes(H) for six agronomic characters except plant height, and mean degree of dominance over all loci was lower than 1 for days to flowering yield, leaf length and number of leaves per plant.
The study was conducted to obtain the genetic informations for some useful characters in tobacco breeding. The eight parents and a set of 28 crosses of F1's and F2's were used as materials, and planted on two different cultivated systems, i. e., oriental's and burley systems, during 1986-1988 at taegu Experiment Station, Korea Ginseng & Tobacco Research Institute. The observed characters were six agronomic characters which were plant height, number of leaves per plant, leaf length, leaf width, days to flowering, yield and five chemical components, nicotine, total nitrogen, protein nitrogen, total volatile base and pet, ether extract. The results obtaining are summarized as follows: 1. The higher heritabilities were found for days to flowering yield and nicotine in both generations, but values for number of leaves per plant, leaf length, total nitrogen and protein nitrogen were lower than other characters. 2. Genotypic correlation coefficients among all pairs of characters were slightly higher than the corresponding phenotypic correlations in F1's and F2's on two different cultivated systems. The relationship between leaf length and leaf width was the positive correlation, but that between number of leaves per plant and leaf width was negative. 3. From the genotypic correlations between yield and other characters, a conclusion that the yield was highly correlated with plant height, leaf length, leaf width and days to flowering was given. 4. Quality was positively correlated with number of leaves per plant and nicotine, but negatively with the other agronomic characters and chemical components.
Sohn, Seong-Han;Choi, Min-Sue;Kim, Kook-Hyung;Lomonossoff, George
Plant Biotechnology Reports
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v.5
no.3
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pp.273-281
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2011
Diverse epigenetic phenotypes are frequently found during research on transgenic plants. To understand the factors underlying such diversity, hundreds of independent 35S-GFP transgenic N. benthamiana plants were analyzed. The diverse GFP-expression phenotypes of the transgenic plants were classified into three major types based on the GFP expression patterns and their response to 35S-GFP agroinfiltration: steady-green, silenced and non-uniform phenotype. The non-uniform phenotype was further sub-divided into five minor phenotypes: variegated, red-dropped, on-silencing, partitioned and misty, according to the distribution of GFP expression on the leaves. Many of transgenic plants continuously generated diverse phenotypes over several generations despite the transgene identity. Such epigenetic GFP phenotyping was found to be the result of spontaneous transgene silencing mediated by either or both of post-transcriptional gene silencing (PTGS) and transcriptional gene silencing (TGS). This finding was verified by the detection of 21- and 24-nt small interfering RNA (siRNA) molecules, and DNA methylation in the transgenic plants that showed repeated epigenetic variation. Agroinfiltration demonstrated that irregular distribution of GFP on a leaf was the result of erratic transgene silencing, and the technique also proved to be a rapid and effective method for selecting fully silenced plants within 3 days. Furthermore, two novel phenotypes described are potential materials for in-depth investigations into the genes and mechanisms responsible for spontaneous transgene silencing.
Kim, Kee-Yeun;Kwon, Suk-Yoon;Song, Jae-Young;Lee, Haeng-Soon;Kwak, Sang-Soo
Journal of Plant Biotechnology
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v.31
no.2
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pp.175-178
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2004
Transgenic tobacco (Nicotiana tabacum L. cv Bright Yellow-2) cell lines expressing a human histone H1.5 (referred to as hH1.5), which suppress collagen-induced rheumatoid arthritis, were developed under the oxidative stress-inducible peroxidase (SWPA2) promoter. Tobacco BY-2 cells were transformed by Agrobacterium-mediated method. The kanamycin-resistant calli were selected on the modified MS medium containing 150mg/L kanamycin and 300mg/L claforan. Transgenic cell lines were confirmed by PCR and northern blot analysis. Recombinant hH1.5 (rhH1.5) protein (42 kDa) was also detected by Western blot analysis, showing a different molecular weight of human hH1.5 (32 kDa). These results suggested that a hH1.5 gene was properly introduced in tobacco cultured cells under the control of SWPA2 promoter. The further characterization of rhH1.5 protein remains to be studied.
