Park, Kwang-Hyun;Rho, In-Whan;Park, Byung-Hyun;Kim, Jong-Suk;Kim, Hyung-Rho
BMB Reports
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v.32
no.3
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pp.273-278
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1999
Cytolysin produced by Vibrio vulnificus has been known to be lethal to mice by increasing vascular permeability and neutrophil sequestration in the lung. In the present study, a cytotoxic mechanism of V. vulnificus cytolysin on the neutrophil was investigated. Cytolysin rapidly bound to neutrophils and induced cell death, as determined by the trypan blue exclusion test. V. vulnificus cytolysin caused the depletion of cellular ATP without the release of ATP or lactate dehydrogenase. Formation of transmembrane pores was evidenced by the rapid efflux of potassium and 2-deoxy-D-[$^3H$]glucose from cytolysin-treated neutrophils. It was further confirmed by the rapid flow of monovalent ions in the patch clamp of cytolysin-treated neutrophil membrane. The pore formation was accompanied by the oligomerization of cytolysin monomers on the neutrophil membrane as demonstrated by immunoblot, which exhibited a 210 kDa band corresponding to a tetramer of the native cytolysin of $M_r$ 51,000. These findings indicate that V. vulnificus cytolysin rapidly binds to the neutrophil membrane and oligomerizes to form small transmembrane pores, which induce the efflux of potassium and the depletion of cellular ATP leading to cell death without cytolysis.
In this study, during the activation of neutrophil responses by sodium fluoride. involvement of protein tyrosine kinase was studied. Respiratory burst lysosomal enzyme release and elevation of $[Ca^{2+}]_i$stimulated by sodium fluoride in neutrophils were inhibited by protein kinase inhibitors, genistein and tyrphostin. The inhibitory effect of genistein and tyrphostin on superoxide and $H_{2}O_{2}$ production was less than that of protein kinase C inhibitors, staurosporine and H-7. Staurosporine and H-7 had little or no effect on the release of myeloperoxidase and acid phosphatase stimulated by sodium fluoride. EGTA and verapamil inhibited the elevation of $[Ca^{2+}]_i$ evoked by sodium fluoride. The inhibitory effect of staurosporine on the elevation of $[Ca^{2+}]_i$ was less than that of genistein. Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)-stimulated superoxide production, which is sensitive to staurosporine, was further enhanced by genistein, whereas the stimulatory action of PMA on myeloperoxidase release was inhibited by genistein. A pretreatment of neutrophils with PMA signifcantly attenuated sodium fluoride-evoked elevation of $[Ca^{2+}]_i$ These results suggest that protein tyrosine kinase may be involved in the activation process of neutrophil responses due to direct stimulation of guanine nucleotide regulatory proteins. In neutrophil responses, PMA-stimulated neutrophils appear to show a different type of inhibition of protein tyrosine kinase.
Background and Objectives: Aroma therapy using Eucalyptus Globulus essential oil for curing allergic rhinitis is an inhalation treatment which has been applied as an aid to oriental clinics which use a fundamental treatment such as acupuncture and herbs. There have been no studies so far performed on the effect of this oils' use, only . We aimed to find out the therapeutic effect of its exclusive use only on an Animal Model with Allergic Rhinitis. Materials and Methods: Sprague-Dawley rats were induced the allergic rhinitis by ovalbumin solution. And then, rats in the treated group were treated by diffusing Eucalyptus essential oil in a flask for 7 days. Compared with the treated group, rats in the control group were treated by diffusing normal saline in a flask for 7 days. We observed changes in glandular cells and mast cells in nasal mucosa and submucosa; also changes in the number of eosinophils and neutrophils in blood and the succus of rhinenchysis. Results: The number of neutrophils in the succus of rhinenchysis was significantly decreased in treated group compared with control group(p<0.05). The number of neutrophils in blood and mast cells in nasal mucosa were decreased in the treated group but, these were not significant statistically(p>0.05). Histologic changes showed edema; congestion and expansion of grandular cells in nasal submucosa and hypertrophy of epithelium in nasal mucosa were decreased in treated group compared with control group. Conclusions: The results may suggest that the inhalation treatment using Eucalyptus essential oil decreases the inflammatory response on an Animal Model with Allergic Rhinitis.