It failed occasionally to take a reasonable emergence rate since tobacco (Nicotiana tabacum L.) seeds were planted on late Jan. showing lowest temperature. This experiment was done to measure the effect of GA3 (concentration ; period) , light quality (red ; white ; dark) during or after its treatment, daily irradiation hours( 0 ; 8 ; 12 ;16) and germination termperature (20 or 10 $^{\circ}C$ ocnstant ; 20/1$0^{\circ}C$ alternating) on the germination rate. Red and white light given during grmination showed no differences between the other daily irradiation hours except that 8 hours red light delayed germination although their 12 hours irradiation had the gratest rate. The rate was increased with increased concentration to GA3 0.01 mM or increased imbibition period to 3 days although the rate of cv. NC 82 was less than that of cv. Burley 21 in the case of dark imbibition of GA3 but daily 12 hours irradiation during germination. Light quality forced during GA3 imbibition eliminated such effect of GA3 shown in the darkness so that only light quality pretreatment and termperature during germinition were affected on the rate. The germination rate of thecultivars was decreased in the order of red, white light, darkness meaning that it was highly influenced by the light quality during GA3 treatment. Regardless of GA3 or light quality treatment,on the other hand, the rate was greater in 20 $^{\circ}C$ constat than 1$0^{\circ}C$ constant and 20/1$0^{\circ}C$ alternating germination temperature having similar germinative patterns.
Yu, Ji Hee;Kim, Keun Pill;Park, Soo Min;Hong, Choo Bong
Molecules and Cells
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v.19
no.3
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pp.328-333
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2005
Small heat shock proteins (sHSPs) are widely distributed, and their function and diversity of structure have been much studied in the field of molecular chaperones. In plants, which frequently have to cope with hostile environments, sHSPs are much more abundant and diverse than in other forms of life. In response to high temperature stress, sHSPs of more than twenty kinds can make up more than 1% of soluble plant proteins. We isolated a genomic clone, NtHSP18.3, from Nicotiana tabacum that encodes the complete open reading frame of a cytosolic class I small heat shock protein. To investigate the function of NtHSP18.3 in vitro, it was overproduced in Escherichia coli and purified. The purified NtHSP18.3 had typical molecular chaperone activity as it protected citrate synthase and luciferase from high temperature-induced aggregation. When E. coli celluar proteins were incubated with NtHSP18.3, a large proportion of the proteins remained soluble at temperatures as high as $70^{\circ}C$. Native gel analysis suggested that NtHSP18.3 is a dodecameric oligomer as the form present and showing molecular chaperone activity at the condition tested. Binding of bis-ANS to the oligomers of NtHSP18.3 indicated that exposure of their hydrophobic surfaces increased as the temperature was raised. Taken together, our data suggested that NtHSP18.3 is a molecular chaperone that functions as a dodecameric complex and possibly in a temperature-induced manner.
Ground-based remote sensing can be used as one of the non-destructive, fast, and real-time diagnostic tools for predicting yield, biomass, and nitrogen stress during growing season. The objectives of this study were: 1) to assess biomass and nitrogen (N) status of tobacco (Nicotiana tabacum L.) plants under N stress using ground-based remote sensors; and 2) to evaluate the feasibility of spectral reflectance indices for estimating an application rate of N and predicting yield of tobacco. Dry weight (DW), N content, and N uptake at the 40th and 50th day after transplanting (DAT) were positively correlated with chlorophyll content and normalized difference vegetation indexes (NDVIs) from all sensors (P<0.01). Especially, Green NDVI (GNDVI) by spectroradiometer and Crop Circle-passive sensors were highly correlated with DW, N content and N uptake. The yield of tobacco was positively correlated with canopy reflectance indices measured at each growth stage (P<0.01). The regression of GNDVI by spectroradiometer on yield showed positively quadratic curve and explained about 90% for the variability of measured yield. The sufficiency index (SI) calculated from data/maximum value of GNDVI at the $40^{th}$ DAT ranged from 0.72 to 1.0 and showed the same positively quadratic regression with N application rate explaining 84% for the variability of N rate. These results suggest that use of reflectance indices measured with ground-based remote sensors may assist in determining application rate of fertilizer N at the critical season and estimating yield in mid-season.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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