Bovine drumstick of neutrophil leucocytes was studied on the quantitative and morphological characteristics and was evaluated as a diagnostic measure for bovine freemartin in newborn calves. Nuclear area of neutrophil (A, ${\mu}m^2$) and drumstick area (B, ${\mu}m^2$) were significantly correlated with average diameter of drumstick (ADD, ${\mu}m$) and following regression equations were obtained : $A=45({\pm}3)$ ADD-8, r = 0.74, $s.e.{\pm}0.6$, p < 0.01, $B=1.72({\pm}0.05)$ ADD-0.98, r = 0.93, $s.e.{\pm}0.1$, p < 0.01 Eight female siblings of heterosexual multiplets were diagnosed as freemartin from the results of chromosome analysis. Heterosexual multiplets had a very low frequency of drumstick in the nucleus of neutrophils irrespective of genetic sex. Diameters of drumstick fund in freemartin and male cotwin did not differ from those of normal cows. Examinations of drumstick in 800 neutrophils for both female and male siblings are concluded to be the best way to aid the detection of freemartinism of heterosexual twins at early life.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1995.04a
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pp.92-92
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1995
It has been suggested that oxygen-derived free radicals have an important role in the pathophysiology of acute gastric ulceration induced by NSAIDs and ischemia-reperfusion. Taurine is hypothetized to exert its protective effect on NSAIDS-induced gastric injury by its antioxidant properties, Protect ive effect of taurine on indomethacin-induced gastric mucosal lesion and its protective mechanism were investigated. Intragastric administration of 25 mg/kg of indomethacin induced hemorrhagic lesions on the glandular stomach in rats, Pretreatment with 0.25 g/kg of taurine for 3 days significantly reduced the gastric lesion formation and Inhibited the elevation of lipid peroxide level In gastric mucosa. Both resting and FMLP-induced luminol-dependent chemiluminescence of rat peritoneal neutrophils increased immediately after treatment of indomethacin. 5-20mM of taurine inhibited chemiluminescence of neutrophils activated by indomethacin and/or FMLP. Human neutrophils (polymorphonuclear leukocytes) significantly adhered to confluent monolayer of human umbilical vein endothelial cells(HUVEC) after coincubation with aspirin or indomethacin. Also taurine prevented neutrophil adhesion induced by these drugs to HUVEC in dose-dependent manner. These results indicate that the protective effect of taurine against NSAIDS-induced gastric mucosal Injury is due to its antioxidant effect, which inhibits lipid peroxidation and neutrophil activation.
In order to investigate the effects of YOOKMIJIHWANGTANG, GAMIJIHWANGTANG and PALMIJIHWANGTANG on the various immune responses, the chemotactic, adherent, nitric oxide release ability of macrophages were studied in vivo and in vitro. The results obtained were follows : 1. The total number of peritoneal exudate cells from mice injected with three drugs were 2~3 times more than those from the PBS. 2. The administration of three drugs enhanced significantly the Fc receptor mediated activity(phagocytosis, rosette formation activity). 3. The administration of three drugs enhanced significantly the chemotactic activity of peritoneal macrophages. 4. The administration of three drugs enhanced significantly the adherent activity of macrophages and neutrophils. 5. The administration of GAMIJIHWANGTANG and PALMIJIHWANGTANG enhanced significantly the chemotatic activity of macrophages (p<0.01). And also the administration of YOOKMIJIHWANGTANG enhanced significantly the chemotatic activity of macrophages(p<0.05). 6. The administration of GAMIJIHWANGTANG and enhanced significantly the chemotatic activity of neutrophils(p<0.01). And also the administration of YOOKMIJIHWANGTANG and PALMIJIHWANGTANG enhanced significantly the chemotatic activity of neutrophils(p<0.05). From above findings, it is suggested that YOOKMIJDTWANGTANG, GAMIJIHWANGTANG and PALMIJIHWANGTANG seems to produce the increase of immune response such as the Fc receptor activity, chemotactic activity, adherent activity, nitrate release of macrophages. From the above results, the GAMIJIHWANGTANG among three drugs may be the most useful drug having immunostimulating effects.
It has been suggested that oxygen-derived free radicals play an important role in the pathophysiology of acute gastric ulceration induced by NSAIDs and ischemia-reperfusion. Taurine is hypothetized to exert its protective effect on NSAIDs-induced gastric injury by its antioxidant properties. Protective effect of taurine on indomethacin-induced gastric mucosal lesion and its protection mechanism were investigated. Intragastric administration of 25 mg/kg of indomethacin induced hemorrhagic lesions on the glandular stomach in rats. Pretreatment with 0.25 or 0.5 g/kg of taurine one day before or for 3 days significantly reduced the gastric lesion formation and inhibited the elevation of lipid peroxide level in gastric mucosa. The luminol-dependent chemiluminescence of rat peritoneal neutrophils increased immediately after treatment of FMLP or indomethacin. Taurine (5-20 mM) inhibited chemiluminescence of neutrophils activated by FMLP. Human neutrophils (polymorphonuclear leukocytes) significantly adhered to the confluent monolayer of human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) after coincubation with indomethacin. This neutrophil adhesion induced by indomethacin to HUVEC was prevented by taurine in a dose-dependent manner. These results indicate that the protective effect of taurine against NSAIDs-induced gastric mucosal injury is due to its antioxidant effect, which inhibits lipid peroxidation and neutrophil activation.
In acute lung injury (ALI) by lipopolysaccharide (LPS), the underlying cause of infiltration and migration of neutrophils into the alveoli is considered to be from increased production of platelet-activating factor (PAF) in the pulmonary surfactant lining the alveolar lumen. In this study I partially confirmed this concept. LPS increased lung leak and the infiltration of neutrophils in the lung of rats given LPS intratracheally. The migration of neutrophils into the lung, which had caused oxidative stress, was also morphologically identified. I verified that the metabolism of the pulmonary surfactant was affected and that there was increased production of PAF in the pulmonary surfactant, both of which are considered to contribute to ALI by LPS in rats.
Der p 1 and Der p 2 are essential allergens of house dust mite associated with the development of asthma. In the present study, we examined whether Der p 1 and Der p 2 induce a release of S100A8 and S100A9 in monocytes, which are involved in the regulatory mechanism of neutrophil apoptosis. We found that Der p 1 and Der p 2 significantly increased the secretion of S100A8 and S100A9 in normal monocytes. Moreover, S100A8 and S100A9 strongly suppressed the spontaneous apoptosis of normal and asthmatic neutrophils. The inhibitory effect of S100A9 was stronger than that of S100A8, and asthmatic neutrophils showed a higher inhibitory effect than normal neutrophils. S100A8 and S100A9 induced activation of Lyn, Akt, and ERK in a time-dependent manner. These findings elucidate the roles of Der p 1 and Der p 2 in the interaction between monocytes and neutrophils, as well as contributing to our knowledge of the pathogenesis of allergic diseases.
Leukotrienes(LTs) are hewn to act as a mediator provoking tissue response in inflammation. This finding implicates that LTs also play important roles in the pathogenesis of H, pylori-induced gastritis and gastric ulceration. Rebamipide is being currently used as a therapeutics for gastritis and peptic ulcer, but their mechanisms of action have not been known clearly yet. One possibility is that their therapeutic effects are ascribed to interfering with the H. pylori-induced release of LTs from neutrophils and gastric mucosal cells. In the present study, this possibility was tested using $LTB_4$ as the test material in human neutrophils and Kato III cells(gastric adenoma cells as a substitute for gastric mucosal cells). The release of $LTB_4$ from both neutrophils and Kato III cells was time and H. pylori-dose dependent. The maximum release of $LTB_4$ was induced by neutrophils and Kato III cells when these cells incubated with H. pylori $(4.8{\times}10^8\;cells/ml$ for 30min. But in the presence of rebamipide the release of $LTB_4$ from these cells was suppressed in dose dependent manners. The release was completely suppressed at 1.0 mM of rebamipide in neutrophils and 2.0 mM of this drug in Kato III cells, respectively. We also obtained the results that the release of $LTB_4$ was induced by A23187$(Ca^{2+}\;ionophore)$ and the A23187-induced release was also inhibited by rebamipide. It seems that the machanism of action of rebamipide is through its interaction with the level of intracellular $Ca^{2+}$. In view of the roles of $LTB_4$ in inflammatory reaction and the roles of H. pylori in gastritis and peptic ulcer, the effects of this drug observed in this study may contribute to their therapeutic action in these gastric disorders.
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